Способ получения -ацетил -(-)аминофенилуксусной кислоты

Союз Советских Социалистичесйих Республик(51)м. Кл. с присоединением заявки Мо С 07 С 99/12С 07 С 101/04 Государственный комитет СССР ио делам изобретений и открытий(23) Приоритет Опубликовано 25,0280, Бюллетень Мо 7 Дата опубликования описания 2502,80Изобретение относится к усовер" Ъенствованному способу получения Б-ацетил-Р-(-) -А-аминофенилуксусой кислоты, применяемой для получения лекарственных препаратов.В патентной и технической литера" туре известны способы .получения Н-ацетил-О-(-) аминофенилуксусной кислоты, например, селективной крис- щ таллиэацией аммонийной соли М-ацетил-Р,Ь- А -аминофенилуксусной кислоты 1. Способ трудно осуществим в условиях многотоннажного производства из-за кристаллизации рацемата и оптического антипода, а также не обеспечивает достаточно высокую дляФармацевтической промышленности оптическую чистоту конечного продукта.Известен такжеспособ разделения Р,Ь- А -аминофенилуксусной кислоты в виде соли с Р(-)-камфоросульфокислотой 2Недостатком этого способа является необходимость в химическом рас- -,: 25 щеплении диастереоизомерной соли, необходимость в регенерации соединения, используемого для получения соли, и трудность выделения целевого продукта. ЗО Наиболее близким по технической сущности является способ, согласно которому О, Ь- А -аминофенилуксусную кислоту разделяют ферментацией с грибом иэ группы несовершенных рода фузариум Гцзагцв п 1 ча 1 е, который метаболизирует Ь-изомер Р,Ь- А-аминофенилуксусной кислоты. По этому способу указанный микроорганизм предварительно культивируют при температуре 30 еС в течение 24 ч в среде, содержащей, : О,Ь- К-аминофенилуксусную кислоту 0,1; глюкозу 5; аммоний азотнокислый 0,05; дрожжевой экстракт 0,1; магний сернокислый семиводный 0,05; калий хлористый 0,05. Приготовленную культуру инокулируют в основную среду, содержащую, В: О,Ь-с -аминофенилуксус- ную кислоту 1,2; глюкозу 5; калий фосфорнокислый двухэамещенный 0,1; магний сернокислый семиводный 0,05; кальций хлористым дигидрат 0,002;железо треххлористое шестиводное 0,001, Аэрация при.температуре 35 оС в течение 35 ч с последующей обработкой амберлитом 120 в Н-форме дает выход 5,3 г О(-)-4 -аминофенилуксусной кислоты из 1 л ферментационнойжидкости, что составляет 44,2 отколичества, взятого для разделенияР,Ь- Ф -аминофенилуксусной кислоты.Удельное вращение продукта А -169в 1,5 н.соляной кислоте (3,Данный способ имеет следующие недост атки.1. Использование для стереоспецифического ферментативного разделенияР,Ь-А -аминофенилуксусной кислотымикроорганизма Рцзак 1 ив п 1 ча 1 е, ко,торый полностью метаболизирует Ь-изомер, т.е. половину исходного сырья,вследствие чего выход целевого продукта составляет всего 44,2 от взя-.той для разделения Р,Ь-А -аминбфенилуксусной кислоты. 152. Использование для выделенияцелевого продукта ионообменной смолы, что при многотоннажном производстве весьма сложно, дорого и трудоемко. 203. Многокомпонентность и относительная сложность ферментационногосубстрата.4, Конечным продуктом являетсяР-(-) - 1 -аминофенилуксусная кислота, 25которая .для получения Б-ацетил-Р-(-) -- А-аминофенилуксусной кислоты должна подвергаться ацилированию, чтосвязано с дополнительными потерямицелевого продукта.