Способ получения 3, 3-дизамещенных индолин-2-ионов или их солей

.- Хг) .р д) ИИ М Ко. (Ця) ) и Викили их солеи, которы хотропной активность обладают псичто может быть не. Синтез ведутф-лы 11 сначала кспе я зовано в медициткой соединенй споль брабог а и представлд: д ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(71) Е,И.Дюпон де Немур энд(72) Мельвын Джон Майерс (НБтор Еханнес Никкольсен (Ж)-.О 3,основанием, а затем соеК Одинением ф-лы 111 На 1- аФСн) -СНи далее соединен кием ф-лы 1 Ч На 1-СНй ДР где На 1 - галанд; (Й)н ДН указаны нзкзе.Выделение целевого продукта ведутв свободном виде или в виде нужной соли или в виде И-оксида, когда ДН или Н означают независимо группу а.Новые соединения повьппают степень вы- фью свобождения ацетилхолина из гиппокам- (,Д пических слоев, а также степень вы- АД свобождения ацетилхолина и допамина из слоев хвостатого ядра и высвобож ф дение серотонина из кортикальных сло- (р ев, т.е, новые вещества проявляют 46 выраженное психотропное действие.3 табл.+16В значительной степени отличается от контроля)1(0,05, значения получают по методу Бпйепя 1 1.-Сеяс. Т а б л и ц а 3 7. повьппения числа реакций активного избежания у крыс Пример 54 л . 53 21+59 +91 В значительной мере отличается от контроля, Р 0,05, значения получаютпо методу 31 ийеп я =ея. Редактор А.Огар Заказ 1793 Тираж 3 17 Подпис ноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раущская наб д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101 2 3 4 5 6 7 8 9 12 13 16 19 43 45 46 49 Т а б л и ц а 23 повышения побужденного стимулом высвобожденияАСЬ в церебральном кортексе крыс ьп чгоИзобретение относится к способам получения новых З,З-дизамещенных индолин-онов общей формулы 4-пиридил или мещенный или замеом; К - С -С -алки3фенил, незщенный хлор=Оили 1;Х - водород ил(Н)и2 Н - независимо где метил руг от друга группа УЛО И или их солей, которые обладают психотропной активностью. Цель изобретения - разработка наоснове известных методов способа полу 35чения жовых соединений, обладающкценными фармакологическими свойствами,, П р и м е р 1. 3 3-бис(2-Пиридил 9 4 Ометил) -1-фенилиндолин-он.К раствору О, 1 моль И-фенилиндолин 2-она в 200 мл бензола под И быстроприбавляют 0,1 моль этоксида таллия.Раствор нагревают в течение короткого времени до температуры кипенияПри приблизительно 50 С начинаетсяобразование тяжелого осадка. Последефлегмации в течение 5 мин смесь охдаждают и прибавляют 200-300 мл гек 5 Осана в целях завершения осажденияТвердое вещество отфильтровывают и сушат с получением 857.-ной таллиевойсоли Я-фенилиндолин-она в виде желтого твердого вещества,Бережно превращают. 022 моль гидро 55хпорида пиколилхлорида в свободноеоснование путем растворения в ЗО млхолодной воды, охлаждения до 0-5 С и подщелачивают гидроксидом аммония.Свободное основание экстрагируют(Зх 100 мл бензола), потом сушат надИа 80, и фильтруют, причем поддерживают температуру не выше 10 С.К этому раствору прибавляют таллиевую с,оль И-фенилиндолин-она, а затем200 мл бензола. Эту смесь нагреваютс обратным холодильником в течениеночи и после охлаждения осажденныйхлорид таллия отфильтровывают, Основной продукт экстрагируют из фильтрата 0,5 Л соляной кислоты, потом превращают обратно в основание гидроксидом аммония и экстрагируют в метиленхлорид, сушат безводным карбонатом калия, фильтруют и испаряют. Получаемоегустое темно-красное масло растворяютв 50 мл эфира. С растирания с помощьюстеклянной палочки начинается кристаллизация, которая .требует короткоговремени, Твердое вещество отфильтровывают, промывают эфиром .