Дигидрохлориды n-(1, 2, 5-триметил-4-арилпиперидин-4-ил) этил-n-алкил-n-(3, 4-диметоксибензил)аминов, являющиеся ингибиторами кальций-кальмодулинзависимых процессов

) 01.04. С:(В )- -З,4 НС 2 з Э зСК СН 4 В СН С Н (ОСН 2 2 2 в 6 Э Комитет Российской Федерации о патентам и товарным знакам к авторскому свидетельству(71) Институт тонкой органической химии.им,А,Л.Мнджояна(1 ЧаЧб) сн кнг( гСН Аг сн НВг( гСН АгНгнсэ СН эСН 2 НС 1Изобретение относится к органической химии, а именно к дигидрохлоридам Й- ф -(1,2,5-триметил-арилпиперидин- ил)-атил)-й-алкил-й-(3,4-диметоксибензил)аминов общей формулы 5СН СН М з 2 Н СН;ИСН2 НС 1 где й 1 - Сн 2 Рп, 82 - Сн 2 СЙ а); Й 1 Рп, Й 2 СН 2 СЙ (б);В 1- щ, В 2- СНЗ(в), 15 являющимся ингибиторэми кальций-кальмодулинзависимых процессов, которые могут найти применение в медицине.Целью изобретения является поиск малотоксичных соединений,ингибирующих 20 кальций-кальмодулинзависимые процессы и обладающих способностью оказывать антифибрилляторное действие.Поставленная цель достигается предлагаемыми дигидрохлоридами ЩЯ 1,2,5-три метил-арилпиперидин-ил)этил)-Й-алкил -Й-(3,4- диметоксибензил)аминов, которые получают восстановлением алюмогидридом лития. 1,2,5-триметил-арил-цианометилпиперидинов в Й-Р-(1,2,5-триметил-арил пиперидин-ил)этил)амины, конденсацией последних с вератролальдегидом, восстановлением полученных Й-( Р-(1,2,5-триметил-арил и иперидин-ил)этил)- Й-Р-(3,4-диметокси)бензэльдиминов до й ф-(1,2,5-триметил-арил пиперидин- ил)атил)-Й-)В (3,4-диметоксибензил)аминов, цианометилированием последних с образованиемм Й- ф(1,2,5-триметил-арилпипериди(1-4-ил)атил)-й-цианометил-й-(3,4- 40 риметокси)бензиламинов .и метилированием Й-( ф(1 2,5-триметил.фенилпиперидин- ил)этил)-Й,4-диметоксибензил)амина с последующим действием на полученные соединения эфирным раствором хлористого 45 водорода по схеме 81- СН 2 Р В 2- СН 2 СЙ (а);81 РЬ, й 2 СН 2 СЙ (б)й 1 Рп, Й 2 = СНз(в)Исходные 1,2,5-триметил+арил+цианометилпиперидины в качестве полупродуктов для синтеза биологически активныхсоединений являются предметом самостоятельной заявки на изобретение.Строение полученных соединений доказано методом элементного анализа, ИК-МПРспектроскопией и масс-спектрометрически,Чистота определена на 81 Мо ОУ, проявитель - пэры иода.дигидрохлориды й-( ф(1,2,5-триметил 4-бензилпиперидин-ил)-атил-й-цианометил-й-(3,4-диметоксибензил)амина (соединение 1 а), Й-( Я 1,2,5-триметил-фенилпиперидин-ил)атил)-й-цианометил-й-(3,4-диметоксибензил)амина (соединение 1 б) и йф -(1,2,5-триметил-фенилпиперидинил)этил)-й-метил-й-(3,4-диметоксибензил)амина (соединение 1 в) представляют собойбелые порошкообразные вещества со слабым запахом, растворимые в воде, этаноле,нерастворимые в эфире.