Способ получения производных 3, 4, 5-триоксипиперидина

-1 Н-(СН ),сн,он снг МНг НО СН - 5 И - СО - 3. 2 НО ОН подвергают ацилированию. ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ(56) 1. Органикум. Практикум по органической химии. Перевод с немецкого. М, "Мир", 1977, с. 88. Т, 2,с. 90, 216.(5")(57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ 3,4,5-ТРИОКСИПИПЕРИДУФНА ОБЦЕЙ ФОРМУЛЫсн,он БО 1014470 А где В - алкил С -С , пропиламиногруппа, алкоксил С -С Фенил, незамещенный или замещенный хлором, метилом, метоксилом или метилсульфонилом, бензил, карбоксизтил или груп" па 1где й - водород, метил, этоксикарбонил, фенил, бензоиламинометил, цианоили аминогруппа,и означает 0-6,отличающийся тем, что соединение ФормулыИзобретение относится к получению производных 3,4,5-триоксипиперидина общей Формулы НО СН - ЯН-СО-В,3 ЯО ОН10 где В - алкил С -С, пропиламиногруппа, алкоксил С -С Фенил, незамещенный или замещенный хлором, метилом, метоксилом или метильсульфонилом, бензил, карбоксиэтил или группа-ИН-(СН,) -В , где В-. водород, метил, этоксикарбо-, нил, Фенил, бензоиламинометил, цианоили аминогруппа, и означает 0-6, которые могут найти применение в хи.20 мико-Фармацевтической промышленности в качестве средства от диабета гиперлипемии и ожирения, а также в качестве веществ, влияющих на соотношение мяса/мира у животных,Известно ацилирование аминов хлооангидридами и ангидридами кислот, кислотами в присутствии карбодиимидов, изоцианатами Г 11. Целью изобретения является разраЗО ботка на основе известного метода способа получения новых соединений, обладающих ценными Фармацевтическими свойствами.Поставленная цель достигается тем, цто согласно способу полуцения г;роиз- М водных 3,4,5-триоксипиперидина общей формулы 1, где В имеет указанные зна" чения, соединение Формулы45 подвергают ацилированию,П р и м е р 1, 1-Метоксикарбониламинометил-дезоксинойиримицин (В= - ОСН,).1,92 г соединения Формулы 11 раст п воряют в 200 мл воды и 60 мл метанола и раствор смешивают с 1,4 мл триэтиламина." По каплям добавляют 1,2 мл метилхлорформиата в 30 мл этилацетата при 0- -5 С, перемешивают 4 ч при ком 55 натной температуре и реакционную смесь упаривают, Полученный остаток растворяют в смеси метанол - вода(8:1), подают в колонну, содержащую анионит в гидроксильной Форме и элюируют смесью метанол " вода (8:1),Фильтрат упаривают и остатокочища"ют на колонке, содержащей целлюлозу,с применением ацетона в качестве элюента. После перекристаллизации изэтанола получают 1, г (76) чистогопродукта с т,пл. 157 С.Аналогицно получают следующие соединения: 1-этоксикарбониламинометил-дезоксинойиримицин (В = ОСН )с т.пл. 169-172 С, выход - 77l;1-бутоксикарбониламинометил-дезоксинойиримицин (В = ОГ 1 Н 9 ) с т,.пл, 162165 С, выход - 721, "1-нонилоксикарбо ниламинометил-дезоксинойиримицин(1:1)при -20 С а течение 15 мин с0,8 мл фенилизоцианата, Эатем темгературу постепенно повышают до комнатной. После удаления растворителяостаток равделяют на наполненной целлюлозой колонке. Вымывают бутанолом,содержащим 103 воды. Фракции, кото.рые содержат производное дезоксинойиримицина, соединяют и упа 1 ивают.Остаток перекристаллизовывают изэтанола, Выход: 400 мг ( 25,8 ) 1 в (И-фенилуреидометил)-1-дезоксинойиримицина с точкой плавления 161-162 С.Аналогично примеру 2 получают:1-(И-бензилуреидометил)-1"дезоксиноииримицин (В = ИНГНС 6 Н.) ст,пл,. 176 С, выход 261; 1-(И -метилуреидометил)-1-дезоксинойиримицинс т.пл. 148 С (В = Инсн), выход353; 1-(И-п-бутилуреидометил)-.1 -35 этанола и по каплям добавляют раствор 2,84 мл сложного этилового эфира изоцианатоуксусной кислоты в 60 мл уксусного эфира при 0-5 С. Затем перемешивают при 20-25 С в течение 18 ч,5 сгущают и очищают хроматографией наколонке, содержащей целлюлозу, с применением 853-ного ацетона в кацестве элюента. Получают 2,1 г (337 Ф) продукта в виде бесцветной пены. 1 ОП р и м е р 4. 