Способ получения 11-дезацетокси-вортманнина

439994 Союз Советских Социалистических Республик(61) 5 ависимыи от па (22) Заявлено 12.05,70 (32) Приоритет 14,05.6 (33) Швейцария 21) 1437524/ 1647954/31-1 31) 7349/69(51) Л.Кл. С 120 Осударственной коцит Совета министров СС ао делам изооретенн(088.8)30 08.74. убликован влете открыт 75 ата опуол икова н;я оп пса ния Оо.О Иностран 72) Авт ЕНИЯ 11-ДЕЗАЦЕТ О НИНА(54 С ПО Изобретение относится к области медицины, к,производству антибиотиков.Способ получения предложенного препарата в патентной литературе не описан.11-дезатокси-вортманнин обладает высоким фунтистатическпм действпем против разлочных возбудителей, грибковых заболеваний гуманнопатогенными грибами илп грибами, представляющими собои паразиты растений. Кроме того, 11-дезацетокси-вортманнин обладает действием против отеков и воспалений, как втдно из опыта отека Каррагена, из опыта кистозного гранулома Каррагена и из опыта кистозного гранулома СМС на бодрствующей крысе,Предложен способ получения 11-дезацетокси-вортманнина, заключающийся в том, что культуру Репс 11 цгп 1 цпсцозцтп Т 1 оп ЯК 1.3363 вли Азрегр 1 цз 1 апцз Карег и ТЬогп КК 1 Ц. 3807 выращивают,в аэробных условиях на среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли, а также микроэлементы при 18 - 27 С в течение 3 - 10 дней и из фильтрата культуральной жидкости выделяют и очищают целевой продукт известными приемами.Штаоо о 3196 Репс 11 цп цпсц 1 озцгп Т 1 тогп выделен пз пробы почвы. взятой Кларскбург, Мэрилэнд (США). Указанный штамм растет на агаре солода и дрожжей пои 18 - 27 С и образует густой зеленый мицелий с желтыми кондиеносцамн, субстрат окрашен 8 зелено- желтый цвет.Штамм 5 8033/Р Азрегрцз апцз,выделен 5 из пробы почвы, взятой,в республике Центральной Африки. Указанньш штамм растет на агаре, глюкозы-экстракта дрожжей-экстракт солода-пептона при 18 - 33 С (предпочтительно выращи 1 вать при 18 - 27 С). На 10 этой среде мицелий,рыхлый, субтрат и обратная сторона колонии имеют желтоватый цвет.Предложенные штаммы выращивают наразличных питательных средах, содержащих в качестве источников углерода глюкозу, 15 крахмал, декстрин, лактозу, тростниковыйсахар и т. дв качестве источников азота: органические и неорганические азотосодержащие соединения, такие как пептон, экстракты дрожжей и мяса, сульфат аммония, нитрат 20 аммония, аминокислоты и т. д а также минсральные соли и микроэлементы.Для получения 11-дезацетокси-вортманнина жидкую питательную среду засевают споровой суспензией одним из предложенных25 штампов.Если берут штамм Репсцп 1 цпсц 1 озцтТроп, то инкубируют культуру в течение 5 - 10 дней при 27 С, в случае применения штамма Азрегрцз апцз Карег и Ттоп 1 инз 0 кубацию,проводят в течение 3 - 4 дней пр:439994 35 40 5 С. Щенева Составитель Ре"ктор Н. Ногаи Техред Е, Борисова Корректор Т. Добровольская Заказ 1 18 Изд. Мв 1950 Тираж 456 Подписное Ц 1-1 ИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, 1 К.35, Раушская наб., д. 4/5Обл, гип, Костромского управления издательств, полиграфии и книжной торговли 18 С. Выращивание может происходить при аэробных условиях в поверхностной культуре или в жидкой среде прои взбалтывании,или в ферментерах с пропусканием воздуха или кислорода с перемешиванием.Как только произведено максимальное количество антибиотика, фильтруют и антибиотик получают эк"трактивным или адсорбтивным методами известным образом из филь- трата.