П р и м е р 1. Й-ф-(1,2,5-Триметил-бензилпиперидин-ил)этиламин (Уа),К охлажденному раствору 4,8 г (0,12моль) алюмогидрида лития в 100 мл сухогоэфира по каплям прибавляют раствор 22 г(0,084 моль) Й-( Р(1,2,5-триметил-бензилпиперидин-ил)-ацетонитрила в 120 мл сухого эфира, поддерживая температуруреакционной среды при 0 С. После охлаждения смесью льда и соли последовательноприбавляют 4,8 мл 15-ного раствора гидроокиси натрия и 14,5 мл воды, отфильтровывают неорганический осадок и послеотгонки эфира остаток перегоняют в вакууме. 8 ыход 18,8 г(85,4), т,кип, 169-171 С/2мм рт.ст., В 1 0,53 (н-бутанол:уксусная кислота;вода, 4:25).Найдено, : М 78,28; Н 10,90; й 10,67;С 17 НгбйгВычислено, : ( 78.41; Н 10,84; й 10,76.ИК-спектр, ю см: 1590, 1610 (С -С аром.),3300, 3370 (й Нг), 5Спектр ПМР (СОСз+ ТМС), д м.д,; 7,20с (5 Н, РЬ); 3,20,-2.37 м (4 Н, СНгйНг, СНгРЬ);222 с(ЗН, йСНз); 2,35-2,00 м (2 Н, 2,5- СН);1,60 с (2 Н, йНг), 1,45 - 1,25 (4 Н, 6-СНг,СНгСНгйНг); 1,35 - 0,80 и (8 Н, З-СНг, 2.5- 10СНз).П р и м е р 2. й-(р-(1,2,5-Триметил-фенилпиперидин-ил)этил)-амин (Чб).Процесс ведуг аналогично примеру 1 с8,5 г (0,22 моль) алюмогидрида лития и 30 г 15(Ча), 14,5 г (0,085 моль)вератролальдегида и 4080 мл бензола кипятят 3 ч с ловушкой Династарка до полного водоотделения. Растворитель удаляют, остальную массуперегоняют в вакууме. Выход 27 г (80,3%),т.кип. 232-233 С/1,5 мм рт.ст. 45Найдено. : С 77,34; Н 8.97; й 6,90.СгбНзбйгОгВычислено, : С 76,43; Н 8,83; й 6,86.ИК-спектр, т см: 1580, 1600 (С-Саром.); 1640 (С=й).Спектр ПМР (СС 4 ТМС),д и,д.: 8,20 с(1 Н, й=СН); 7,35 с (5 Н, СбНб); 7,10-6,65 (ЗН,СбНб); 3,85 с (6 Н, 2-ОСНз); 3,35-2,40 и (6 Н,СНгСНгй, СНгСбНб); 2,25 с (ЗН, йСНз); 1,80 -1,40 м (2 Н, 2,5-СН); 1,40 - 1,0 м (1 ОН, 3,6-СНг,2,5-СНз).П р и м е р 4, й-(р-(1,2,5-трлметил-фенилпиперидин-ил)зтил-й-(3,4-диметоксибензальдимин (Чб). Смесь 20 г(0,08 моль) й-(Я 1,2,5-триметил-фенилпиперидин-ил)этил)амина (Чб), 13,3 г (0.08 моль) вератролальдегида и 80 мл бензола кипятят 3 ч с ловушкой Дина- Старка до полного водоотделения. Удаляют растворитель, оставшуюся массу перегоняют в вакууме, Выход 25,2 г (79,8), т.кип.236 С/2 мм рт.ст,Найдено, : С 76,0; Н 8,75; й 7,22, СгбНз 4 йгОгВычислено, ,: С 76 10; Н 8,69; й 7,10.ИК-спектр. и. см: 1690, 1605 (С-С аром.); 1650 (С-й).Спектр ПМР, д, м.д.; 7,8 с (1 Н, й СН);7,40-7,0 м(5 Н;РЬ); 7,0 - 6,6 и (ЗН, СбНз); 3,30 с и 3,7 с (по ЗН, 2 СНзО); 3,4-2,25 и (6 Н, СНгСНгй, 6-СНг); 2,10-1,63 и (4 Н, З-СНг, 2,5-СН); 2,20 с (ЗН, й СНз); 1,20 д (ЗН, 2-СНз, Л 7 Гц); 0,7 д (ЗН, 5-СНз,= 7 Гц).