Система растворителей для разделения желчных кислот

н 11 445909 ОП КСАН И ЕЙЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз Советских Социалистических Республикосударственный комитет овета Министров СССР 2.357,1588.8) 3) У лам изобретенийи открытий 2) Авторы изобретения,ф.Б А. айцис и В, А. Маки 71) Заявитель Рижский медицинский институт 4) СИСТЕМА РАСТВОРИТЕЛЕЙ Д ЖЕЛЧНЫХ КИСЛОРАЗДЕЛЕНИЯ Изобретение относится к области медицины.Известная система растворителей для разделения желчных кислот методом тонкослойной хроматографии, содержащая 2,2,4-триметилпентан, диизопропиловый эфир, уксусную кислоту, изопропиловый спирт (2: 1: 1: 1), недостаточно эффективна.Цель изобретения - повышение эффективности, ускорение и упрощение разделения - достигается тем, что в систему, кроме указанных компонентов, вводят этиленхлорид и воду и компоненты берут в соотношении 2: 1; 1: :1:1:026.Хроматографию проводят на стеклянных пластинах, покрытых слоем силикагеля марки ЛС 5/ЧО мкм толщиной 0,25 мм, которые высушивают на воздухе в течение суток при комнатной температуре. На высушенную пластину наносят 0,01 мл желчи или кишечного содержимого или 0,05 мл спиртового экстракта желчных кислот, выделенных из сыворотки крови. Рядом с опытными образцами наносят 0,02 мл смеси стандартов желчных кислот (ТХ, ТХДХ, ТДХ, ТЛХ, ГХ, ГХДХ, ГДХ, Х, ГЛХ, ХДХ, ЛХ, ДХ) в концентрации 1 мг/мл. Разделение проводят методом восходящейхроматографии в течение 12 - 14 час в пренлагаемой системе растворителей. После разделения пластину высушивают на воздухе, а 5 затем экспонируют в парах йода до появления пятен или опрыскивают раствором хлористого марганца. В первом случае участки пятен силикагеля снимают с пластины и используют для количественного определения желч ных кислот методом спектрофотометрии илиспектрофлуорометрии. Во втором случае пятна желчных кислот имеют разную окраску и хорошо различаются между собой по цвету.П р и м е р. При разделении 0,02 мл смеси 15 стандартов желчных кислот (ТХ, ТХДХ, ТДХ,ТЛХ, ГХ; ГХДХ, ГДХ, Х, ГЛХ, ХДХ, ДХ, ЛХ) в концентрации 1 мг/мл на хроматограмме обнаруживают 11 пятен. Разделяются все желчные кислоты, за исключением ТДХ и 20 ТХДХ, которые отделяются от других кислот,но не разделяются между собой.При разделении экстракта желчных кислот,выделенных из сыворотки крови различных больных, получают различное число пятен, 25 идентификация которых приведена в таблице.445909 Количество пятен на хроматограммеЗаболевание ТХ, ТХДХ+ТДХ, ГХ, ГХДХ,ГДХ, Х, ХДХ, ДХ Подпеченочная желтуха (рак поджелудочной железы) ТХ, ТХДХ, ТЛХ, ГХ, ГХДХ,ГЛХТХ, ТХДХ+ТДХ, ГХ, ГХДХ,ГДХ Биллиарный циррозБолезнь Боткина Составитель С, МалютинаРедактор Т, Шарганова Техред В. Рыбакова Корректор Т. Гревцова Заказ 428/8 Изд. Кз 306 Тираж 674 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, Ж.35, Раушская наб., д. 4,5Типография, пр. Сапунова, 2 При разделении желчных кислот желчи, полученной от здорового человека, обнаруживают 5 пятен, идентифицированных как ТХ, ТХДХ + ТДХ, ГХ, ГХДХ, ГДХ. Пр едм ет изобретения Система растворителей для разделенияжелчных кислот, содержащая 2,2,4-триметилпентан, диизопропиловып эфир, уксусную кислоту и изопропиловый спирт, о т л и ч а ю щ ая с я тем, что, с целью повышения эффективности, ускорения и упрощения разделения, си стема содержит, кроме указанных компонентов, этиленхлорид и воду при соотношении между компонентами 2: 1: 1: 1: 1: 0,26,