Способ получения пищевого пепсина

(19) (3 й 50 С 9 64 ЕНИЯ ЪуС соатель остиамени динеГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОПН ОПИСАНИЕ ИЗОБР К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(71) Всесоюзный научно-исследовский институт мясной промышленни ордена Трудового Красного Знинститут высокомолекулярных соений,АН СССР(56) 1. Технологическая инструкципо производству пепсина пищевогоговяжьего, утвержденная Минмясомопромом СССР от 23.07.75., М.,ВНИИМП,2. Авторское свидетельство СССпо заявке Р 3268280/28-13,кл. С 12 Ю 9/00, 1981.3. Иониты и ионный обмен. ПодГ,В.Самсонова, П.Г.РоманковаНауками, 975, 5-,10.( 54) ( 57) 1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ. ПИЩЕВОГО ПЕПСИНА, включающий двухстадийную ,кислотную экстракцию измельченногоживотного сырья при 35-40 С, фильтра, цию, охлаждение экстракта до 18- 20 С, Фракционирование фермента и высушивание, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью улучшения. качества целевого препарата, фракционирование Фермента проводят пропусканием экстракта при рН 2,1-2,3 через карбоксильный катионит в водородной форме с размерам частиц 0,1-0,5 мм, представляющий собой сополимер акрилонитрила и дивинилбензола, с последующей промывкой катионита при том же рН и десорбцией Ферментапри рН 5,0-5,3.2, Способ по п.1, о т л и ч а ющ и й с я тем, что высушивание осуществляют лиофилизацией.Изобретение относится к способамполучения молокосвертывающих препаратов, в данном случае говяжьегопепсина, из сырья животного происхождения, используемых в сыродельной промышленности при изготовлении 5сыров и может быть испельзовано напредприятиях отрасли,Известны способы получения молокосвертывающих ферментов из желудков разных видов животных. 10Известен способ получения пищевого пепсина, включающий кислотнуюэкстракцию его из измельченногосырья животного происхождения, Фильтрацию, охлаждение, высаливание поваренной солью, отстаивание, сушкуполученного концентрата и смешивание с наполнителем до стандартнойактивности 1.11 .Однако способ характеризуетсязначительным количеством нерастворимого осадка в готовом препаратедо 15), что приводит к ухудшениюего качества, оказывает отрицательное воздействие на качество получаемого сыра,Наиболее близким к предлагаемомуявляется способ получения пищевогопепсйна, включающий двухстадийнуюкислотную экстракцию измельченногоживотного сырья при 35-40 С, фильт,рацию, охлаждение экстракта до 1820 С, Фракционирование ферментапутем высаливания его из экстрактаповаренной солью 20-22 к объемураствора), отстаивание осадка, его 35высушивание21 .Однако в готовом препарате содержится 3-4 нерастворимого осадка,который оказывает отрицательное влияние на качество изготавливаемого 40сыра. Это объясняется тем, что операция высаливания не позволяет избирательно выделять пепсин из экстрактов слизистой оболочки сычугов крупного рогатого скота. Наряду с пепсином высаливаются другие беЛки, находящиеся в экстракте.Цель изобретения - улучшение качества готового препарата.Укаэанная цель достигается тем,что согласно способу получения пищевого пепсина, включающему двухстадийную кислотную экстракцию измельченного животного сырья при 35-40 С,Фильтрацию, охлаждение экстракта до14-20 С, фракционирование фермента 55и высушивание, фракционирование Фер"мента осуществляют пропусканиемэкстракта при рН 2,1-2,3 через карбоксильный катионит в водороднойформе с размером частиц 0,1-0,5 мм, 60представляющий собой сополимер акрилонитрила и дивинилбензола, с после.дующей промывкой катионита при томже рН и десорбцией фермента прирН 5,0"5,3.65 Обычно высушивание осуществляютлиофилизацией.Технологическая схема предлагаемого способа может быть представлена в следующем виде. Измельчениесырья, первая экстракция пепсина втечение 8-15 мин раствором сернойкислоты при рН 2,5-3,0 и последующим добавлением к смеси соляной кислоты до рН 1,8-2,0 при температуре35-40 СС, общее время экстракции4 ч; Фильтрация экстракта на нутчфильтре через два слоя сукна; вторая экстракция пепсина растворомсоляной кислоты с рН 1,8"2,0 притемпературе 35-40 С 3 ч; фильтрацияна нутч-фильтре через два слоя сукна; охлаждение экстрактов до 1820 С; сорбция экстракта пепсина прирН 2,1-2,3 на карбоксильном катионите со скоростью 150 мл/ч см ; промывка карбоксильного катионита прирН 2,1-2,3 со скоростью 150 мл/ч см;десорбция пепсина с карбоксильногокатионита при рН 5, 0-5,3 со скоростью9 мл/ч см; лиофильная сушка элюата;Мзмельчение концентрата; просеива,ние концентрата и смешивание с наполнителем.По данному способу достигаетсяулучшение качества готового препарата. Это объясняется тем, что введение операций сорбции пепсина, промывки карбоксильного катионита прирН 2,1-2,3 и десорбции пепсина скарбоксильного катионита позволяетизбирательно выделять пепсин, темсамым ликвидировать нерастворимыйосадок, что и улучшает качество готового препарата,П р и м е р 1. 