Лучший выход получен при экстражции фильтрата сложным уксусным эфиром, однако можно применять другие органические,растворители, такие как бензол, хлороформ, бутилацетат, метилен-хлорид или бутанол. После этого освобождают экстракты от растворителя, например дистилляцией, и остаток очищают для изолирования антибиотика хромотографнческим путем на адсорбирующих веществах, таких как глинозем, силикагель, силикат магния и т, п., или посредством,противоточного распределения.Пр и мер 1. Ферментер со 150 л питательной среды, содержащей на 1 л деминерализованной. воды 20 г церелозы, 2 г экстракта солода, 2 г экстракта дрожжей, 2 г КН 2 РО 4, 2 г Мд 504 7 Н 20, засевают споровой суспензией штамма МКК 1. 3363 Реп 1 с 1111 цгп 1 цп 1 сцозцгп ТЬогп и инкубируют при продувании воздуха (15 л/мин) и перемешивания 100 об/мин в течение 112 час при 27 С. Культуральную жидкость фильтруют и фильтрат экстрагируют двумя порциями сложного уксусного эфира по 100 л. Органическую фазу промываю 1 г один раз 60 л воды и сгущают в вакууме до 5 л. Концентрат сушат над безводным сульфатом магния и испаряют. Затем осадок подвергают противоточному распределению в системе петролейный эфир и метанол-вода (9:1). Метанольную фазу концентрируют и после этого экстрагируют трижды сложным уксусным эфиром. Растворы сложного уксусного эфира промывают один раз водой, сушат над безводным сульфатом магния и испаряют. Экстракт хроматографируют на 50-кратном количестве силикагеля. Хлороформом-метанолом (99:1) элюируют 11-дезацетокси 5 10 15 20 25 30 вортманнин, который после двухкратной перекристаллизации из метиленхлорида эфира плавится при 178 в 1 С.Пр им е р 2. Ферментер с 30 л питательной среды, юторая имеет состав, описанный в примере 1, засевают 3 л предварительно выращенной на жидкой среде, содерхсащей дополнительно 2 г пентона на 1 л воды, культуры штамма ХКК 1. 3807 Азрегр 11 цз ) апцз Карег и ТЬогп и инкубируют при продувании (6 - 24 л,воздуха/мин) и перемешнвании (150 об/мин) в течение 90 час при 18 С, Культуральную жидкость фильтруют и фильтрат экстрагируют дважды по 20 л сложного уксусного эфира. Органическую фазу промывают один раз 12 л воды и концентрируют в вакууме до 1 л.Концентрат сушат над безводным сульфатом магния.и испаряют. Затем осадок подвергают противоточному распределению в системе петролейный эфир и метанол-вода (9:1), Метанольную фазу концентрируют и после этого экстрагируют трижды сложным уксусным эфиром. Растворы сложного уксусного эфира промывают один раз в одной, сушат над безводным сульфатом магния и испаряют. Эксгракт хроматографируют,на 50-кратном количестве силикагеля. Хлороформ-метанолом (99:1) элюируют 11-дезацетокси-вортманнин, который после двухкратной пере- кристаллизации из метиленхлорида-эфира плавится при 178 - 180 С. Предмет изобретения1. Способ получения 11-дезацетокси-вортманнина, отличающийся тем, что культуру Реп 1 с 1 йцгп 1 цп 1 сц 1 озцгп ТЬоп 1 МКК 1. 3363 или Азрегр 11 цз )апцз Карег и ТЬогп 1 чКК 1. 380 выращивают в аэробных условиях на среде, содержащей источники углерода, азота, минеральные соли, а также микроэлементы и из фильтрата культуральной жидкости выделяют,и очищают целевой продукт известными пр и ем а ми.2. Способ по и. 1, отличагощийся тем, что выращивание осуществляют при 18 - 27 С в течение 3 - 10 дней.