Способ получения электронейтрального желирующего полигалактана

Союз Советских СоциалистическихРаслублик ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(22) Заявлено 130679 (21) 2778792/23 исоединением заявки й 08 В 37/1 Государственный комн СССР по делам изобретени и открытий,.- ".",ьт, ;й рдена Трудового Красного Знаме Н Эстонской ССР и Ордена Трудо.тартуский государственный институт, хим го Красного 3 ниверситет" -(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЭЛЕКТРОНЕИТРАЛЬНО ЖЕЛИРУОцЕГОПОЛИГАЛАКТАНА повыш Изобретение относится к полисахаридам, в частности к получению электронейтрального желирующего полигалактана, студень которого можно применять при разделении и очистке биополимеров путем .иммуноэлектрофореза, иммунодиффузии, гельэлектрофореза и гельдиффузии. Получаемый полигалактан может также служить сырьем для получения гранулирован-, ным и химически модифицированных гелей.Наиболее близким по технической сущности к предлагаемому является способ, включающий очистку морских водорослей, сушку, экстракцию их известковым молоком с последующими желированием, вымораживанием, расплавлением и выделением целевого продукта 1.Однако для данного способа характерны низкая желирующая способность получаемого агара, связанная с гидролитическим расщеплением поли"ахаридов, и недостаточная скорость растворения.Цель изобретения ение желирующей способности, однородности и скорости растворения полигалактана. Поставленная цель достигаетсятем, что согласно способу получения электронейтрального желирующего полигалактана, включающему очистку морских водорослей, сушку, экстракцию их известковым молоком с последующим желнрованием, вымораживанием, расплавлением и выделениемцелевого продукта, в качестве морских водорослей используют водоросли АЬпУе 1 са соЬцсЬепвв, очисткупроводят пресной водой, экстракциюпроводят пофракционно при рН 8,5-10,а после расплавления полученный про дукт центрифугируют и выделяют целевой продукт обработкой эталономпри 65-75 оС с последующей сушкой прикомнатной температуре.П р и м е р 1Красные морские 20 водоросли АЬпГе 1 с 1 а соЬцсЬепв(в собирают активным способом (с помощьюводолазной техники). Водоросли тщательно очищают от механических примесей, промывают пресной водой и 25 сушат вне воздействия дождя и прямой солнечной радиации. В емкостьпомещают 800 г водорослей, добавляют 12 л воды и медленно перемешивают в течение 6 ч, после чего воду 30 .сливают и промывают 10 л воды еще.14, 9 0,4 32 21,3 16,7 0,6 21,4 7,8 0,8 64 6,2 20,3 1,0 80 3 раза, перемешивая каждый раз в течение 20 мин. Затем добавляют 8 лизвесткового молока (на 8 л водыберут 20 г СаО), тщательно перемешивают и выстаивают в течение 15 ч,после чего водоросли трижды промывают водопроводной водой. К промытымводорослям добавляют 8 л известкового молока, помещают в лабораторныйстерилизатор ВКи обрабатывают втечение 1,5 ч при 115+2 С., ПервуюФракцию выбрасывают, добавляют ещеь л известкового молока и обрабатывают водоросли при той же температуре. После обработки в течение 5 чотбирают вторую фракцию, а затем всепоследуЮщие. Время экстракции: .третья фракция 7 ч, четвертая 7 ч ипятая 15 ч. рН меняется от 0,5 до10. Все фракции фильтруют через хлопчатобумажную ткань и желируют в ваннах при комнатной температуре. Да- ;щлее фракции обрабатывают в отдельности. После желирования и полногоохлаждения до комнатной температурыв течение 12 ч ванны с экстрактомпомещают в холодную камеру с температурой - 12 С и держат там в теочение 15 ч. Вода вымораживается досостояния льда. Полученный продуктвыкладывают на фильтр и отделяютводу с растворенными в ней примесями. Полученный гель промывают воЗОдой в течение 30 ч, постоянно пе/ремешивая и меняя воду. После промывания и отделения воды Фильтрованием гель растворяют в стерилизаторепри 105 С. Полученный раствор фильт-. 35руют в лабораторной центрифуге(5000 об/мин) в течение 25 мин, Гели, полученные при обработке второйи пятой фракций, объединяют и .растворяют в стерилизаторе при 105 С. 4 ОРаствор, полученный при объединениигелей, выделенных из третьей и четвертой фракций, обрабатывают отдельно. Все последующие операции дляобоих растворов аналогичны, Раствор охлаждают до 80 С и осторожно приперемешивании добавляют до двойногообъема от начального подогретый до80 С 40-ный раствор полиэтиленглиоколя (мол. вес 6000) в 0,1 нрастворе йаС. Полученную смесь интенсивно перемешивают в течение 2-х мини отстаивают в течение 30 мин. Отделяют раствор от осадка декантированием. Осадок отфильтровывают и по-.мещают в емкость, заполненную водой при 40 ОС. Затем осадок тщательно промывают до полного исчезновения остатков полиэтиленгликоляв осадках. Полученный после обработки полиэтиленгликолем осадок растворяют в 1,2 л 0,03 М буфера трисуксусной кислоты. Раствор помещаютв термостат при 80 С. Добавляют50 г (в расчете на сухой вес) ДЭАЭцеллюлозы в цитратной форме и перемешивают раствор в течение 2,5 ч.Затем целлюлозу отделяют на воронке Бюхнера, а раствор выливают вемкость, куда при перемешиваниидобавляют 5 л этанола. Осаждение полигалактана этанолом ведут при65-75 С. Осадок и раствороставляют стоять 12 ч. Основную часть спирта отделяют декантированием. Далееосадок обрабатывают на воронке Бюхнера 0,5 л этанола, 0,8 л ацетона и0,8 л диэтилового эфира. Полученныйпорошок сушат в вакууме при комнатной температуре. Общий выходполигалактана составляет 3,4 от Ьодорослей. Выход полигалактана при использовании различных концентраций СаО и его характеристика приведены в таблице. 27,4 3,42 878 1023 950 34,6 4.,33 900 1030 965 38,0 4,75 920 1100 1010 29,2 3,65 890 990 940 26,5 3,31 780 1010 895Заказ 6816/33 Тираж 530 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д,4/5филиал ППП "Патентф, г.ужгород, ул.Проектная, 4 Получаемый по предлагаемому спо; собу полигалактан имеет высокую прочность геля, однороден за счет высокой измельченности и быстро раствоРяется в горячей воде. Способ получения электронейтрального желирующего полигалактана, включающий очистку морских водорос,лей, сушку, экстракцию их известковым молоком с последующими желированием, вымораживанием, расплавлением и выделением целевого продукта, отличающийся тем, что, с целью повышения желирующей способности, однородности и скорости растворения полигалактана, в качестве морских водорослей используют водоросли АЬпЮе 1 са .соЬосЬепвв,очистку проводят пресной водой,экстракцию проводят по 4 ракционнопри рН 8,5-10, а после расплавленияполученный продукт центрифугируюти выделяют целевой продукт обработкой этанолом при 65-75 С с последующей сушкой при комнатной .температуре. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе1. Тишин В. Технология обработки рыбы и морепродуктов. ЦНИТЭИ рыбного хозяйства. М 1971, сер. 3, вып. 4, с, 3-38 (прототип).