и сушат с получением 11,2 г продукта; т.пл. 107 о111 С. Продукт очищают испарительнойхроматографией, используя 40-60 мкмсиликагеля 60 (Е.МегсЕ) на колонкедлиной 10 дюймов (25,4 см) и диаметром 2 дюйма (5,08 см).Вследствие элюции смесью из метиленхлорида и метанола в соотношении95:5 (детекцию проводят с помощью детектора типа 256 р ш (Сои-Мас) получают 8,2 г чистого свободного основанияво фракциях 5-10 (100 мл каждая), значение 1=0,33 (силикагель; метиленхлорид-метанол 95;5); т,пл, 129-130 С.Анализ:Рассчитано, 7.: С 79,77; Н 5,4 1;И 10,73.СтР РэОНайдено. Ж: С 80,05; Н 5,65;И 10,67,П р и м е р 2. Дигидрохлорид 3,3 бис(2-пиридилметил)-1-фенилиндолин 2-она,8,2 г 3,3-бис(2-пиридилметил)-1 фенилиндолин-она превращают в сольдигидрохлорида путем растворения смеси в 25 мл метиленхлорида и прибавляют 25 мл 253-ной соляной кислоты вэтаноле, Раствор испаряют и прозрачный остаток растворяют в 75 мл кипящего ацетона. Кристаллизация начинается с охлаждения до комнатной температуры и с растирания. После поддерж ки при комнатной температуре в течение б ч смесь поддерживают при 0 Св течение ночи. Затем продукт фильтруют, промывают холодным ацетоном и сушат в вакуумной печи при 60 С в течение 1 ч над Ггаппз 1 с. Выход 8,55 г; т.пл. 250-251 С. Продукт перекристало5 лизовывают из изопропанола с выходом 8,29 г; т.пл. 250-251 С.П р и м е р 3. Дигидрохлорид 3,3- бис(3-пиридилметил)-1-Фенилиндолин 10 2-она.К О,З моль И-Ленилиндолинона в 300 мл бензола прибавляют 0,36 моль содамида за один раз. Смесь нагревают с обратным холодильником в течение 3 ч (пока выделение аммиака не будет прекращено), а потом реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры. Бережно подготавливают 0,5 моль 3-пиколилхлорида из соли гидрохлорида. 20 так же, как описано для случая использования 2-пиколилхлорида, а потом смесь экстрагируют в бензол, сушат сульфатом натрия и Фильтруют. К раствору анионного И-Фенилиндолинона под 25 азотом прибавляют по каплям при сильном перемешивании бензольный раствор 3-пиколилхлорида в течение ЗО мин при 20 С. После завершения прибавления реакционную смесь нагревают с обрат ным холодильником еще 3 ч.Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и прибавляют еще раз 0,36 моль содамида за один раз.Смесь нагревают с обратным холодильником до того момента, пока выделение аммиака из реакционной смеси не будет прекращено (3 ч). Реакционную смесь охлаждают до 40комнатной температуры и к раствору фанионного индолинона еще раз прибавляют по каплям при сильном перемешивании 0,5 моль основания 3-пиколилхлорида в бензоле в течение 30 мин при 4520 С. После завершения прибавления3-пиколилхлорида реакционную смесьнагревают с обратным холодильником втечение 3 ч. Потом реакционную смесьохлаждают в ледяной бане и прибавляют 501 И НС 1 (300 мл) при сильном механическом перемешивании. Фазу НС 1 выделяюти органическую фазу экстрагируют ещедва раза 100 мл 1 И НС 1. Объединенныеэкстракты кислоты подщелачивают,экстрагируют метиленхлоридом, промывают водой, сушат сульфатом натрия,фильтруют и испаряют, .Темное маслорастирают в порошок эфиром и получают плотные кристаллы, которые фильтруют, промывают эфиром до достижения бесцветного состояния. Получают 3,1 г твердого вещества; т.пл. 136,5-138 С. Часть этого вещества (2,8 г) растворяют н 1 О мл 252-ной соляной кислоты в этаноле. Кристаллизация начинается с растирания (плотные кристаллы) . После поддерживания белых кристаллов в течение 1 ч при О С их отфильтровывают и сушат с получением 3,2 г целевого продукта; т.