Масс-спектр, мй ф): 394(М ) (50); 381 (19); 367 (10); 317 (19); 245 (17): 214 (10); 203 (100); 200 (24); 188 (66); 151 (89).П р и и е р 5. й-ф- (1,2,5-Триметил-бензилпиперидин-ил)этил)-й-(3,4-диметоксибензил)амин (а).К раствору 25 г(0,06 моль) ЩЯ 1,2,5- триметил-бензилпиперидин-ил)этил-й (3,4-диметокси)бензальдииина (Уа) в 100 мл метанола при перемешивании добавляют по порциям 3,5 г (0,09 моль) боргидрида натрия так, чтобы температура реакционной смеси не превышала 20 С. Перемешивают при комнатной температуре 1 ч, отгоняют метанол, подщелачивают концентрированным раствором гидроокиси натрия, эксрагируют эфиром, После высушивания сульфатом магния отгоняют эфир, оставшуюся массу перегоняют в вакууме. Выход 24 г (95,5 ф(,). т,кип, 238 С/2 мм рт,ст,Найдено, ; С 76,17; Н 9,45; й 6,93.Сгб Нзбйг ОгВычислено, ,5: С 76,06; Н 9,33, й 6,82.ИК-спектр, м, см. 1590, 1600 (С-С аром.); 3320 (йН).Спектр ПМР (СС 4, ТМС), д м.д.: 7.35- 7,05 м (5 Н, РН); 6,90 - 6,60 м(ЗН, СбНб); 3,8 с (6 Н, 2 СНзО): 3,45 с (2 Н, СНгСбНз), 2,40 - 1,80 м(1 ОН, СНгСНгй, 2,5-СН, 3,6-СНг), 2,2 с (ЗН, йСНз); 1,60 с (1 НйН); 1,20-0,8 и (6 Н, 2,5- СНз).П р и и е р 6. й-, Р.(1,2,5-Трииетил-фенилпиперидин-ил)этил)-й (3,4-диметоксибензил)амин (б),Процесс проводят аналогично примеру 5 исходя из 25 г (0,06 моль) й-( ф(1,2,5-триметил-фенилпиперидин-ил)этил)-й-(3,4 -диметокси)бензальдимина (Чб). Выход 21,0 г (87,1), т,кип. 235 С/2 мм, рт,ст,Найдено, ,: С 75,80; Н 9,12; й 6,95.СгвнзвВгОгВычислено, : С 75,72; Н 9,15; й 7,06.ИК-спектр, м, см: 1590. 1600 (С-С аром.); 3300 (йН).Спектр ПМР (СС 4, ТМС), д м.д.: 7,22 с (5 Н, СвНБ); 6,80-6,60 м (ЗН, СвНБ); 3,80 с (6 Н, 2 СНзО); 3,63 с (2 Н, СНгСвНз); 2,22 с (ЗН, й СНз); 2,73-.1,90 и (10 Н, СНгСНгй, 2,5-СН, 3,6 - СНг); 2,22 с (ЗН, йСНз): 1,84 с (1 Н. йН);1,20 д(ЗН,2-СНз,=6 Гц); 0,73 с(ЗН,5-СНз, ,1 -7 Гц).П р и м е р 7. йЩ 1,2,5-Триметил-бензилпиперидин-ил)этил-й-цианометил-й- (3,4- диметоксибензил)амин (Иа).Смесь 20,5 г (0,05 моль) й- р-(1,2,5-триметил-6 ензилпиперидин-ил)этил)-й-(3, 4-диметоксибензил)амина (Иа) и 66,4 г (1,1 моль) ледяной уксусной кислоты нагревают при перемешивании до 100 С и поддерживают эту температуру в течение 5-7 мин, охлаждаютдо 15 С и прибавляют 1,4 г(0,047 моль) параформа, затем 3,7 г (0,057 моль) цианистого калия, растворенного в 6,6 мл воды. Реакционную смесь перемешивают еще 20 ч, при 40 - 42 С, отгоняют уксусную кислоту, к остатку добавляют эфир, сушат сульфатом магния и после отгонки эфира остаток перегоняют в вакууме. Выход 18,5 г (907;), т.кип, 232 С/1 мм рт,ст. Реакционная масса после перегонки кристаллизуется, т,пл. 115 ОС;Найдено, : С 75,0, Н 8,81; й 9,26.С 28 Н 39 йЗОгВычислено, : 74,90; Н 8,74; й 9,34.