Способ получения арахидоновой и эйкозатриеновой кислот

(5) М, Кл А 61 К 31/3 С 07 С 177/О ооударственный комете СССР оо делам изобретена и открытийта опубликования описания 18,01,7 72) Авторы изобретения В. Бобылев, Л, В, Казанская, Л. М, Мо Т. В. Максимова и И, И. Гальтнкерожникова,1 Первый Московский ордена Ленина и оррудового Красного Знамени медицинский им. И, М. Сеченова анститут.1 Заявитель 4) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АРАХИДОНОВОЙ И ЭЙКОЗАТРИЕНОВОЙ КИСЛОТацевется получения лекаИзвестен спновой кислотывой кислотой п го сырья изопр ленин липидов, гают низкотемп ции и хроматог Однако извечивает высокогдукта и получе ется пов дукта.то сниртовоников крупноают, после ни зации полуют, подвер- хроматограагелем, имсеребра, отолейным рахидоИзобретение относится к фтической промышленности и ка рственных препаратов.особ получения арахидов смеси с эйкозатриеноутем обработки животноопиловым спиртом, омыдалее фильтрат подверературной кристаллизарафируют 1стный способ не обеспео качества целевого ирония эйкозатриеновой кисл Целью изобретения являние качества целевого проЭто достигается тем, чацетоновый экстракт семенго рогатого скота упаривкотемпературной кристалличенную смесь этерифициругают вакуумной разгонке,фируют на колонке с силикпрегнированным нитратом деляют арахидоновую кислоту и омыляют.П р и м е р , 5,7 л спиртово-ацетс.нового экстракта из семенников крупного рогатого скота (отход производства 5 лекарственного препарата "Ранидаза".)упаопиваают в вакууме в токе азота при50 С и получают 400 г липидов. Липиды смешивают с этиловым спиртом вьсоотношении 1.1, и прибавляют в токе 10 азота раствор 40 г едкого кали в60 мл воды в течение 15 мин (вседальнейшие операции также проводятв токе азота), Смесь перемешивают4 ч при температуре бани 50 С, раз 1 в бавляют водой вдвое и экстрагируютнеомыляемую часть липидов петрэфиром (4 х 250 мл; содержание ановой кислоты менее 1%).Водно спиртовые извлечения подкисляют серной кислотой до слабокислойреакции и экстрагируют хлороформомили хлористым метиленом (4 х 400 мл),Растворитель отгоняют в вакууме и38 5 ловых эфиро получают 246 г смеси высших жирныхкислот, содержащей, вес%;Арахядоновая кислота 7-8Эйкозатриеновая кислота 1-2Насыщенные и олеиноваякислоты 57-58Линолевая кислота 6-7Непдентифицировацсоединения 30-31(Иодпое число 102, кислотное число84, перекисное число 0,04).246 г смеси высших жирных кислотрастворяют в ацетоне (1:5) и перемеошивают 2 ч при -10 С, Осадок отделяют, фильтрат подвергают повторнойнизкотемпературной кристаллизации прио,-20 С в течение 2 ч. После удаленияосадка и упаривания ацетона получают42 г смеси высших жирных кислот. Кэтой смеси приливают 125 мл абсолюного метилового спирта, насыщенногохлористым водородом, и перемешивают3,5 ч при температуре бани 50 С, Метиловый спирт отгоняют в вакууме, остаток обрабатывают 20 Ъ-дым растворомбикарбоната натрия до нейтральной реакции и зкстрагируют дизтиловым эфиром(450 мл). После удаления растворителя получают 30 г смеси метиловыхэфиров высших жирных кислот, содержа%,Арахидоновая кослотаЭйкозатриеновая кислотаЛинолевая кислотаИасыщенные и олеиновая кислоты 52-54Кеидентифицированныесоединения 9-1 1(Иодное число 175, кислотное число 2,7, перекисное число 0,006).30 г смеси метиловых эфиров высших жирных кислот подвергают вакуумной разгонке (остаточное давление 3 мм) ция 1 П содержит (вес.