Целью изобретения является устранение указанных недостатков и увеличение выхода и повышение оптическойчистоты целевого продукта.Указанная цель достигается тем,что разделение Б-ацетил-Р,Ь- А -аминофенилуксусной кислоты проводят вприсутствии азотсодержащего кислотного соединения или его соли, например,диэтилдитиокарбамата натрия, нитрилотриуксусной кислоты, иминодиуксусной кислоты или этилендиаминтетрауксусной кислоты. Разделение рацемата проводят, как правило, комплексом ферментов водной вытяжки свиныхпочек, отделенную Ь-(+) -сК -амийоФенилуксусную кислоту возвращают в процесс ацилированием, предпочтительноуксуонймангидридом, при температуре85-100 оС, а целевой продукт выделяютподкислением реакционной массы. 5 рАзотсодержащее кислотное соединение или его соль вводят предпочтительно в количестве 0,005-0,01 моля на1 кг исходной Б-ацетил-Р,Ь-А -аминофенилуксусной кислоты.55Разделение Б-ацетил-Р,Ь-е -аминофенилуксусной кислоты в прибутствйи:,азотсодержащего кислотного соединенияили его соли обесйбчивает получениеБ-ацетил-Р-(-)-д -аминофенилуксуснойкислоты высокой степени оптической 60чистоты, уменьшает расход ферментного сырья, сокращает время проведенияразделения и стабилизируЕт процессвследствие связывания трехвалентныхионов металлов, ингибирующих комплекс 65 Ферментов водной вытяжки свиных по-чек,Возвращениев процесс выделеннойЬ-(+) - Ю -аминофенилуксусной кислотыацилированием при температуре 85100 С обеспечивает снижение потерьи повышение выхода до 93 от теоре"тически возможного, причем исключает .необходимость в рацемизации Ь-(+)-изомера. При температуре 85-100 аСбелки,сопутствуйщие Ь-(+) -изомеру,рейатурируются и легко могут быть,отделены фильтрованием или центриФугйвованием. Выделение целевого продукта провб"дят подкислениеМ реакционной смесидо рН среды ниже 1.При мер 1,1.1. К раствору 1,6 кг (8,29 М)Б-ацетил-Р,Ь- д,-аминофенилуксуснойкислоты, 0,32 кг (8,0 М) гидроокйсинатрия, 2,9 г (0,13 М) тригидратадйэтилдитйокарбамата натрия в 13 лводы при температуре реакционнойсреды 40-42 С и рН 7,3-7,5 прибавляют 0,2 л водной вйтяжки свиных почек, приготовленнойперемешиванием60 г грубомолотых необезжиренныхпочек с 0,25 л воды в течение 1 чйри темйературе 2-5 фС. Ферментациюпроводят при температуре 40+2 фС .в течение 26 ч, после чего смесьохлаждают до 10-15 С, отфильтровывают Ь-(+) -о-аминофенилуксусную кислоту в" количестве 0,61 кг (4,0 М),а Фильтрат подкисляют соляной кислотой до рН ниже 1. Вййавший осадокБ-ацетил-Р-(-) -А -аминофенилуксусной кислоты промывают и сушат при50-60 С. Получают 0,76 кг (3,94 М)продукта, что составляет 95 оттеоретически -возможногу. Удельноевращение продукта (А , -185, чтосоответствует 98-ной оптическойчистоте Б-ацетил"Р-(") -А -аминофенилуксусной кислоты,1.2. Выделенный осадок Ь-(+) -е-аминофенилуксусной кислоты в количестве 0,.51 кг (4,0 М), 160 г (4 М)гидроокиси натрия и 2,0 л воды нагревают до 50 ОС и прибавляют 510 г(5,0 М) уксусного ангидрида с такойскоростью, чтобы температура реакционной массы поддерживалась 95100 фС. При этой температуре реакционную массу перемешивают в течение1 ч, охлаждают до 70-80 С, прибавляют 10 г активированного угля и фильтруют. Фильтрат охлаждают до 30-40 фС,подкисляют соляной кислотой до рНниже 1 и охлаждают до 5-8 ОС. Выпавший при этом осадок Б-ацетил-Р,Ь--аминофенилуксусной кислотыотфильтровывают, промывают и сушатс последующим"возвращением в процесс.