ИК-спектр, ю, см 1: 1590, 1600 (С=С аром,); 2250 (Сй),Спектр ПМР (СО 4, ГМДС), д м.д 7,22 (5 Н, СвНв); 7,0-6,8 м (ЗН, Свнз): 3,80 с (6 Н, 2 СНзО); 3,78 с (2 Н, СНгСй); 3,42 с (2 Н, СНгСвНз); 3,0-2,35 м (8 Н, СНгСНгй 2,5-СН);2,30 с (ЗН, йСНз); 2,65-0,90 м (10 Н, 2,5-СНз, 3,6-СНг, 2,5-СН).П р и м е р 8. йЩ 1,2,5-Триметил-фен ил пиперидин-ил)этил)-й-цианометил-й- (3,4- диметоксибензил)амин (1 16).Процесс ведут аналогично примеру 7 исходя из 19,5 г (0,05 моль) й-(Я 1,2,5-триметил-фенилпиперидин-ил)атил)-й-(3,4 -диметоксибензил)амина (И 16), Выход 15,7 г (73,4), т.кип. 250-252 С/2,5 мм рт.ст.Найдено, : С 74,54; Н 8,50; й 9,57.Сг 7 Н 37 йзОгВычислено, : С 74,45; Н 8,56; й 9,64.ИК-спектр, м, см: 1590, 1600 (С-С аром.); 2250 (Сй).Спектр ПМР (СС 4, ГМДМ), д м,д.: 7,20 с (5 Н, СвНБ; 6,67 с (ЗН, СвНБ); 3,80 с (6 Н, 2 СН 30); 3,40 с (2 Н, СНгСй); 3,20 с (2 Н, СНгсвнз); 3,0-1,30 м (10 Н, СнгСНгй, 2,5. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 СН, 3,6-СНг); 2,35 с (ЗН, йСНз); 1.20 д (ЗН, 2-СНЗ = 7 Гц); 0,7 д (ЗН, 5-СНз,= 7 Гц).П р и м е р 9, Щ Я 1,2.5-Триметил-фенилпиперидин-ил)этил)-й-метил-й-(3,4- диметоксибензил)амин (Ив).К 7,9 г (0,02 мол ь) й- р,2,5-триметил- фенилпиперидин-ил)этил)-й-(3,4-диметоксибензил)амина (И 1 а) при охлаждении и перемешивании прибавляют 8 г (0,15 моль) 90-ной муравьиной кислоты и 3,4 г (0,046 моль) 40-ного раствора формалина. Смесь нагревают 8 ч, при 96 - 98 С, охлаждают и прибавляют 12,3 мл 40;6-ного раствора гидроокиси натрия, экстрагируют эфиром, сушат сернокислым магнием, эфир отгоняют, остаток перегоняют. Выход 4;5 г (55, т,кип. 228 С/мм рт.ст.Найдено, : С 76,12; Н 9,42; й 6,74.СгвНзайгОгВычислено: С 76,05; Н 9,32; Т 6,82, ИК-спектр, и, см: 1590, 1600 (С"С, аром.),Спектр ПМР (дигидрохлорйд, СНЗОН, ТМС), д м,д.; 7,80 - 7,20 м (5 Н, СвНв); 7,20- 6,90 м (ЗН, Свнз); 4,20 с (2 Н, Снгсвнз); 3,85 с(6 Н, 2 СНзО); 2,85 - 2,63 м (6 Н, 2 СНзй); 2,60- 1,80(10 Н, 2,5-СН, 3,6-СНг, СНгСНгй); 1,80- 0,80 м (6 Н, 2,5-СНз).П р и м е р 10. Дигидрохлорид й- р- (1,2,5-Триметил-бензилпиперидин-ил) . атил)-й-цианометил-й-(3,4- диметоксибензил)амина (1 а).К раствору 4,5 г (0,01 моль) й-Я 1,2,5- триметил-бензилпиперидин-ил)атил-й-цианометил-й-(3,4-диметоксибензил)амина (Иа) в 200 мл сухого эфира добавляют эфирный раствор хлористого водорода до слабокислой реакции, Фильтруют, промывают абсолютным эфиром, сушат в вакуумэксикаторе. Выход 4,8 г (93,2), т,пл.196-197 С, Вг 0,62 (вода:спирт:ацетон, 0,5:1:3).Найдено, 6: С 64,42: Н 8,0; й 8,10; С 13,65,Сг 8 Н 41 йзОгСг.Вычислено, ; С 64,35; Н 7,90. й 8,03; С 13,57.