пл, 156 С. Продукт растворяют в 115 мл кипящего этанола, к которому бережно прибавляют 10 мл кипящего ацетона. Раствор охлаждают в течение 8 ч, потом в течение ночи при 0 С. Чистые белые кристаллы фильтруют, промывают холодной смесью из этанола и ацетона в соотношении 1:1 и сушат под инфракрасным светом с получением 2,6 г чистого продукта; т.пл.156-156,5 СП р и м е р 4. Дигидрохлорид 3,3- бис(4-пиридилметил)-1-фенилиндолин-она.Растворяют 0,05 моль И-фенилиндолинона в очень незначительном количестве сухого тетрагидроАурана в колбе с несколькими шейками под И. Отмеряют 0,05 моль диизопропиламида лития в сухом поглотителе в капельную воронку, а затем сухой тетрагидрофуран прибавляют к диизопропиламицу лития для его растворения. Капельную воронку с раствором из диизопропиламида лития и тетрагидрофурана закрывают и удаляют из сухого поглотителя, Раствор индолинона охлаждают до -30 и указанный раствор диизопропиламица лития прибавляют по каплям к этому раствору в течение 15 мин при -30 С. После прибавления реакционноч смеси дают подогреться до комнатной температуры. Реакционную смесь вновь охлаждают доо-30 С, затем прибавляют по каплям при -ЗО С в течение 30 мин 0,06 моль 4-пиколилхлорида, превращенного аналогично описанному в свободное основание, а потом растворенного в 25 мл тетрагидрофурана.После окончания прибавления реакционной смеси дают подогреться до ком" натной температуры на 30 мин. Потом ее охлаждают до -30 С и по каплям прибавляют вторую часть диизопропиламида лития (0,05 моль) в тетрагидрофуране в течение 15 мин при -30 С. После окончания прибавления реакционной сме 1575936си дают подогреться до комнатной температуры и превращают еще 0,06 мольгидрохлорида 4-пиколилхлорида в свободное основание,Подогретую до комнатной температуры анионную реакционную смесь сноова охлаждают до -30 С и по каплям прибавляют вторую часть 4 -пиколилхлоридав 25 мл тетрагидрофурана в течение30 мин при -30 . Реакционную смесьподогревают до комнатной температурыи выдерживают в течение 1 - 17 ч. Любоеостающееся еще количество аниона разрушают путем бережного прибавления50 мл насыщенного раствора хлоридааммония. Затем тетрагидрофуран испарают, остаток растворяют в метиленхлориде и экстрагируют из метиленхлорида 0,5 М соляной кислотой (Зхх 100 мл). Объединенные части НС 1 подщелачивают (рН 12) и продукт экстрагируют метиленхлоридом (Зх 100 мл),Метиленхлорид сушат сульфатом натрия,фильтруют и испаряют с получением20 г продукта. Вследствие очисткихроматографией в загрузках по 10 г(40-63 р п силикагеля на колонке длиной 8 дюйм (20,32 см) и диаметром2 дюйма (5,08 см); элюция осуществляется с 69,46% ЕОАс, 29,75% гексана, 0,79% Е И) получают 19,2 г основания (93%); т.пл 186,0-186,5 С,19 г 3,3-бис(4-пиридилметил)-1-фенилиндолин-она превращают в дигидрохлорид путем обработки 40 мп 25%-ной35соляной кислоты в этаноле. К смесиприбавляют 50 мл изопропанола и раствор нагревают до кипения. Прибавляюткипящий ацетон до самого начала образования толстых игольчатых кристаллов (общий объем растворителей 200250 мл) . Раствору дают охладиться до комнатной температуры,а потом температуруоподдерживают при 0 С в течение ночи.Твердое вещество фильтруют и промывают холодным изопропанолом с получением 19,5 г (84%) целевого продукта;т,пл. 257-258 С (степень сухости влияет на т.пл. дигидрохлорида; в случае5 Оочень медленного повышения температуры устройства для определения точкиплавления достигают т.