Выход 0,75 кг (3,88 М), что составляет 97 от теоретически возможного.0-ацетил-ОрЬ" д -аминофенилуксусной кислоты 0,32 кг (8,0 М) гидроокиси натрия, 2,13 г (0,016 М) иминодиуксусной кислоты в 13 л воды при температуре реакционной среды 40-42 фС и рН 7,3-7,5 прибавляют 0,2 л водной вытяжки свиных почек, приготовленной перемешиванием 60 г грубомолотых не- обезжиренных почек с 0,25 л водытечение 1 ч при температуре 2-5 С.о ерментацию проводят при температуре 60 65 Общий выход И-ацетил-Р-(-)- -аминофенилуксусной кислоты 89,4 оттеоретически возможного,Пример 2.2.1. К раствору 1,6 кг (8 р 29 М)И-ацетил-ОрЬ-А -:аминофенилуксуснойкислоты, 0,32 кг (8,0 М) гидроокисинатрия, 1,5 г (0,008 М) нитрилотрйуксусной кнслотй в 13 л воды притемпературе реакционной среды 4042 фС и рН 7,3-7,5 прибавляют Ор 2 л 0водной вытяжки свиных почек, приготовленной перемешиванием 60 г грубомОлбтыхнеобезжиренных Почек с0,25 л воды в течение 1 ч при темпе"ратуре 2-5 С. Ферментацию проводятпри температуре 40+2 вС в течение: р 12 ч, после чего смесь охлаждают до10-15 оС, отфильтровывают Ь-(+)- А:. . аминофенилуксусную кислоту в количестве 0,62 кг (4,1 М), а фильтратподкисляют соляной кислотой до рН 20ниже 1. Выпавший осадок Б-ацетил.-О-(-)-А -аминофенилуксусной кислотыпромывают и сушат при 50-60 С. Полу,чают 0,77 кг (4,03 М) продукта, чтосоставляет 96,3 от теоретически 25возможного. Удельное вращение продуктаА ) -186, что соответствует98,4-ной оптической чистоте 0-ацетил-(-) -А -аминофенилуксусной кислоты. 302,2, Выделенный осадок 1 -(+) - б- -аминофенилуксусной кислоты в количестве 0,62 кг р(4,1 М),ф 164 г ,(4,1 М)(5,0 М) уксусного ангидрида с такойскоростью, чтобы температура реакци онной массы поддерживалась 95-100 фС,При этой температуре реакционнуюмассу перемешивают в течение 1 ч,охЛаждают до 70-80 С, прибавляют О10 г активированного угля и Фильтруют. Фильтрат охлаждают до 30-4 ОСрпОдкисляют соляной кислотой до рНниже 1 и охлаждают до 5-8 С, Выпавший осадок И-ацетил-Ор 1 б-аминофенилуксусной кислоты отфильтровываютр промывают и сушат с последующим возвращением в процесс. Вы)кЩ 0,77 кг (3,99 М), что составляет 97 от теоретически возможного. 50Общий выход Б-ацетил-Р-(-) - б -амииофеиилуксусной кислоты 92,8 от теоретически возможного.Пример 3.3,1. К раствору 1,6 кг (8,29 М),40+2 фС в течение 14 ч, по 0 сле чегосмесь охлаждают, до 10-15 С, отфильтровывают Ь-(+) -р -аминофенилуксуснуюкислоту в количестве 0,61 кг (4,0 М),а фильтрат подкисляют соляной кислотой до рН ниже 1. Выпавший осадокЮ-ацетил-О-.(-) - раминофенилуксуснойокислоты промывают и сушат при 50-60 С.Получают Ор 76 г (3,94 М) продукта,что составляет 95 от теоретическивозможного, Удельное вращение продуктаА ) -186; что соответствует98,4 ной оптической чистоте И-ацетил-О-(-)-А -аминофенилуксусной кис,лоты.3.2. Выделенный осадок Ь-(+) - А --аминофенилуксусной кислоты в количестве 0,61 кг (4,0 М), 160 г (4,0 М)гидроокиси натрия и 2,0 л воды нагревают до 50 С и прибавляют 510 г(5,0 М) уксусного ангидрида с такойскоростью, чтобы температура реакционной массы поддерживалась 95-100 ОС,При этой температуре реакционнуюмассу перемешивают в теченге 1 ч,охлаждают до 70-80 оСр прибавляют.10 г активированного угля и фильтруют. Фильтрат охлаждают до 30-40 Срподкисляют соляной кислотой до рНниже 1 и охлаждают до 5-8 рС. Выпавший осадок К"ацетил-ОрЬ- А-аминофенилуксусной кислоты отфильтровывают,промывают и сушат с последующим воз,вращением в процесс. Выход 0,.75 кг-аминофенилуксусной кислоты 89,4от теоретически возможного,Пример 4,4. 