1-Ацетамидометил-дезоксинойиримицин (В = СН),К 3,8 г соединения формулы 11 в 40 мл смеси метанол - вода (1 : 1)опри 0 С добавляют 3 мл уксусного15 ангидрида. Перемешивают в течение15 мин при 0 С и в течение 30 мин при комнатной температуре. Затем упаривают досуха в ротационном испарителе. Остаток растворяют в 60 мл во ды и нейтрализуют основным ионитомо(ОН -форма). После удаления ионита снова упаривают досуха и остаток два раза перекристаллизовывают из этанола. 25Выход 3 г (6413) 1-ацетамидометил"1-дезоксинойиримицина с точкой плавления 169-171 С.Аналогично примеру 4 получают1-бензоиламинометил-дезоксинойиримицин (В = С,Н) с т.пл. 216 С(из метанола), выход - 645/.П р и м е р 5. 1-Пропиониламинометил-дезоксинойиримицин (В = С,Н 5).К 2,88 г соединения формулы 11 и 0,975 г гидроокиси калия в 30 мл метанола и 30 мл воды по каплям добавляют 1,94 мл хлорангидрида пропионовой кислоты при 10 С. После размешивания при 0 С в течение 2 ц ещеораз добавляют 0,49 г гидроокиси ка 40 лия и 0,97 мл хлорангидрида припионовой кислоты при -10 С, После двухО цасового перемешивания при 0 С реакционную смесь упаривают, остаток разбавляют водой, подают в колонну, со 45 держащую катионит Амберлит 1 Р 120 в водородной форме и элюируют снацала водой и затем разбавленным аммиаком. Аммиачный элюат упаривают досуха и остаток очищают хроматографией на колонке, содержащей целлюлозу, с применением смеси ацетона с водой в качестве элюента. После перекристаллизации из метанола получают 14 г (3764) продукта с т,пл. 183-185 С, 55 Аналогично получают следующие соединения: 1-(изовалериламинометил)-1 - "дезоксинойиримицин (В = СНСН(СН) ) 70 4с т,пл. 193-195 С выход - 368 д;1-валериламинометил-дезоксинойиримицин (В = СН) с т.пл.191 С, выход - 375:; 1-гептаноиламинометил- -1-дезоксинойиримицин (В = С Н ) со6 з т.пл. 202 С выход - 38:.,; 1-октаноиламинометил-дезоксинойиримицин (В = С Н ) с т,пл. 205 С выход 37,М; 1-(4-аминобутириламинометил)- - 1-дезоксинойиримицин (В = (СН) ЙН ) с т.пл. 185 С, выход - 38,2; 1 о 0 в (М-бензоиламиногексилуреидоме-О тил)-1-дезоксинойиримицин с т.пл.195 (В = МН(СН ) СН ИНСОГ Н), выход, - 362/.П р и м е р 6. 1-(4-Иетоксибензамидометил)-1-дезоксинойиримицин (В = 4-СН ОС Н ).54 г соединения формулы 11 растворяют в смеси 14,1 мл воды и 42,3 мл метанола и смешивают с 3,94 мл триэтиламина. При О С добавляют 5,26 г хлорангидрида И -метоксибензойной кислоты в 21,2 мл уксусного эфира. Перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч, добавляют 54 мл этанола, размешивают при 00 С в течение 1 ц, выпавший твердый продукт отсасывают и промывают этанолом. Получа" ют 5,35 г (5831) бесцветных кристаллов с точкой плавления 224-226 С (разложение).Аналогичным образом получают: " -фенацетиламидометил-дезоксинойиримицин (В = СН С 6 Н 5) с т.пл. 164-167 С выход - 558 В; 1-(3-метилбензамидометил)-1-дезоксинойиримицин (В = = 3-СНС 6 Н с т.пл. 205"С, выход - 5653; 1 в (4-нитробензамидометил)- -1-дезоксинойиримицин (В = 1-МОСН 5) с т.пл. 246-248 С (из воды), выход 5820; 1 4-хлорбензамидометил)-1-дезоксинойиримицин (В = 4-С 1 Сь Н) с т,пл. 249 С, выход - 58,8; 1-( 4- -метилбензамидометил)-1-дезоксинойиримицин (В = 4-СНС 6 Н) с т.пл.242 С, выход - 60/; 1-(2-метилсульфонилбензамидометил)-1-дезоксинойиримицин (В = 2-СНО 5 Г Н) с т.пл,227 С выход - 591.П р и м е р 7, 1-(3-Цианопропиониламинометил)-1-дезоксинойиримицин (В = СН СН СМ).3 г соединения формулы 11 в 30 мл диметилформамида и 3 мл воды смешивают с 3,1 г дициклогексилкарбодиимида и 1,5 г 3-цианопропионовой кислоты. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в10144 течение ноци. Затем добавляют еще1,55 г дициклогексилкарбодиимидаи 075 г 3-цианопропионовой кислоты.Перемешивают при комнатной температуре в тецение 2 ч, Затем разбавляют водой и осадок фильтруют, фильтрат упаривают и остаток очищают хроматографией на колонке содержащейцеллюлозу, с применением смеси ацетона с водой в кацестве элюента.