пл. 275-276 С),Получают второй выход путем испаренияфильтрата, растворения остатка в изопропаноле и прибавления примерно та 55кого же количества ацетона, Реакциониую смесь поддерживают при комнатнойтемпературе в течение ночи, а потомеще б ч при ОС, вследствие чего получают дополнительные 2,8 г продукта;т,пл, 252-253 С, После перекристаллизации получают 2,4 г продукта второго выхода; т.пл, 257-258 С. Общий выход дигидрохлорида составляет 21,9 г(94%) .П р и м е р 5. Дигидрохлорид 3,3 бис(4-пиридилметил)-1-метилиндолинона,К раствору 0,05 моль 1-метилиндолин-она в 50 мл тетрагидрофурана,оохлажденного до -30 С, по каплям прибавляют 0,1 моль диизопропиламида лития в 100 мл тетрагидрофурана в течение 30 мин, После окончания прибавления реакционной смеси дают подогреться до комнатной темературы, а потомснова охлаждают до -ЗО С, Аналогичноописанному для случая превращения гидрохлорида пиколилхлорида в основание пиколилхлорида превращают О, 21 моль гидрохлорида 4-пиколилхлорида в. безводноесвободное основание, а потомрастворяютв 150 мл тетрагидрофурана, Этот раст-;вор прибавляют по каплям к реакционной смеси в течение 60 мин при -30 С,После окончания прибавления реакционной смеси дают подогреться до комнатной температуры на 1 ч, затем ееохлаждают и бережно разлагают путемприбавления по каплям насыщенного хлорида аммония.После окончания прибавления тетрагидрофуран испаряют и остаток распределяют на бензол и 0,5 И НС 1. Этот остаток переводят в делительную воронкуи органическую Вазу экстрагируют ещедва раза 0,5 К НС 1. Объединенные кислотные экстракты подщелачивают, экстрагируют бензолом, сушат над Иаф 0,фильтруют и испаряют. Остаток растирают в порошок эфиром, фильтруют и промывают незначительным количествомэфира; выход 2,9 г; т.пл. 149,9150,9 С. Этот продукт превращают всоль дигидрохлорида 25%-ной солянойкислотой и этанолом и кристаллизуютиз этанола - ацетона; выход 1,9 г целевого продукта; т.пл. 274,5 С. П р и м е р 6. Дигидрохлорид 3,3 бис(4-пиридилметил)-1-(3-хлорфенил)индолин-она.Целевое соединение получают из М(3-хлорфенил)индолин-она согласноописанному в примере 3; выход 24%,т.пл, 275-276"С.П р и м е р ы 7 и 8. 3,3-бис(4 Пиридилметил-оксидо) -1-фенилиндолин-он и 3-(4-пиридилметил)-3-(4 пиридилметилоксидо)-1-фенилиндолин- .2-он. 5К 3,3-бис(4-пиридилметил)-1-фенилиндолин-ону в 100 мл метиленхлорида прибавляют по каплям с помощью магнитной мешалки раствор 4, 14 г(0,024 моль) 80-85 -ной ш-хлорпербен-зойной кислоты в 50 мл метиленхлорида; этот раствор перемешивают в течение ночи, При контроле влажной реактивной крахмальной иодистой бумагойналичие пероксида не устанавливают,поэтому промывают раствор метиленхлорида 5 -ным бикарбонатом натрия (Зхх 75 мл), сушат сульфатом натрия,фильтруют и испаряют.20Остаток растирают в порошок смесьюэфира и этилацетата (соотношение 5;1)и получают 2,14 г твердого вещества,содержащего бис-И-оксид, моно-И-оксиди незначительное количество исходного 5материала, Реакционную смесь очищаютиспарительной хроматографией (силикагель 40-63 рш, элюция осуществляетсясмесью из хлороформа и метанола в соотношении 90;10) с получением 1,18 гцелевого продукта; значение К=0,34,т.пл. 265,3-265,7 С (после перекристаллизации из 10 мл воды). По даннымвысокоразрешающего массового спектрацелевой продукт - бис-И-оксид; ш/е423. 1595 (М+ рассчдля С иН а 1 ИОз35423.1582).Устанавливают, что вторая фракция(200 мг), полученная испарительнойхроматографией, представляет собой мо но-И-оксид; целевой продукт: 3-(4-пиридилметип)-3-(4-пиридилметилоксидо)1-фенилиндолин-он, значение Кг=0,41;т.пл. 217,7-218,5 С.Масс-спектр тд/е 407.1631 (М+, 45рассч, для СН,ИО 407.1634).Аналогично могут быть получены соединения или их соли, представленныев табл, 1,Биохимическое испытание.