C12P 21/08 — моноклональные антитела

Номер патента: 1698287

Опубликовано: 15.12.1991

Авторы: Авдеев, Барышников, Жордания, Кадагидзе, Казачкина, Кармакова, Короткова, Якубовская

МПК: C12N 5/20, C12P 21/08

Метки: антигену, антитела, гибридных, глобул, женского, животных, жировых, клеток, культивируемых, мusсulus, мембран, молока, моноклонального, продуцент, штамм

...специфичности, клонируют методом предельных разведений на фидере из клеток селезенки и тимуса мышей ВА 1 В/С:Для приготовления фидера кусочки тимуса и селезенки разрушают в стеклянном гомогенизаторе Поттера, Взвесь клеток фильтруют через 2 слоя марли, Суспензию клеток разливают по 0,1 мл в лунки 96-лу 40 45 50 роля используют сыворотку крови мыши,35 а также поликлональные антитела кроликаТитр антител в культуральной жидкостиопрсделяют в иммунофлюоресцентном тесте. Титр антител в культуральной жидкости равен 500,5 Для выращивания асцитной опухоли изштамма гибридных клеток пригодны мыши самки ВА 1 ВС. Интактным мышам за 1 - 7 дн дс прививки опухоли вводят внугрибрю. шинно по 0,5 мл 3%-ного пептона на вазели новом масле, Клетки гибо 7...

Номер патента: 1721089

Опубликовано: 23.03.1992

Авторы: Дамбинова, Калантаров, Орлова, Трахт

МПК: C12P 21/08

Метки: антитела, гибридных, глутаматным, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, мозга, моноклонального, продуцент, рецепторам, человека, штамм

...5. Моноклональное антитело, продуцируемое штаммом А-НОЯС 5, относится кизотипу 1 дО, подкласс О 1 и связывает надмембранный участок глутаматных рецепторов мозга человека. Специфичность взаимодействия антител с нейрорецепторами-глутамата выяв ляют с помощью иммуноферментного и иммуногистохимического анализов.Для получения препарата моноклональных антител в количестве. необходимом для проведения иммунохимических исследований, гибридные клетки помещают в пластиковый флакон площадью 25 см по 5 х 102 5 клеток в 5 мл среды ВРМ 1 1640 с 10эмбриональной телячьей сыворотки, 100 лошадиной сыворотки, 4 мМ глутамина, 10 мМ 510 пирувата йа, 100 мкг/мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина и 0,05 мМ меркаптоэтанола, Клетки культивируют 3 - 4 дн при...

Номер патента: 1721090

Опубликовано: 23.03.1992

Авторы: Вербицкий, Фидлер

МПК: C12P 21/08

Метки: антитела, гибридных, животных, клеток, культивируемых, лгч, лощади, мusсulus, моноклонального, продуцент, реагирующего, субъединицей, ттгч, хгч, штамм

...удаляют селезенку и готовят суспензию спленоцищв, Клетки селезенки сливают (гибридизуют ") с клетками. мышиной миеломы Х 63 А 9 8.653. Сливающий агент - ПЭГ(50-ный раствор). Селекцию проводят на среде НАТ, два клонирования методом лимитирующего разведения (1 клетка на 3 лунки), 100% позитивных клонов.;Стандартные условия выращивания: среда. ВРМ1640 с 10% фетальной сыворотки крупного рогатого скота (РСЯ), температура при культивировании 37 ОС, газовая фаза - воздух с 5;4 С 02.Способ культивирования в пластиковых флаконах на 50-250 мл, посевная доза 500000 клеток/мл, кратность рассева 1:2, время субкультивирования 3-4 дня. В организме. животного - мышь ВА В/С. обработанная пристаном (1,0 мл в/брюшинно эа 5-10 дней до инокуляции), доза...

Номер патента: 1721091

Опубликовано: 23.03.1992

Авторы: Вербицкий, Фидлер

МПК: C12P 21/08

Метки: антитела, гибридных, гонадотропного, гормона, животных, клеток, культивируемых, лютеинизирующего, мusсulus, моноклонального, продуцент, реагирующего, субъединицей, хорионического, человека, штамм

...агент - ПЭГ 1500 (50-ный раствор). Селекцию гибридных клеток проводят на среде НАТ, два клонированияметодом лимитирующего разведения (1клетка на 3 лунки), 100% позитивных клонов.Стандартные условия выращивания;среда ВРМ 11640 с 100 фетальной сыворотки крупного рогатого скота (гСЗ), газоваяфаза - воздух с 5 СО 2, Способ культивирования в пластиковых флаконах на 50-250мл, посевная доза 500000 клеток в 1 мл,кратность рассева 1:2, время культивирования 3-4 дня, В организме животного - мышьВА 1 В/С, обработанная пристаном (0,5 млв/брюшинно за 5-10 дней до инокуляции),доза инокуляции 3 - 8 млн клеток, время образования асцита 10-20 дней.Полученный штамм гибридных клетокмыши обозначен Ф 14, Штамм хранится вСпециализированной коллекции...

