Способ определения сопряженных диеновых алифатических спиртов и ацетатов

. ЯСПУБЛИН 6 8 511 0 01 Б 31 ГОСУДАРСПО ДЕЛ ВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(71) Всесоюзный научно-исследовательский институт биологических методов защиты растений,(56) 1БЬап 1 А К 1 цК 1,Т, Бех РЬеговопе оГ ЕЕ 1 рФдап СоС 1 опЬеаГогв,1 Сз СЬев 1 са 1 ТгапзГогвй 1 опв цпцегг 1 хек Соп 611 опв1,СЬев, Есо 1 ору,1980, ч. 6,0 5, р. 875-880.2.Вайнтрауб Ф.П., Гициу Е.ВДронь Л.П. и Кейсер Л.С. Методы определения некоторых аттрактантов вводе, биологическом Материале и композициях для ловушек, Теэ. доклада1 П Всесоюзного совещания по анализуостатков пестицидов. М., 1979,с(54)(57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОПНЫХ ДИЕНОВЫХ.АЛИФАТИЧЕСКИХ СПИР И АЦЕТАТОВ путем их из анализируе упаривания экстр мроматографическ на колонке с тве держащем неподви о т л и ч а ю щ с целью повыаени деления и точнос ве неподвижной жи зуют жидкие крнс экстрагирования мой пробы гексаном кта с последующим м разделением его дым носителем, со ную жидкую фазу,й с я тем, чт селективности и способа, в к дкой фазы испольаллы общей формул о раз ачесСоединение Изомер Заданов смеси,% Определено ЧислоЯ,В определений,76 1,12 цис,цис диен-ол 1,08 транс,цис. 0,9 7,5 цис, транс 0,8 12,5 52,8 54 1,15 1,05 диен-ол 14,1 15 цис,цис 0,8 23 24,6 ацетат транс,цис 8,5 0,9 цис,транс 6,8-дека 1,02 60 619,5 транс, транс 10 диен-ол цис,цис 15транс,цис 14,8 0,9 14,7 15 0,9 цис,транс 9,11-тетрадекадиен 1-ол аце 1,05 27,6 12,8 1,2 8,4 тат 0,8 2,3 51,2 50 0,9 30,3 30 7,9-додекадиен-ол ацетат 7,4 0,8 54 53,5 1,2 цис,транс 0,6 8 с 8 в искУсственной смеси, имеюцей сос-, тав аналогичный примеру 5, проводят при 130 С на колонке с жидким кристаллом структуры 9 (табл.1 в качестве неподвижной жидкой фазы. Рас.- 5 8,10-додека- транс, транс 75 8,10 додека- транс, транс транс, транстранс,цисцис,цисцис,транс транс, трансцис,цис.транс,цис П р и м е р 11. Определениетранс, транс,10-додекадиен-олааттрактанта яблочной плодожорки врезиновых препаративных формах прочеты проводят аналогично примеру 6.Количественный анализ искусственныхсмесей, содержащих изомеры диеновыхспиртов и ацетатов представлены втабл.З.Таблица 3 тносительноестандартноеотклонение,5 м водят анализируя параллельно 12 препаративных форм (ГОСТ 3399-76), в кс торые задано по 62,5 мкг (4 пробы ), 125 мкг (4 пробы) и 1250 мкг (4 пробы) синтетического препарата, содержащего 80 транс, транс-, 12 транс, цис- и 8 цис,транс- изомеров 8,10-додекадиен -1-ола, и одну препаративную форму, не содержащую синтетического препарата, которую используют 5 в качестве контрольного образца. В пересчете на транс, транс,10-додекадиен-ол препаративные Формы содержат по 50, 100 и 1000 мкг этого изомера, 10Эти 13 препаративных форм экстрагируют гексаном (Зх 10 мл ) в течение 15 мин, затем экстракты объединяют, .уаривают в токе азота до 1,мл и анализируют на колонке с жидкокрис таллической неподвижной жидкой фазой У (табл.1) при 120 фС.Времена удерживания цис,транс-, транс,цис-, и транс, транс-изомеров 8 10-додекадиен-ола составляют 20 16,3, 19,0 и 21,3 мин соответственнс Контрольный образец не дает пиков в интервале времен удерживания 14- . , 24 мин.ПараллелЬно эти же экстракты анализируют на стеклянной колонке(Зм х 2 мм ), заполненной хроматоном Й-ЛЮ 3 МС 5,эернением 0,125 - Р,160 мм, содержащим 5 ХЕ(согласно известному методу ). Времена удерживания цис,транс-,транс,цис- и транс, трансиэомеров 8,10-додекадиен-ола на этой колонке при 140 ОС составляют 12,0; 12,0 и 12,2 мин соответственно Контрольный образец не дает пиков в интервале времени удерживания 10- 35 14 мин.,цля количественного определения транс, транс,10-додекадиен-ола в исследуемых пробах хроматографируют исследуемые и стандартные растворы 40 с известной концентрацией транс, транс,10-додекадиен-ола (например, 50, 100 и 1000 мкг/мл) (метод абсолютной калибровки ). В колонку хроматографа вводят 2-3 мкл стан-. 