%) ме жирных кислот арахидоново йкозатриеновой 5-6, линол сьпценных и олеиновой 225 1 О 15 20 75 30 35 40 45 50 неидентифидированных соединений 256, (Иодное число 222,5, кислотноечисло 2,5, перекисное число 0,047),Затем концентрат (фракция 11) эйкозатриеновой и арахидоновой кислот хроматографируют на трех стеклянных колонках размером Зх 90 см. Сорбентприготовляют следующим образом; 400 гсиликагеля суспендируют в 800 млводного раствора азотнокислого серебра (50%. Смесь нагревают 30 минпри 100 С при неремешивании, послеохлаждения отфильтровывают и сорбентовысушивают 16 ч при 120 С. Каждуюколонку заполняют 30 г сорбента в небольшом количестве петролейного эфира,промывают последовательно 100 млсухого диэтилового эфира и 1000 млсухого гептана (петролейного эфира)и наносят по 2,8 г концентрата в небольшом количестве гептана (петролейного эфира),Разделение смеси метиловых эфировжирных кислот проводят методом градиентного элюирования; 0,5%-ным диэтиловым эфиром в гептане (3,15 л,фракции 1 - 21), 1%-ным диэтиловымэфиром в гептане (1,65 л, фракции22-32), 40%-ным диэтиловым эфиром вгептане . (4,5 л, фракции 33-62),10%-ным дизтиловым эфиром в гептане(4,5 л, фракции 63-92), диэтиловымэфиром. Все растворители предварительно продувают азотом 1-2 мин.Фракции 53-62 объединяют, отгоняютрастворитель в вакууме при температуреоне выше 40 С, и получают 285-300 мгметилового эфира эйкозатриеновой кислоты (чистота 92-98%, иодное число24 5-251 ) .Соединение сохраняют в бензоле ватмосфере азота в запаянных ампулах.Для получения простагландинов метиловый эфир эйкозатриеновой кислоты омыляют и включают в биосинтез по известному методу. В результате получают соединение, соответствующее побиологической активности простагландину группы Е, поглощающее после щелочной обработки в УФ-области при278 нм и по данным тонкослойной хроматографии отвечающее ПГЕ(После колоночной хроматографиисмеси метиловых эфиров жирных кислотобъединяют фракции 63-85, удаляютрастворитель в вакууме при температуоре не выше 40 С, и получают 1,651,80 г метилового эфира арахидоновой641963 Источники информации, принятыево внимание при экспертизе Составитель С, МалютинаРедактор Г. Мозжечкова Техред Н, Андрейчук Корректор М. немчик Заказ 7628/5 Тираж 671 ПодписноеЦНИИПИ Государственного комитета СССРпо делм изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., и. 4/5 Филиал ППП "Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 кислоты (чистота 96-99%,йодное число325-330),Подученный метиловый эфир арахидоновой кислоты сохраняют в бензоле ватмосфере азота в запаянных ампулах. Дляполучении простагландинов бензол упаривают, метиловый эфир арахидоновой кислоты омыляют и включают в биосинтезпо известному методу. Получают соединение, соответствующее по биологической активности простагландину группыЕ, имеющее после щелочной обработкипоглощение в Уф 2-областн при 278 нми по данным ТСХ отвечающее ПГЕ 2.Предлагаемый способ позволяет получать арахидоновую кислоту, обладающую значительно улучшенным качеством,и эйкозатриеновую кислоту.формула изобретенияСпособ получения арахидоновой иэйкозатриеновой кислот путем обработки животного сырья спиртом, омыления липидов с последующей низкотемпературной кристаллизацией и хроматографией, отличающийся тем, .5 что, с целью повышения качества целевого продукта, спиртово-ацетоновый экстракт семенников крупного рогатого скота упаривают, после низкотемпературной кристаллизации полученную смесь 10 этерифицируют, подвергают вакуумнойразгонке, концентрат хроматографируют на колонке с силикагелем, импрегнированным нитратомсеребра, отделяют арахидоновую кислоту и омыляют.5 1, Авторское свидетельство СССР