Масс-спектр, м/г, (3 ь): 449(М+) (6); 434 (10); 409 (67); 298 (57); 202 (33); 151 (1 00); 59(21); 31 (49). П р и м е р 11. Дигидрохлорид й- р- (1,2,5-триметил-фен ил пиперидин-ил) атил)-й-цианометил-й-(3,4- диметоксибенэил)амина (16),Процесс ведут аналогично примеру 10 исходя из 4,4 г (0,01 моль) Щ р-(1,2,5-триметил-фенилпиперидин-ил)атил)-й-цианометил-й-(3,4- диметоксибензил)амина (Иб).(21); 99 (17); 98 (43); 91 (23); 70 (20); 58 (45),Биологические свойства соединений 1 а1 в исследовали в опытах и чИго и 1 п ч 1 чо.В опытах 1 п ч 1 тго испытания проводилина изолированным роге матки крысы, наотрезке портальной вены крысы и на полоске аорты кролика. Степень активности соединения определяли по величинемолярной концентрации, ингибирующей сокращения гладкой мускулатуры на 50.Испытания показали, что спонтанныесокращения рога матки крысы соединения 451 ав и пропиламин ингибируют на 50 ф в10-7 2 5, 10-7 25, 10-78 10 - М соответственно, Сокоащения, вызываемые окситоцином, соединения 1 ав ипренипемин интибирурт не 00 е концептрациях 2,5 10, 3 10 и 1 10 М соответСпонтанные сокращения портальнойвены крысы, соединения 1 ав и прениламин ингибирют на 50 в концентрациях 552 10 , 3 10 , 310 и 110 М соответст"вен но.Изучали действие соединений и на сократительную способность полоски грудной аорты кролика в бескальциевом 80 мМ КС 1 деполяризующем кребс-бикарбонатном растворе, Кальций хлористый добавляли в концентрации 10 М, что вызывало сокращение полоски аорты. которое принималось за 100(у, Соединения добавляли за 20 мин до добавления хлорида кальция. Соединения 1 ав и прениламин ингибируют на 50 сократительную способность аорты в концентрациях 8 10. 1 10, 1 10 и 5 10 7 М соответственно.Действие соединений 1 ав на активность кальций-кальмодулин (Са-КМ) зависимой фосфодиэстеразы, выделенной по методу, определяли согласно, Соединения 1 а 1 в и прениламин в концентрациях 12, 100, 100 и 15 мкМ соответственно ингибируют на 50(уную Са-КМзависимую фосфодиэстеразу.Соединения 1 ав действуют на фосфолирование легких цепей миозина, выделенного из мышц кролика. Включение фосфата в легкие цепи миозина регистрировали по увеличению электрофоретической подвижности легких цепей при электрофорезе в полиакриламидном геле в присутствии 8 М мочевины. Соединения 1 ав и прениламин ингибируют фосфорилирование легких цепей миозина в концентрациях 50, 100, 90, 80 мкМ на 50 соответственно.Известно, что антагонисты кальмодулина могут влиять на пролиферативную активность клеток, . что обусловлено ингибированием периодов 1 и интерфаэы, и тем самым - и на синтез ДНК. В связи с этим исследовали воздействие соединений 1 ав на клеточную пролиферацию в культуре. Для этого использовали линию клеток яичника китайского хомяка. Интенсивность .