Способ получения диэтилового эфира -(2-хлорэтил) нитрозоуреидо -1-этилфосфоновой кислоты

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНИХРЕСПУБЛИН. ОПИСАНИЕ ИЭОБРЕТЕНИК ПАТЕНТУ ВСР Р;.ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ(56) Ехрегичепа 1 Еча 1 цайоп оГ Апгйцшог Вгц 8 з 1 п гЬе 11 ЯА апй 11 БЯК апс 1 С 11 п 1 са 1 Согге 1 агдопз. - Най 1 опа 1 Сапсег 1 пзсдгцге шопоягарЬ 55, 1980, р, 257.(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ДИЭТИЛОВОГО ЭФИРА Ф -ГИ-(2-ХЛОРЭТИЛ)-И-НИТРОЗОУРЕИД 01-1-ЭТИЛФОСФОНОВОЙ КИСЛОТЫ (57) Изобретение касается фосфор- органических соединений, в частност способа получения диэтилового эфира 59 4 С 07 С 127/19, С 07 Р 8/4 А 61 К 3 1 1 7 Ы -11-(2-хлорэтил-И-нитрозоуреидо 1- -1-этилфосфоновой кислоты (Эф), который обладает активностью против злокачественных опухолей и может быть использован в медицине. Цель создание соединений укаэанного класса, обеспечивающих лучшую активность и меньшую токсичность, Синтез ЭФ ведут из диэтилового эфира 1-амииоэтилфосфоновой кислоты и Р-хлороэтилизоцианата при 0-25 С в среде галоидуглеводорода (СНС 1 ) с последующей обработкой НаМО в среде НСООН. Испытания ЭФ показывают, что он в сравнении с известной Х,И-бис- -(2-хлорэтил)К-нитрозомочевиной оказывает лучшее действие на лейко- мию Р, процент выживаемости составляет 534 против 503. Токсичность: 10 Эф составляет 60,1 против 26 мг/кг. 4 табл.1303024 35 ТаблицаИспытуемое Доза, соединение мг/кг Увеличение Число выОтношение доз ОП ИП выживаемос- живших жи(ИП) вотных на 60-й день ти животных по сравнению с контрольными,исследоваия 4 43 03 1Изобретение относится к способу получения нового химического вещества, в частности Ы -1.М-(2-хлорэтил)- -Е-нитрозоуреидо 1-1-этилфосфоновой кислоты Формулы 5 СтН 0 СНГ-СН -МН-С-СН СН,СС (1)СНО О О Ю который может найти применение в медицине,Пель изобретения - разработка способа получения соединения Формулы (1), который по сравнению с известным соединением обладает более высокой активностью и меньшей токсичностью.П р и м е р 1, Получение рацемического диэтилового эфира о 1 -Ь-(2- -хлорэтил) М-нитрозоуреидо 1-1-этилФосфоновой кислоты.П р и м е р 2. Стадия А. Диэтиловый эфиро -1 Ч-(2-хлорэтил)-уреидо.1- 25 этилфосфоновой кислоты,Раствор 46,65 г (0,26 моль) диэтилового эфира ю -аминоэтилфосфоновой кислоты в 400 мп хлороформа охолаждают до О при перемешивании идобавляют стехиометрическое количество свежеотогнанного Р -хлорэтилизоцианата (22,5 мл или 0,26 моль).Температура достигает 15 С. Перемешивают еще 1 ч при комнатной температуре, затем концентрируют раствор,выпаривая хлороформ, при пониженномдавлении без нагревания,40 72 г продукта, полученного в Форме масла, используют в сыром виде.2Стадия Б. Диэтиловый эфир с-Г Мв (2-хлорэтил)-М-нитрозоуреидо-вэтилфосфоновой кислоты.,Раствор 35,4 г (0,12 моль) по -лученного на стадии А продукта в200 мл муравьиной кислоты охлаждаютдо 5 С при перемешивании. Добавляютизбыток нитрита натрия (15 г,0,22 моль) частями в течение 30 мин.Перемешивают еще 30 мин при 10 С,затем концентрируют в вакууме притемпературе ниже 30-40 С. Поглощаютмаслянистый осадок смесью воды-хлористого метилена в количестве 400200 мл. Декантируют, экстрагируютснова 200 мл СН С 1. Промывают органическую фазу 100 мл воды, насыщенной углекислым газом до концентрации 107, затем 300 мл воды, Сушат, концентрируют. Полученныекристаллы тщательно поглощают в небольшом количестве изопропиловогоэфира. После осушивания получают29 г целевого продукта. Перекристаллизовывают из 750 мл этилового эфирапри Флегме.Выход 527, Т.пл, 85 С.