Номер патента: 1721092

Опубликовано: 23.03.1992

Авторы: Аксенова, Иванов, Игнатова, Ковалева, Кожухарова, Плескач, Фель, Фирулина

МПК: C12P 21/08

Метки: активность, антитела, гибридных, гликопротеиду, головного, естественных, животных, киллеров, клеток, культивируемых, мusсulus, миелина, мозга, моноклонального, продуцент, угнетающего, человека, штамм

...гибридомной среды с удвоенным количеством ГАТ. Клоны гибридомных клеток появлялись на 5-7-е сутки после слия ния в 50-70 лунок. В эти сроки начинают .замену среды ГАТ. Тестирование наличия в среде МонАт к МАГ проводили иммуноферментным.методом через 12-18 сут после слияния. Идентифицированные клетки-про дуценты клонируют на питающих слоях макрофагов, культивируют ин.витро или замораживают жидким азотом в смеси 900 эмбриональной сыворотки и 10 ОМНО.Получение асцитной формы гибридомы.25, Мышам линии Ва 1 Ь/с вводят внутрибрюшинно по 0;5 мл пристана, Через 8-10 дней этим мышам внутрибрюшинно вводят культуру гибридомных клеток в растворе 0,14 М МаС 1 на 0,2 М фосфатном буфере рН .30 7,2 по 1 х 10 клеток на мышь. Через 7-8 суту мышей...

Номер патента: 1723127

Опубликовано: 30.03.1992

Авторы: Булатов, Вербицкий, Григорьян, Осипова, Фидлер

МПК: C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, соматотропину, человека, штамм

...РСЗ+ 10 ОМНО, замомона в фосфатном буфере (ФБ). Через три раживэние в пенопластовой коробке при -дняпослереиммунизацииумышейстериль С. Жизнеспособность клеток послено берут селезенку и готовят суспензию 25 размораживания 70-90 (оценка жизнеспленоцитов. Гибридомы получают путем способности клеток по исключению трипаслияния спленоцитов с клетками мышиной нового синего после 24 ч культивирования).миеломы Х.63.А 9.653 с помощью 50 поли- Определение специфичности моноклоэтиленгликоля с М.м, 1500, Соотношение нальныхантител Ф 17,клеток селезенки и клеток миеломы 5:1. Се Моноклональные антитела против солекцию проводят на среде НАТ, выполняют матотропиначеловека получены путем выдва клонирования методом лимитирующих деления их из асцитической...

Номер патента: 1726511

Опубликовано: 15.04.1992

Авторы: Демчева, Носыркова, Савицкий, Чередникова

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антигенным, антител, гибридных, детерминантам, инсулина, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, общим, свиньи, человека, штамм

...клонируют вполужидком агаре, Клонирование гибридомы повторяли трижды, Клонированную гибридому 6 Е 66 2 А перевивают на мышах5 ВаЬ/с для получения асцитной жидкости,Полученный штамм гибридных клетокпродуцирующий моноклональные антителак общим антигенным детерминантам инсулина человека и свиньи, депонирован в спе 10 циализированой коллекции перевиваемыхсоматических клеток позвоночных Всесоюзной коллекции клеточных культур Институтацитологии АН СССР под М ВСКК (П) 420 Д ихарактеризуется следующими признаками,15 Культуральные свойства. Для выращивания штамма используют культуральныефлаконы. Во флакон с 3 мл среды ОМЕМ,содержащей 10 СПК, 3,5 мМ глютамина,17,5 мкМ пирувата натрия и 50 мМ 2-меркэп 20 тозтанола, засевают 250000 клеток...