Влияние соединений на высвобождение ацетилхолина (АСЬ) из церебральных кортикальных слоев крыс, в основном, испытывают по методу суперфузиислоев (з 1 хсе зпрегЕозоп).Берут крыс-самцов вида хзаг (.55(СЬаг 1 ез Кочет) весом 175-200 г. Ихпомещают в жилище по крайней мере за7 дней до проведения эксперимента при цикле темнота - свет 12:12 ч(светло с б утра, темно с б вечера).У них свободный доступ к стандартнойпище для крыс (Ригпа) и к деиониэированной воде.Крыс обезглавливают и сразу разрезают мозг. Вручную приготавливаютслои толщиной 0,3 мм от парентерального кортекса, применяя направляющиес выемками типа Ьцс 1 Сеф а потом разрезают слои на квадраты размером0,25 х 0,25 мм,Слои (сырой вес прибилизительно100 мг) инкубируют в 1 О мл среды типаКгеЬз-Кьпяег (КК), содержащей, ммоль:МаС 1 116; КС 1 3; СаС 1 1,3; МяС 1 1,2;КНРО 1,2; ИаЯО 1,2; ИаНСОэ 25;глюкоза 11, к которой заранее прибавляют 10 р Сз Н-холина (спец, активн.приблизительно 35 С/ммоль; ИЕИ) и10 нмоль немеченого холина е получением целевой концентрации 10 М. Инкубирование осуществляют в течение30 мин при 37 С под постоянным потоком смеси 95 . О и 5 СО. При этихусловиях часть поглощенного радиоактивного холина превращается в радиоактивный АСЬ холинергическими нервными окончаниями, хранится в синаптических пузырьках и высвобождается последеполяризации. посредством среды с высоким содержанием К+.После мечения мест хранения АСЬслои 3 раза промывают нерадиоактивнойсредой КК и переводят в устройство суперфузии в целях определения лекарственного эффекта на высвобождение АСЬ.Устройство суперфузии состоит из 10стеклянных снабженных термостатом колонок диаметром 5 мм, оснащенныхфильтрами из стеклянных волокон (СР/Р),на которые помещают слои (приблизительно 10 мг ткани на одну колонку).Суперфузию проводят с помощью средыКК (0,3 мн/мин), содержащей 10 М гемихолиния(НС). НСпредотвращает поглощение холина, образованногово время суперфузии из фосфолипидов ивысвобожденного АСЬ. В случае поглощения холин превращается в немеченыйАСЬ и высвобождается скорее, чем заранее образованный меченый АСЬ. Средупоставляют с помощью 25-канальногоперистальтического насоса и перед поступлением в колонку суперфузии нагревают до 37 С в снабженной термостатомспирали из нержавеющей стали. Каждаяколонка оснащена 4-ходовым золотником,обеспечивающим быстрое переключение между средой КК с высоким содержанием К и средой КК с низким содержанием К+, и двумя 10-канальными 3-ходовымн золотниками, используемыми для нере 5 ключения между средами КК с низким и с высоким содержанием К+, не содержап 1 ими лекарственного препарата, и такими же средами, содержащими лекарственный препарат.После 15-минутной отмывки не специфически связанной радиоактивности начинают собирать 4-минутные фракции. После собирания трех 4-минутных Арак Ций переключают от среды КК с низким содержанием К на среду КК с повышенным до 25 ммоль содержанием КС 1 среда КК с высоким содержанием К+ (Я 1), Побужденное деполяризацией стимулирование высвобождения средой КК .с высоким содержанием Кф продолжается 4 мин. Среды КК с низким и с высоким содержаниями К, не содержащие лекарственного препарата, затем замещают средами КК с низким и высоким содерф 4 ниями К+, содержащими лекарственный препарат или носитель. Продолжают суперфуэию, собирая еще три 4-минутные фракции со средой КК с низким 30 содержанием К , одну 4-минутную Аракцию со средой КК с высоким содержанием К (Я 2) и две 4-минутные фракции со средой КК с низким содержанием К+ К средам прибавляют лекарственный препарат, разбавляя (соотношение 1: :100) пригодные концентрации лекарст". венного препарата в 0,97-ной ЫаС 1/Н О или средой КК с низким либо с высоким 4, содержанием КВсе фракции суперфузии собирают в пробирках для отсчитывания при жидкостной сцинтилляции. После суперфузии слои удаляют из колонок суперфузии и экстрагируют в 1,0 мл О, 1 И НС 1. Потом к Аракциям и экстрактам суперфузии прибавляют 12 мп жидкости для отсчитывания "1.