45 дартного раствора, проводят 3-4 анализа и определяют среднюю высоту пика. Аналогично определяют высоты пиков для исследуемых растворов и рассчитывают содержание препарата в образце по соотношениюВЯ С 1 Т где Ь и- высоты пиков стандарт1 2ного и анализируемогорастворов соответствен- но, юю;и стандартного ианализируемого раство-1 ров, вводимых в колонку хроматографа, мкл;С 1 - концентраци( стандартного раствора, мкг/мл;Ч - объем анализируемойпробы, мл.П р и м е р 12. Определение транс, цис,9-додекадиен-ола ацетата аттрактанта гроздевой листовертки) в резиновых препаративных формах проводят, анализируя параллельно 12 препаративных форм (ГОСТ 3399-76), в которые задано по 100 мкг (4 пробы), 500 мкг (4 пробы)и 1000 мкг (4 робы ) синтетического препарата, с: в .:ержащего 60 транс,цис-, 4 цис,цис= и 36 транс, транс-изомеров 7,9-додекадиен-ол ацетата и одну препаративную форму, в которую невносят синтетический препарат, используемую в качестве контрольного образца.Эти препаративные формы экстрагируют гексаном (Зх 10 мл) в течение 15.мнн, экстракты объединяют и упаривают в токе азота до объема 1 мл и затем анализируют на колонке с жидким кристаллом Й (табл.1) при 130 С.Времена удерживания транс,цис-, цис,цис- и транс, транс-изомеров 7,9- додекадиен-ол ацетата на этой колонке: 22,6; 25,6 и 27,6 мин соответственно. - Контрольный образец недает пиков в интервале времен удер-живания 20-30 мин.Параллельно эти же экстракты ана,лизируют при 140 ОС на стеклянной ко- . лонке (Зх 2 мм ), заполненной хрома- тоном Й-АЮ-РМС 5, зернением 0,125- 0,160 мм, с 5 нитрилсиликонового каучука ХЕ(согласно известному методу ). Времена удерживания транс, цис-, цис,цис- .и транс,транс-изоме" ров. 7,9-додекадиен-ол ацетата: 15,2; 15,5 и 15,7 мин соответственно. Контрольный образец не дает пиков в интервале, времен, удерживания 12-18 мин.,цля количественного определения транс, цис,9-додекадиен-ол ацетата хроматографируют исследуете и стандартные растворы транс,цис,9- додекадиен 1-ол ацетата с известной концентрацией (60, 300 и 600 мкг/мл 1 В колонку хроматографа вводят 2-.3 мкл стандартного раствора, проводят 3-4 параллельных определения и определяют среднюю высоту пика Аналогично определяют высоты пиков для исследуемого раствора и рассчйтывают содержанце препарата в образце, аналогично примеру 11. Результаты представлены в табл. 4.(т),мкг Определяемоесоединение Метод определения Стандартное отклонение5,мкг Точностьопределения 8,10-додекадиен-,1-ол,5,1 10,2 12,4 12,4 72 7,2 Известный 50 58,6100 1151000 1210транс, трансиэомер 3,5 7Ъ 0,1 10,1 82,7 8,3 Предла 46,8 гаемый 100 . 91,51000 925 4,6 7,3 7,9-додекаИзвестный 60 94,6 4 12,1 диен-ол 8,8460 14 4,783,6 14,0 300 600 920 52,6 Предлагаемый 300 54;3 4 5,8 9,2 4,8 288 9,2 14,6 570 43,5 11,5 69 600 1Таким образом, предлагаемый способ позволяет повысить селективность раз- деле .ия в среднем не менее чем на 15, при этом обеспечивается воз 45 можность количественного определения изомерных форм диеновых спиртов и ацетатов величина относительного стандартного отклонения при количественном анализе не превышает величину 1,15.).При этом повышается точность определения биологически активных форм диеновых спиртов и ацетатов - средняя относительная погрешность 9, что превосходит результат достигаемый в известном способе на 15. Составитель В. Резников Редактор Р. Цицика Техред С.