Номер патента: 1726512

Опубликовано: 15.04.1992

Авторы: Василов, Втюрина, Литвинова

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, белку, гибридных, глиальному, используемый, кислому, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, фибриллярному, человека, штамм

...16 ч; затем срезы промывали (по 5 мин) в 3 сменах забуференного физиологического раствора, рН 7,3, а затем инкубировали с антисывороткой к иммуноглобулинам мыши, меченным ФИТЦ или пероксидазой. Результаты реакции учитывали в люминесцентном или световом микроскопе в зависимости от природы используемой метки, Для клонирования отбирали гибридомы, которые продуцируют МКА, взаимодействующие с глиальными клетками в виде четкого фибриллярного свечения и не дающие реакций с другими клеточно-тканевыми структурами.Клонирование отобранных гибридом. Культуры гибридом, в супернатантах которых обнаруживаются антитела к ГФКБ, не дающие перекрестных реакций с другими тканевыми антигенами человека, клонировали методом предельных разведений из...

Номер патента: 1742324

Опубликовано: 23.06.1992

Авторы: Булатов, Вайль, Василов, Втюрина, Мартынов, Осипова, Смирнова

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, высокоспецифичных, гибридных, гормону, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, тиреотропному, человека, штамм

...14 - 20 дн.Данные видовой принадлежности, мышиные клетки Ва в/с.Продукция М КА ста бил ьна на и ратяжении 25 пассажей в культуре и 5 пассажей на животных.Характеристика целевого продукта, Штамм гибридных клеток Тпродуцирует моноклональные антитела подкласса 01, высокоспецифичные к ТТГ человека. Специфичность оценивают иммунаферментным методом. УКА не реагируют с Л Г, ФСГ50 55 иммуноглобулинов мыши, коньюгированных с пероксидазой хрена, После трехкратного промывания планшетов фосфаты буфером с Твинв лунки добавляют 0,04 ф-ный раствор о-фенилендиамина в0,2 М фосфэтно-цитратном буфере (рН 5,0) с добавлением 0,012 перекиси водорода, После появления окраски реакцию в лунках останавливают раствором 2 М серной кислоты и проводят регистрацию...

Номер патента: 1744112

Опубликовано: 30.06.1992

Авторы: Мечетнер, Сахаров, Степанова

МПК: C12P 21/08

Метки: антитела, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклонального, продуцент, тюленя, фосфатазе, штамм, щелочной

...40 45 2 клонирования 1000 субклонов продуцируют антитела к щелочной фосфатазе тюленя, Продукция антитела сохраняется как минимум в течение 10 пассажей в культуре.Гибридомные клетки помещают в пластиковый флакон площадью 25 см по 5 х 10 в 5 мл среды ВРИс 100 эмбриональной телячьей сывороткой, 4 мМ глютамина, 10 мМ пирувата натрия, 40 мкг/мл гентамицина и культивируют 4 дня при 37 С в атмосфере, содержащей 5% С 02. Для получения асцитной опухоли 5 х 10 гибридомных клеток вводят в брюшную полость мышей ВА В/С, обработанных пристаном. Через 2 - 3 недели собирают асцитную жидкость и иммуноглобулины осаждают сульфатом натрия, Осадок растворят в 0,2 М боратном буфере (рН 8,1) с 0,15 М КаС и диализуют против того же буфера.Культуральную...

Номер патента: 1747484

Опубликовано: 15.07.1992

Авторы: Войтенок, Колесникова, Лях, Мисуно, Панютич, Петевка, Шидловская

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulusl, моноклональных, некроза, опухолей, рекомбинантному, фактору, человека, штамм

...После отмывания инкубируют с меченными пероксидазой к иммуноглобулинам мыши энтителами в разведении 1:2000 на ФСБ-БСА в течение 1 ч, Ферментную реакцию проводят в течение 10 мин. Раствор субстрата представляет собой 0,1 М цитратный буфер (рН 4,7) с 0,6 мг/млортофенилендиамина гидрохлорида и 0,01 % перекиси водорода. Реакцию останавливают через 10 мин 1 М серной кислотой и учитывают на спектрофотометре с вертикальным лучом при длине волны 492 нм,Результаты эксперимента по изучению специфичности связывания МКА, продуцируемого клетками штамма 10 ГИ, с антигенами, иммобилизированными на пластике, представлены в табл.1,Результаты исследований свидетельствуют о более высокой специфичности МКА, продуцируемых клетками штамма 1 ОРИ по...