1 кг замороженной слизистой оболочки сычугов крупного рогатого скота измельчают наволчке с диаметром отверстий решетки 5 мм. Слизистую оболочку заливают 2,5 л раствора серной кислотыпри рН 1,5 и экстрагируют пепсин при35 С 10 мин, после чего в смесьдобавляют соляную кислоту до рН экстракта 1,8. Общее время экстракции4 ч. После этого жидкую часть экстракта фильтруют на нутч-фильтречерез два слоя сукна, а оставшуюсяслизистую оболочку повторно заливают 1,7 л раствора соляной кислотыпри рН 1,8 и экстрагируют пепсинпри 35 ф С 3 ч.Экстракт фильтруют через два слоясукна, остатки слизистой оболочкиутилизуют. Полученные экстракты охлаждают до 20 С и раствором аммиака.доводят рН до 2,1,В ионообменную колонку ( диаметр4 см, высота 25 см) загружают карбоксильный катионит КМп в водородной Форме размер зерен 0,1-0,315 мм)31. Через колонку при20 фС пропускают 3 л экстракта го1035063 Составитель О.СкородумоваТехред М,Костик Корректор В.Бутяга Редактор Л,Авраменко Заказ 5759/23 Тираж 523 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо.делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5, Филиал ППП "Патент", г, Ужгород, ул, Проектная, 4 вяжьего пепсина при рН 2,1 со скоростью 150 мл/ч см . Затем колонку промывают 3 л 0,1 М раствора хлористого калия с добавлением соляной кислоты при рН 2,1 со скоростью 150 мл/ч см . Десорбцию пепсина проводят 0,2 М ацетатным буФеромпри рН 5,0 со скоростью 9 мл/ч си Полученный элюат лиофильно высушивают при температуре не выше 35 С. Сухой концентрат пепсина измельчают, просеивают и смешивают с наполнителем до получения стандартной актив-. ности препарата. От 1 кг сырья выход пепсина 36 г 3,6П р и м е р 2. 1 кг замороженной слизистой оболочки сычугов крупного рогатого скота измельчают на волчке с диаметром отверстий решетки 5 мм. Слизистую оболочку заливают 2,5 л раствора серной кислоты при рН 2,5 и экстрагируют пепсин при 35 ОС 10 мин, после чего в смесь добавляют соляную кислоту до рН экстракта 1,8.Общее время экстракции 4 ч.После этого жидкую часть экстракта фильтруют на нутч-фильтре через два слоя сукна, а оставшуюся слизистую оболочку повторно заливают 1,7 л раствора соляной кислоты при рН 1,8 и экстрагируют пепсин при 35 С 3 ч. Экстракт Фильтруют через два слоя сукна, остатки слизистой оболочки утилизируют.Полученные экстракты охлаждают до температуры 20 С и раствором аммиака доводят рН до 2,2.В ионообменную колонку (диаметр 4 см, высота 25 см) загружают карбоксильный катионит КМп в водородной формеразмер зерен 0,1-0,315 мм) Через колонку при 20 С пропускают 3 л экстракта говяжьего пепсина при рН 2,2 со скоростью 150 мл/ч см Затем колонку промывают 3 л 0,1 М раствора хлористого калия с добавлением соляной кислоты при рН 2,2 ,со скоростью 150 мл/ч-см . Десорбцию пепсина проводят 0,2 М ацетатным буфером при рН 5,15 со скоростью 9 мл/ч см . Полученный элюат лиофиль но высушивают при температуре не выше 35 ОС. Сухой концентрат пепсинизмельчают, просеивают и смешиваютс наполнителем до получения стандартной активности препарата. От.1 кг сырья выход пепсина 40 г 4).5 П р и м е р 3. 1 кг замороженной слизистой оболочки сычугов. крупного рогатого скота измельчаютна волчке с диаметром отверстий решетки 5 мм. Слизистую оболочку за ливают 2,5 л раствора серной кислоты при рй 2,5 и экстрагируют пепсинпри 35 С 10 мин, после чего в смесьдобавляют соляную кислоту до РНэкстракта 1,8, общее время экстракции 4 ч. После этого жидкую частьэкстракта фильтруют на нутч-фильтречерез два слоя сукна, а оставшуюсяслизистую оболочку повторно заливают 1,7 л раствора соляной кислотыпри рН 1,8 и экстрагируют пепсин при35 С 3 ч.Экстракт фильтруют через два слоясукна, остатки слизистой оболочкиутилизируют. Полученные экстрактыохлаждают до 20 С и раствором аммиа"ка доводят рН до 2,3.В ионообменную колонку (диаметр4 см, высота 25 см) загружают карбоксильный катионит КМп в водородной форме ( размер зерен 0,315-0,5).Через колонку при 20 фС пропускают3 л экстракта говяжьего пепсина при .рН 2,3 со скоростью 150 мл/ч см .Затем колонку промывают 3 л 0,1 Мраствора хлористого калия с добав лением соляной кислоты при рН 2,3со скоростью 150 мл/ч см . Десорбцию пепсина проводят 0,2 М ацетатным буфером при рН 5,3 со скоростью9 мл/с см . Полученный элюат лио О Фильно высушивают при температурене выше 35 С. Сухой концентрат пепсина измельчают, просеивают и смешивают с наполнителем до получениястандартной активности препарата.От 1 кг сырья выход пепсина 35 г(3,5) .Предлагаемый способ получения пищевого пепсина позволяет улучшить(качество готового препарата за счетликвидации нерастворимого осадка.