После кристаллизации из этанола получают 2,0 г ( 487 Ф ) продуктас т,п. 174-175 С,П ример 8. й С Н СООН, 1-(3-Карбоксилпропиониламинометил)-1-дезоксинойиримицин.3,8 г соединения формулы 11 в80 мл пиридина и 16 мл воды смешивают с 2,4 мл хлорангидрида янтарной кислоты и реакционную смесь пе- оремешивают при комнатной температуре в течение 3 ч. Затем упариваюти остаток подают в колонну, содержащую ионит Дауэкс 1 х 2 в гидроксильной Форме с последующей элюцией 25сначала водой, затем смесью воды сэтанолом (3:1) и в заключение 13-нойуксусной кислотой. Уксуснокислыйэлюат упаривают и остаток смешиваютс ацетоном, Отсасывают, растворяют 5 Ов воде и снова упаривают. Получают17 г (29 й) продукта с т,пл. 196197 ССвойства производного 3,4,5-триоксипиперидина (к.= ОСН) иллюстри-,.3 35руются следующим,Определение степени ингибированияЭтот тест в пробирке дает возможность определить ферментингибирующуюактивность вещества путем сравнения активности растворенного кишецного комплекса дисахаридазы в присутствии и в отсутствии ( 1004 значениеингибитора. В качестве с бстрата ис 45пользуют практицески свободную отглюкозы сахарозу ( глюкоза100 ч.на млн.) . Определение активности фермента основывается на спектрофотометрическом определении выделеннойв результате реакции глюкозы посред 50ством дегидрогеназы глюкозы и никотинамид-аденин-динуклеатида в качествекофактора.Одна единица ингибитора сахарозы(1 Е) определена как такая ингибиру 55ющая активность, которая в определенной исходной смеси теста восстанавливает заданную сахаролитическую 70 бактивность на одну единицу (единицасахаразы = 5 Е); единица сахаразы определяет активность ферментов, которая при данных условиях расщепляет1 мкмоль сахарозы в минуту и этимосвобождает каждый раз 1 мкмоль глюкозы, которая определяется тестом,и фруктозы, которая тестом не определяется.Кишечный комплекс дисахаридазы получают из слизистой оболочки тонкогокишечника свиньи путем триптическогопереваривания, осамдения из 66/этанола при -20 С поглощения осадкав 100 мМ Фосфатного буфера рН 70и диализа против буфера.10 мкл пробного раствора, которыйприготовлен так, что экстинкции исходной смеси меньше на 103 неразбавленного комплекса дисахаридазы в 0,1 Ммалеинового буфера рН 6,25, предварительно инкубируют при 37 С в течение10 мин. Разбавление комплекса дисахаридазы следует устанавливать на активность 0,1 5 Е/мл.Затем начинают сахаролитическую реакцию путем добавления 100 мкл раствора 0,4 м сахароэы (5 егча 35579) в0,1 м малеинового буфера рН 6,25 поистечении 20 мин инкубиоования при37 С реакцию прекращают путем добавления 1 мл глюкоза-гидрогеназа-реактива (1 флакон смеси глюкозы и дегидрогеназы лиофилизованной ( Меск14053) и раствора 331,7 мг-никотинамид-аденин-динуклеатида ( свободнаякислота, нБерингерн степень чистоты 1)в 250 мл 0,5 М трис-буфера, рН 7,6Для определения глюкозы смесь инкубиОруют в течение 30 мин при 37 С и затем при 340 н О Фотометрируют в отношении реактива ( с ферментом без сахаровы),Расчет ингибирующей активности затрудняется тем, что уже незначительное изменение в системе теста, например незначительно варьирующее отопределения к определению значение100 имеет такое влияние на результат теста, которое не может быть оставлено без внимания. Этих затруднений избегают тем, цто при каждом определении берут также стандарт. Вкачестве стандарта служит ингибиторсахароэы формулы Г Н О Н, которыйимеет специфическую активность торможения 77 700 51 Е/г, При знании разницы экстинкций при 340 изначения 100и заторможенной стандартом смеси можно101 из разницы экстинкций и заторможенной пробным раствором смеси, с учетом вэя" того количества ингибитора, известным образом высчитать его тормозящую активность, выражаемую в единицах ингибитора сахароэы на грамм.Специфическая тормозящая сахарозу активность: 1-дезоксинойиримицин 4470 8465000 Б 1 Е/г; 1-метоксикарбониламинометил-дезоксинойиримицин1500000 5 1 Е/г,ф Предлагаемый способ позволяет получать новые соединения, обладающиеценными химико-фармацевтическимисвойствами.Составитель В. Борисова Редактор О. Половка Техреду К.Иыцьо Корректор Г, Решетник Заказ 3044/68 Тираж ч 16 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035 Москва, Ж, Раушсквя наб. д. 4/5 Филиал ППП Патент", г, Ужгород, ул. Проектная,