Номер патента: 1756352

Опубликовано: 23.08.1992

Авторы: Зоделава, Самильчук, Сарсания, Хаджирисьян

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: альфа-1-антитрипсина, антигенной, антител, гибридных, детерминанте, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, обезьян, общей, человека, штамм

...же момента через день в каж- дой лунке меняют приблизительно половину средыКультивирование гибридных клеток в поисутствии ГАТ проводят в течение первых двух недель после слияния, затем еще 4 дня клетки культивируют в присутствии ГТ (без аминоптерина) и далее переводят на обычную среду без добавок. Отбор гибридсм, продуцирующих МКА требуемой специфичности, осуществляют с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА). В первом случае на твердой фазе адсорбируют ААТ человека, во втором - ААТ павиана гамадрила, Для реакции используют 96-луночные ИФА панели, в лунки которых вносят ААТ (2 мкг/мл, 100 мил на лунку), разведенный в 50 мМ карбонатном буфере, рН 9,5, Адсорбци;о ведут при 4 С в течение 16-18 ч, после чего панели трижды...

Номер патента: 1759872

Опубликовано: 07.09.1992

Авторы: Березкина, Завадская, Игнатова, Ковалева, Плескач, Синакевич

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, трансферрину, человека, штамм

...температуре. Затем промывают . водой и ФБР и добавляют в каждую лунку по 50 мкл конъюгата кроличьих антимышиных антител с пероксидазой хрена в разведении 1:500, Через 1 ч платы промывают водой и Ф БР и добавляют по 50 мкл субстрата (0,1 О(, ортофенилдиамин, 0,03Н 20 О, 0,2 М цитратный буфер, рН 4,5) в каждую лунку. По окончании ферментативной реакции расщепления Н 20 о в присутствии арто-фенилендиамина при наличии МКА развивается желтая окраска, которую регистрируют на спектрофотометре Мультискан при длине волны 450 нм. Связывание МКА с трансферрином человека обнаруживают при разведении супернатанта до 10Отсутствие взаимодействия полученных МКА с гемоглобином, альбумином и С- реактивным белком человека определяют следующим образом. В...

Номер патента: 1768635

Опубликовано: 15.10.1992

Авторы: Арэ, Галактионов, Гринчук, Корнилова, Соркин, Сорокин, Сорокина

МПК: C12N 5/20, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, рецептору, роста, фактора, человека, штамм, эпидермального

...культивируемых гибридныхклеток штамма й 10 сингенным мышам /линия ВА в/с/ вызывает у них образованиеасцитной опухали. В асцитной жидкости содержатся МонАТ к рецептору зпидермэльного фактора роста. Способность кпродуцированию МонАТ стабильно сохраняется, по крайней мере, 16 пассажей вкультуре и 3 пассажа при перевивках нэмышах /срок наблюдения/,Кариологическая характеристика,В клетках с модальным числом хромосом /95-94 хромосом у 42% всех клеток/при рутинном окрашивании, кэк правило, присутствуют 4 хромосомы, меньшие по размеру, чем 19 хромосома, мыши и не менее 2 маркерных хромосом больших, чем 1-я хромосома стандартного набора, Обнаружены также 2 метацентрических маркера, отличающихся по размеру,Продуктивность штамма.При...

Номер патента: 1778183

Опубликовано: 30.11.1992

Авторы: Бауер, Беккерт, Белова, Оглоблина, Смирнов

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, ингибитору, используемый, кислотостабильному, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, мочи, трипсина, человека, штамм

...разведений антител М 2 с концентрац ией от 2700 до 0,325 нг в 1 мл буфера Б и инкубируют 1 ч при комнат ной температуре. После этого панель отмывают три раза направленной струей водопроводной .воды и для проявления связавшихся в лунках МКА вносят в ячейки по 100 мкл раствора коньюгата 25 пероксидазы хрена с антителами кролика к иммуноглобулинам мыши, разведенного в 1000 раз буфером Б, и инкубируют в течение 1 ч при комнатной температуре, После трехкратного отмывания водой для определения связавшейся в лунках пероксидазы в лунки вносят по 100 мкл субстратной смеси (100 мкл раствора о-фенилдиамина 1 мг/мл в 1 О мл 0,02 М раствоое цитрата натрия, рН 4,5, с 10 мкл 303- ного раствора НО) и инкубируют при комнатной температуре до развития...