Мигунова Корректор О,БилакЗаказ 1,1453/38 Тираж 823 . ПодписноеВНИИПИ Государственного комитете СССРпо делам иэоьретений и Открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 филиал ППП "Патетн", г. ужгород,. Ул. Проектная, 4 ацетат,транс,цисизомер Задано впробе,мкг,Ф Числоопре деле ний, и 4 3,2 4 7,8 4 45 4 2,2 4 6,4 4 52 Относительная погрешностьИ у Ф 002 1068808 т сн,37 Изобретение относится к аналитической химии, в частности к способамЬпраделения сопряженныхдиеновых аляФдтических спиртов и ацетатов,и можетвспользоваться для определения изомер-,його состава этих соединений. 5Известен способ определения сопряженных диеновых алифатических спиртов и ацетатов путем хроматографического разделения анализируемойпробы, прошедшей предварительную10очистку методом тонкослойной препаративной хроматографии, на капилляфнойколонке с неподвижной жидкой Фазой -диэтиленгликольсукцинат Г 1 3.Недостатком данного способа является его сложность, многостадийность и недостаточно высокая селективность разделения иэомеров ацетатов (степень разделения не превышаетвеличину 1 и 01Наиболее близким по техническойсущности и достигаемому эффекту кизобретению является способ определения сопряженных диеновых алифатических спиртов и ацетатов путем эк-трагирования этих соединений изанализируемой пробы гексаном, упаривания экстракта с последующим хроматографическим разделением его на.колонке с твердым носителем хроматонМ-АФ-ЭМСЭ, содержащим 5% нитрилсилоксанового (ХЕ) или диметилсилоксанового.ЙЕ - 30) каучука 2)Недостатком известного способа является невысокая селективность разделения иэомеров (степень разделения 35не превыаает величину 1,05 и нйзкаяточность определения как каче.:твенно"го,так и количественного состава аналиэируеьих образцов.Целью изобретения является повышение селективности разделения иэочности способа,Поставленная цель достигаетсятем, что согласно способу определения сопряженных диеновых алифаги-. 45.ческих спиртов и ацетатов путем экстрагирования их из анализируемойпробы гексаном, упаривания экстрактас последующим хроматографическимразделением его на колонке с твердым носителем, содержащим неподвижнуюжидкую фазу,в качестве неподвижнойжидкой фазы используют жидкие кристаллы общей Формулы О где Х=-и=И-; Ъ-С-О-; г: СН 1 ПЗ, - С 2 Н, Р:-ОСИ; - ОС Н 3 2%Н,Определение сопряженных диеновыхалифатических спиртов и ацетатов проводят следующим образом.Образец, содержащий от 60 до1300 мкг анализируемого соединения,подвергают трехкратной экстракциигексаном (Зх 10 мл ) в течение 15 мин,затем объединенные экстракты упаривают в токе азота до объема 1 мл,из которого отбирают микрошприцемаликвотную часть (2-3 мкл ) и анализируют ее на стеклянной колонке(Зм х 2 мм ), заполнейной сорбентом:5 Юес.Ъ, жидкокристаллической неподвижной жидкой Фазы на хроматонеМ-ЯЮ-ЭМС 5, зернеиием 0,125-0,160 мм.Температуру колонки изменпют впределах 100-170 С, детектированиеразделенных компонентов осуществляютпламенно-ионизационным детектором.Разделение проводят на колонках снеподвижными .жидкими фазами. Характеристика используемых в способехроматографических колонок с твердымносителем хроматон представлены втабл. 1Т а б л и ц а 1.И - .:143 .сфаД-е-ОД 6-О-Д-Осни чГ П р и м е р 1. 1 мг искусственной . .смеси изомеров 8,1 б-додекаднен-ола, содержащей 75 транс, транс-,5 цис, цис-и 8 дис, транс-изомеров, растворяют в 1 мл гексана, отбирают микрошприцем 3 мкл полученного раствора и определяют в интервале температур.100 - 170 вС относительные времена удерживания геометрических изо.