ИК, см : (ИН) Ч(СО) соответственно 3220; 1720.ПМР (8): 1,20-1,80, ш, 1 Н; 3,403 70, т, 2 Н; 3 90 5 00, т, 5 Н; 7 40,и, 1 Н.Соединение (1) испытывалось наспособность удлинять выживаемостьмьппей, носителей опухолевых клеток,инокулированных интераперитонально(ИП) или орально (ОП).Сравнительные данные по активности соединения (1) с известным Ю, М-бис-(2-хлорэтил)-Х-нитрозамочевиной (ВСЮИ) на лейкомию Р 388 у мьппейСД 2 Х (имплантация 1 О клеток)представлены в табл. 1.303024 4нием числа и веса легочных метастаз-,по отношению к неподвергнутым лече"нию животным.Антиметастатическая активность5соединения (1) на образование очагов легочных метастаз после внутримьшечной инъекции клеток карциномыЛьюиса приведена в табл, 2,Таблица 2 Образованиеметастаз после обработки соединением (1) животных " девятью ежедневНеобработанные контрольные животные Образованиеметастаз после обработки ВСКИ животных девятью ежедневными дозами5 10 моль/кг Показатели ными дозами4 10 моль/кг(ИП) Вес мета 40,5+19,9 0 стаз на 18-й день, мг Число метастаз, И 30 10 10 Первая обработка на следующий день послеинокуляции. Продолжение табл.3 Как видно из табл. 2 соединение (1) препятствует образованию метастаз.35Влияние известного соединения (ВСКИ) и соединения (1) на кроветворную способность у мышей по отношению к необработанным животным оценивается расчетом элементов перифе 40 рической крови и костного мозга (бедренная кость) и обнаружением разведенных клеток, содержащихся в костном мозге, и представлено в45 табл. 3.Таблица 3 7,93 моль/(Соединение (1 Результаты показывают, что через 3 дня после ИП-введения самый низкий уровень концентрации раковых клеток.Результаты получены при использовании эффективной дозы для ВСКИ (11,75 моль/кг 10 ) и соединения (1) (7,93 моль/кг 10 ),Влияние токсичного действия соеди нения (1) и известного ВСКИ на печень определяется путем измерения ге патитного фермента аланина аминотрансферазы (БСРТ) в сыворотке крыс "Лонг Эванс.Нормальная концентрация в крови указанного фермента от 7,5 до 19 меж. ед./л. 50 5 10 =1 ООХ 70=100 онтрол 1,75 моль/кг 10ВСКИ),55 10 = 37=537, (- =313 (-693) 3 1Контроль - необработанные животные.Как видно из табл. 1, процент выживаемости вьше и отношение активных доз ОП/ИП лучше для соединения (1).Антиметастатическая способность соединения (1) измеряется сокраще 2,1 1 О =427. 51=737 (-273)5 1303024 6 Результаты действия ВСКИ и соеди- гепатитного фермента у крыс "Лонгнений (1) на уровень циркулирующего, Эванс" приведены в табл, 4. т а б л и ц а 4 Уровень фермента в сыворотке, МЕ/л,через Показатели 1 день 2 дня 5 дней 9 дней ВСКИ (ИП) 14,1 моль/кг. ф 10 22,7 27,3 11,8 19,7 Соединение (1), и И2 2С НО О О Способ получения диэтилового эфира А-Ь-(2-хлорэтил)-Н-нитрозо Составитель С.ПоляковаРедактор М.Бланар Техред И.Попович Корректор А.Зимокосов Заказ 227/57 Тираж 372 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д, 4/5Производственно-полиграФическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Соединение (1) не имеет гепотит 25 ной токсичности.Токсичные данные Щ соединения (1) и ВСМИ соответственно (при интераперитонеальном введении) составляет 60,1 и 26 мг/кг.Указанные результаты свидетельствуют о том, что соединение (1) является по сравнению с известным соединением ВСКИ более активным и менее токсичным,35Формула изобретения отличающийся тем, чтодиэтиловый эфир 1-аминоэтилфосфоновой кислоты обрабатывают 8-хлорэтилизоцианатом при температуре от0 до 25 С в галоидуглеводороде, полученный при этом диэтиловый эфирЫ-М-(2-хлорэтил)-Н-уреидо 3-этилфосфоновой кислоты обрабатывают нитритом натрия в муравьиной кислоте,