синтеза ДН К в клетках определяли по включению Н-тимидина. Установлено, что соединения 1 ав в концентрациях 1 10, 1 10 и 2,5 10 М ингибируют пролиферацию на 50. Прениламин аналогичный эффект вызывает в концентрации 2 10 М.Изучено также влияние соединений а- в на течение и исход аритмии у крыс, вызванной внутривенным введением хлорида кальция. У контрольных животных, получивших хлористый кальций, наступает аритмия спустя несколько секунд после его введения. Вслед за этим начинается фибрилляция желудочков, приводящая, в основном, к гибели животного. Установлено, что соединение 1 а в дозе 3 мг/кг предупреждает развитие фибрилляции у 9 из 10 крыс (90- ный эФфект). Соединение 1 б такой же эффект оказывает в дозе 4 мг/кг, однако в этом случае число выживших животных меньше по сравнению с соединением 1 а. Соедине1829346 Таким образом, по влиянию на сократи- тельную способность гладкой мускулатуры матки, спонтанные сокращения отрезка портальной вены крысы, а также на сократительную способность полоски грудной Влияние соединений 1 ав и прениламина на течение и исход хлоркальциевой аритмии у крысФормула изобретенияДИГИДРОХЛОРИДЫ ч-Р -(1,2,5-ТРИМЕТИЛ-АРИЛПИПЕ РИДИН-ИЛ)ЗЧИЛ )-й-АЛ КИЛ-Щ 3,4-Д ИМ ЕТОКСИ Б Е Н 3 ИЛ) АМИНОВ, ЯВЛЯЮЩИЕСЯ ИНГИБИТОРАМИ КАЛЬЦИЙ-КАЛЬМОДУЛИНЗАВИСИМЫХ ПРОЦЕССОВ 20Дигидрохлориды йф -(1,2,5-триметил-арилпиперидин-ил)атил)-Й-алкил-М -(3,4-диметоксибензил)аминов общей формулы25 1 В 2 н сн ксн ксв 2 2 2 2 знсгде Я 1=СН 2 РЬ, йг=СНЯ 1=Р 1, В=СН 2 СН;81=РАЙ, В =СНз,являющиеся ингибиторами кальцийальмодулинзависимых процессов. Составитель Н,Нарышкинаехред М.Моргентал Корректор М.Ткач едактор Н.Козлова каз 1445 Тираж Подпи НПО "Поиск" Роспатента13035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 ние 1 в и прениламин обладают слабой антифибрилляторной активностью.Острая токсичность соединений 1 а - 1 в и прениламина изучена на белых мышах массой 18 - 20 г при внутривенном введении в виде водных растворов. Установлено, что ЛД 5 о соединения 1 а равна 50,3, соединения 1 б 45,6, соединенйя 1 в 31,7 мг/кг. ЛД 5 о прениламина равна 16,1 мг/кг. аорты кролика соединения 1 ав более активны, чем прениламин. В отношении влияния на Са-КМ-зависимые процессы соединение 1 а активнее прениламина, в то 5 время как соединенияб и 1 в несколько уступают ему, Соединения 1 а и 1 б на модели аритмии, вызываемой внутривенным введением хлористого кальция, обладают антиаритмическим действием и предупреждают 10 развитие фибрилляции желудочков сердца,Соединениев и прениламин обладают слабым антиаритмическим действием и почти не обладают антифибрилляторной активностью. Соединения а - 1 в по сравнению с пре ниламином менее токсичны.