меров 8,10-додекадиен-ола по цис, транс изомеру на колонках с жидкиии кристаллами структуры г - ф (табл. Ц . Полученные данные приведены в табл.2.П ри м е р 2. 1 мг искусственной смеси изомеров 8,10-додекадиен- .1-ол ацетата, содержащей 54 транс, транс-, 15 циб,цис-, 23 транс,циси 8 цис,транс-изомеров, растворяют в 1 мл гексана и определяют на колонках с жидкими кристаллами струк туры 1- ф .относительные времена удерживания иэомеров по цис,транс. иэомеру.Результаты представлены в табл.2.П р и м е р 3, 1 мг искусственной 45 смеси иэомеров 6,8-декадиен-ола, содержащей 60 транс, транс-, 10 цис, цис-, 15 цис,транс- и 15 транс,цисизомеров, растворяют в 1 ю гексана и определяют на колонках с жидкими 50 кристаллами 1- ф (табл.1 относительные времена удерживания по цис,транс-,.иэомеру в интервале температур 100170 дС. Результаты определения селек"тивности жидких кристаллов (2поотношению к этим соединениш представлены в табл. 2.,П р и м е р .42 мг искусственнойсмеси изомеров 911-тетрадекадиенол ацетата, содержащей 50 цис,транс 15 транс,цис-, 8 цис,цис-, 27транс, транс-изомеров, растворяют в1 мл гексана й определяют на колонках с жидкими кристаллаии 1-В(табл. 1) при различных температурахотносительные времена удерживанияанализируемых соединений по цис,транс-иэомеру. Результаты представлены втабл. 2.П р и м е р 5. 1 мг искусственнойсмеси изомеров 7,9-додекадиен-олацетата, содержащей 30 транс, транс-,8 цис,цис-, 54 транс,цис- и 8цис,транс-иэомеров, растворяют в 1 млгексана и определяют на колонках сразличными жидкими кристаллами приразных температурах относительныевремена удерживания анализируемыхсоединений по цис,транс-изомеру,Влияние температуры колонки и струк", туры жидкокристаллической неподвижной фазы на удержание изомеров дие.ЮВ С1068808 Т аблиц а 2 Относительное время удерживания на колонках с неподвижными аидкокристалличесаими Фазами 1 - (табл.1) изомеров диеновьюс спиртов и ацетатозюв е 4 веаефваеееаавМ 8,10-додекациен-ол юавйэВФ 4 ю транс, цис, транс, транс, цис, транс,цис цис транс цисцис транс.1068808 8 ПРодолжение табл. 2аеееевюеааеееюваа вееь Относительное реми удерзнэании на колонках с нелодиаными аидкокристаллическмми Фаэами 1- ф .(табл.1) иэомеров диеновых слирто и ацетато ееюа вее ю е еее чю ееееаававаееа ваеевееееаваев Т 1 аВееваее е ю еееааеюаввею авве е ее 8, 10 додекадиен 1 ол ее ееюе еевею еюю ееаваав юеююю авве еевее транс, цис, трано, цис цис транс транс, цис, транс,цис цис транс. трансцис цис, транс, цис транс е а ееа е еюю ееавва ювеаю Юаю Ю Ю 6, 8-декадиен 710 106 88,08 Продолжение табл. 2 ВВавеаюеееаеевеавеВВввеввею Е 4 аЕе Относительное ерема удерживания на колонках с неподвижными зпщкокристалличвскими фазами 1- (табл.11 наомеров дивновюс спиртов и бататовВ Ю Ю Ю ВВВ Ю ВВВВ В Ю В твювратур кон е,В Е ЕЕЕВВВВЕЕЕВВВВЕВЮЕЕВВ ЕювЕЕЕееюювЕ ю а ю ю ю ю ВВ ю ю ю в ю Ю Ю Ю й Ю Ю Ю ВВ еюаееееее веееееееюееее е еееювееееВ В8 10-додвкадявнолЮВВВ ЮЮВВВЮ ВвВЬВВЕЮЮЮЮЮЮ ЮЮЮВВ ЮЮЮЮЮ ЮЮ ЮЕЮЮФВЮЮ ЕЮЕЮЮВВВЮЕ транс цис, транс, транс, цис, транс, цис цяс транс цис цис транс транс, цйс, транс,цяс, цис транс,вае еаеювева вееа вюв юВвв ацетат 7,9-додекадиен-ол1,06 1,17 1,23 160 1,07 1,19 1,281,18 1,24 1,06 150 145 1,08 1,21 1,31 1,06 1,18 1,27 1,20 1,31 140 1,07 1,25 1, 35 1,10 130 1,09 1,22 1,31 125 120 115 110 100 Продолжение табл, 2еев В ШЩ Относительное время удерживания на колонках с неподвижными жидкокристаллическими фазами 1 -9 (табл.1 ) изомеров диеновых спиртов и ацетатов Темпера- тура колбнок, С Ч У.