1. К раствору 1,6 кг (8, 29 М)Я-ацетил-Ор Ь- А -аминофенилук суснойкислоты, 0,32 кг (8.0 М) .гидроокисинатрия, 3,0 г(0,01 М) этилендиаминтетрауксусной кислоты в 13 л водыпри температуре реакционной среды40-42 С и рН 7,3-7,5 прибавляют0,2 л водной вытяжки свиных почек,приготовленной перемешиванием 60 ггрубомолотых необезжиренных почекс 0,25 л воды в течение 1 ч при температуре 2-50 С. Ферментацию проводят при температуре 40+2 С в течение 18 ч, после чего смесь охлаждают до 10-15 С, отфильтровываютЬ-(+) --аминофенилуксусную кислотув количестве 0,62 кг (4,1 М), афильтрат подкисляют соляной кислотойдо рН ниже 1, Выпавший осадок И-ацетил-Р-(-) - А -аминофенилуксусной кислоты промывают и сушат при 50-60 С.оПолучают 0,77 кг (4,03 М) продукта,что составляет 96,3 от теоретически возможного. Урельное вращение продуктаА, -188", что соответствует99-ной оптической чистоте И-ацетил-Р-(-) - А -аминс фенилуксусной кислоты,4.2. Выделенный осадок Ь-(+) - 6" Составитель А.АнисимовРедактор В.минасбекова ., Техред М,Петко КОРРектор В,Бутягаав авва ютюттюЕтююееаею а а щщаввт теаюеаавю 4ютю тав авва аЗаказ 9 7 5 1/2 8 Тираж 495 ПодписноеБНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 т ю ю ю ю ю ю ю ю т т ю т т ю ва т т ю ю ют ещ ю юа ю юеа т ю 4 щююав йют ааа,авюю а е филиал ППП Патент ф, г. Ужгород, ул . Проектная, 4 честве ОД 2 кг. (4,1 М), 164 г (4,1 М) гидроокиси натрия и 2,0 л воды вагре- вают до 50 С и прибавляют 510 г (5,0 М) уксусного айгидрида с тайой скоростью, .чтобы температура реакционной массы поддерживалась 95-100 оС.При этой температуре реакционную массу перемешивают втечейие 1 ч, охлаждают до 70-80 фС, прибаввляют.. 10 г активированного угля "и" Фиальтруют. Фильтрат охлаждают до 30-40 фС, подкибляют соляной кислотой до рв ниже 1 и охлаждают до 5-8 С,: Выпав-" ший при этом осадок Я-ацетил-Ъ,Ь-.:-аминофенилуксусной кислоты 928бт "теоретически во можного.Формула йзвобрЕтенеиеяее1 . Способ получени я Б-аце тивл-щ - ( -) - "аминофенилук су сной кислоты путем ст ерео специфического фермейтативного разделения рацематав,о т - . , .л и ч а ю щ и й с я тем, что, сце-лью увелйчення вйхода и повышения оптической чистоты"целевбтб-продукта,7170378Б-ацетил-О,Ь-аминофенилуксуснуюкислотуразделяют в присутствии азотсодержащего кислотного соединения илиего соли, выделяемую в ходе процессаЬ-(+) -А - аминофенилуксусную кислотуацилируювт и Возвращают в начало процесса.2. Сйособ по п.1, о т л й ч а ющ и й с я тем, что,азотсодержащеекислотнОе соединение берут в коли-:честве 0,005-0,01 Моля на 1 кг исходной Ю-ацеетйл-Р,Ь-А -амнйофенилукус- .иой кислеотй."3. Способ по п.1, о т л и ч а ющ и й с ятем,"что в качестве азот"содержащего кислотного соеедййенияф используют"диэтилдитиокарбамат натрия,нитрилотриуксусную кислоту, иминодищукСуснуюкислоту или этилейдиаминоатетрауксусную кисйоту.4, Способ по п.1,о ал"и ч а ю 26 щ и йся тем, что ацилированиеЬ-(+) - К-аминофенилуксусной кислотыпровЬдят при 85-100 фС.