щц 3.всьпс" (МЕИ) и пробы отсчитывают в устройстве для отсчитывания при жидкостной сцинтил 50 ляции. После резкого охлаждения не делают никаких поправок. Соотношение Я 2/Я 1 (в сравнении с контролями) являЕтся мерой способности соединений понышать или уменьшать степень побужденного стимулом высвобождения ацетилхолина, Данные по высвобождению АСЬ п чСго представлены в табл. 2. При подобных методах испытаниясоединения по примерам 2 и 4 такжеповышают степень высвобождения ацетилхолина из гиппокампических слоев и степень высвобождения ацетилхолина идопамина из слоев хвостатого ядра (Ицс 1 ецзсапйацз) п у 1 го. Кроме того, соединение по примеру 4 также повышаетстепень высвобождения серотонина изкортикальных слоев,Испытание на поведение.Эффект соединений на поведениекрыс при испытании на активное избежание (подъем на палочку) испытываютследующим образом: в течение 4 сутоккрыс-самцов вида Ярга 1 це-Ваь 71 еу(СЬаг 1 ез Ковчег) весом 150-200 г каждые сутки подвергают двум сериям попять опытов обучения (одну серию в1 ч ночи, другую в 1 ч дня). Опыт начинается с того, что крысу помещаютв клетку (модель Соц 1 Ьоцгп Е 10"10,оснащенная подвижным решетчатым электрофицируемым дном) так, что она смотрит в направлении палочки (выполненаиз дерева с параллельными диагональными выемками и висит с перекрытия),Вначале закрывают дверь в клетку ивключают свет в клетке. Через 10 с решетчатое дно электриАицируют на 10 спри помощи передатчика шока моделиСоц 1 Ьоцгп Е 13-08, Интенсивность шокана лапы колеблется в диапазоне 0,61,2 мА. После окончания опыта выключают свет и передатчик шока и удаляюткрысу из клетки. Если крыса поднимается на палочку до включения передатчика шока, то считают это избежанием;если она поднимается на палочку послевключения передатчика шока, то считают это бегством. Крысам по 6-9 в группе подкожно вводят различные дозы соединения или соответствующего носителяза 30 мин до начала первого опыта каждой серии обучения. Данные по поведению при испытании на активное избежание анализируют методом регрессивного анализа кривой на основе общего числа реакций избежаний и серий опытов. Вычисляют средний уклон и стандартное отклонение от средних величин (ЯЕМ) для каждой подопытной группы и результат используют в качестве меры поведения при испытании на активное избежание. Эффект лекарственных препаратов выражают в процентах отклонения уклона относи1575936 13 14 Формула изобретения5 СНг 10 2вр 15 С,-С -алкип, 4-пиридил или фенил, незамещенный или замещенный хлором;О или 1;водород или СН где К -РХ -где На 1 - галоид;- и НД имеют указанные значения, 25 и выделяют целевой продукт в свободном виде или в виде соли, или в слу"чаа, когда Д иди Н)аавависиио другот друга означаютв виде его И-оксида. тельно уклона контрольной кривой. Результаты представлены в табл, 3. Способ получения 3,3-дизамещенныхиндолин-онов общей формулы независимо друг от друга или их солей, о т л и ч а ю щ и й с ятем, что на оксиндол общей формулы х-сЖ О. действуют .основанием с последующейобработкой полученного. продукта соединением формулы и затем соединением формулына-Сн, - н19 152- о 20 233-235 131-133 СН СН СН О