Ч Ч 1 8, 10-доцекадиенол транс, цис, транс, цис цис транс транс, цис, транс,цис цис транс транс, цис, транс,цис цис транс 170 160 1,07 1,14 1,20 1,08 . 1,15 1,22 150 140 1,10 1,18 1,26 135 1,08 1,14 1,21 1,12 1,17 1,22 1,09 1,16 1,24 130 авеее аваев ее ювееюВВ вВВЮВВ аВ 1,05 1,15 1,21 1,06, 1,17 1,25 1,08 1,20 1,30 1,07 1,18 1,27сительноокристаллич Ююю Юю ана, анс а цис цис ци ФЮЮ125 ЮЮЮ ЮЮЮЮ 1,14 . 1,19Ю,08 1,1 0 3 130 125 Продолжение табл. 2ЮВЮ время удерживания на колонках с ненодэижныни ескими Фазами 1-ф (табл.1) изсмеров дивною спиртов и ацетатовЮ Юю Ю 1 ЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮ ЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮЮ Ю 1,17 1,23 1,15 1,21 1,16 1,1,18 1,13 1068808 Продолжение табл, 2 в 4 Вееееююеееейввуееееееюеее сителъное ерема удераиваниа н Оиристалличесиими фазами 1 вмм сниртОв и ацетатовЮЕ ВВЮЮВЕ ееею ее холоннах с неи(табл.1 ) иэоме НО в ЮваоВ ВВФВВВ ееееее ее Ч в ЕВВЕЕ ЕЕ еи-ол йв Юе еееюВеееее ЮВВЮЮ анс, ци с ци Юее Е е ВВЕ ЕЮЮЕЮ 108 112 1 13 11068808 16. Продолжение табл, 2ееееееее 4 юеееееааееФосительиое время удерживания на колоиках с иеподвижщвщ кокристаллическими .фазами 1-(табл.1 ) мзомвров Фввиовых спиртов и ацетатов Темпера- .тура ко- .лонок фС 1 Ч Ч Ч 1 гвеюавее не ееееею авеюатаеюе уйеееееаве Ве 10-доцекадиеи-,ол Ю рано, рвнс транс, транс,транс . цис и рвнс, цис е цис транс,транс ци 1,28,17 1,2 61 е 16 1 ю 21а 00 П р и м е р 7. Определение про.центного содержания.иэомеров 8,10- додекадиен-ол ацетата в искусственной смеси, имеющей состав аналогичный примеру 2, проводят, методом внутренней нормализации, аналогично 5 примеру б. Хроматографический анализ проводят при 125 С на колонке с жидкимкристаллом структуры ф табл.в качестве неподвижной жидкой фазы.Результаты представлены в табл.З. О П р и м е р 8. Количественное определение процентного содержания компонентов искусственной смеси изомеров 6,8-.декадиен-ола, имеющей состав, аналогичный примеру 3, проводят при 140 С на колонке с жидким кристаллом 1,(табл.1) в качестве неподвижной жидкой фазы.Расчеты проводят по методу внутренней нормализации, аналогично примеру б. Результаты представлены втабл, 3. Из данных табл. 2 следует, что жидкокристаллические неподвижные жидкие Фазы 1 Е обладают высокой селективностью по отношению к геометрическим иэомерам диеновых алифатических спиртов и ацетатов, причем максимальная селективность наблю дается в твердокрнсталлическом состоянии (фазе 2 жицкого кристалла, а именно при температурах на 2-20 С ниже температуры перехода используемого жидкого кристалла из твердокрис таллической в нематнческую фазу.П р и м е р б, Искусственную смесь иэомеров, имеющую состав аналогичный примеру 1, разделяют при 120 С на колонке с жидким кристал лом структуры У табл.1 в качестве ,неподвижной жидкой фазы.В колонку хроматографа микрощприцем вворщт 3 мкл раствора изомеров 8,10-додекадиен-ола в гексане, проводят четыре параллельных определения и рассчитывают, применяя метод внутренней нормализации, содержание компонентов в исследуемой смеси по сФормуле П р н м е р 9. Определение процентного содержания,изомеров 9,11- тетрадекадиен-ол ацетата в искусственной смеси, аналогичной примеру 4, проводят при 145 ОС на колонке с жидким кристаллом структуры 1 Н табл.1 в качестве неподвижной жид.кой фазы. Расчеты проводят по методу 60 внутренней нормализации, аналогично,примеру б. Результаты представлены :в табл. 3.П р ицентногриэомеров жанне 1-госиукомпонентав в смеси.ы в табл.З. 65е х; процентное содер компонента в сме высота пика 1-го число компоненто таты представлен м е р 10. Определение просодержания геометрических7,9-,додекадген-ол ацетаташ езуль