Номер патента: 1778184

Опубликовано: 30.11.1992

Авторы: Аркина, Кускова, Лимарева, Менявцева, Мирютова, Ратнер

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, иммуноглобулинов, используемый, клеток, кролика, культивируемых, легким, мusсulus, моноклональных, цепям, штамм

...препаратом иммунохимицес.ки чистых легких цепей иммуноглобули"нов кролика, режим активации: концентрация белка - 40 мнг/мл, наслаивающий буферный раствор - карбонатбикарбонатный буфер рН 9,6, время инкубации - 18 ч при 4 С. После отмывания планшетов от несвязавшегося белка (6 раз поочередно водопроводнойводой и дистиллированной водой с0,053 твина) в лунки вносят исследуемые пробы культуральной жидкостис продуктами жизнедеятельности гибридного клона Я 5, а также положительный (сыворотка мышей, иммунизированных легкими цепями иммуноглобули нов кролика) и отрицательный (культуральная жидкость, не содержащаяпродуктов жизнедеятельности гибридом)контроли (К+ и К- соответственно).Проволят инкубацию в течениео37 С, спмывают...

Номер патента: 1791453

Опубликовано: 30.01.1993

Авторы: Белкина, Дерюгина, Лапенков, Недорезов, Носырев, Оловникова, Удалов, Чекнева, Чертков

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, мембраносвязанной, моноклональных, н-антигена, растворимой, формам, человека, штамм

...свойства.Среда культивирования: ДМЕМ с добавлением 3 мм . глутамина, 1 мМ пируватанатрия, 20 мМ Хепес - буфера, 5 х 10М 2 - меркаптоэтанола, 10 ЭТС илиоленьей сыворотки и антибиотиков, Частотапассирования 1:2 - 1:3 через 2-3 сут. плотностьклеток вжидкойсреде 3-4 х 10 кл/мл.6Клетки выращивают при 37 С, 6-ном содержании СО 2 в воздухе и 95 - 100-нойвлажности. При культивировании 1 п чиччоМышам линии ВА 1 В/с внутрибрюшинно за7-30 сут. до введения гибридных клетоквводят пристан (0,25 мл), Гибридные клеткиинъецируют в количестве 2-3 х 10 /мышь,6асцитные опухоли образуются через 12-16сут,Морфологические признаки.Слабоприкрепленные к субстрату клетки с обычной для гибридом морфологией, 20 среда: 25 30 35 40 ного донора 50 55 5 10 15...

Номер патента: 1808872

Опубликовано: 15.04.1993

Авторы: Белова, Винтер, Котляр, Махмутова, Хамаде, Шапиро

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, днказе, зависимой, используемый, клеток, крыс, культивируемых, мusсulus, моноклональных, печени, хроматина, штамм

...среды и осаждают, ресуспендируют в 5 мл той же среды и переносятв культуральный флакон. Выживамость после размораживания более составляет более 30%.30 Контаминация,Бактерии и грибы в культуре не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на питательные среды.Характеристика полезного продукта,Моноклональные антитела связывают2+Мп -зависимую ДНКазу, при этом они способны ингибировать нуклеазную активность данного фермента. Титр МКА вкультуральной жидкости, определенный с40 помощью ИФА, составляет 1:8, в асцитнойжидкости - 1.10,5П р и м е р 1, Для определения специфического взаимодействия моноклональ 2+ных антител с Мп -зависимой ДНКазойпроводят определение нуклеэзной активно 2+сти Мп -зависимой ДНКазы в присутствииантител,...

Номер патента: 1831500

Опубликовано: 30.07.1993

Авторы: Джеймс, Ричард, Родни, Томас

МПК: A61K 39/395, C12P 21/08

Метки: антител, гетерогенности, моноклональных, секретированных, снижения

...получают из АТСС (Американской коллекции типов культуры) 12301 Парклоун драйв, Роквил, Мэриленд 20852, Гибридома СЕМ 231.6.7 является частью коллекций штаммов ТСС и доступна специалистам как источник и вместилище штаммов антитела под номером АТСС НВ 9620, Замороженные клетки быстро размораживают, затем сразу промывают 10 мл среды НО, дополненной 4.мМ 45 50 55 путамина, Среда НО поставляется фирмой Вентрекс иэ Портланда, гр,Мзйн. Клетки подополнительные аминокислоты в обеих тяжелых цепях.5Настоящее изобретение включает способ специального отщепления дополни. тельной аминокислоты от тяжелых цепей гетерогенных антител, тем самым превращая все три формы в одну, по существу, 10 чистую, гомогенную смесь. Разработка и применение технологии...

Номер патента: 2002803

Опубликовано: 15.11.1993

Авторы: Ефетов, Князева, Тэтин

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: musculus, антител, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, моноклональных, человека, штамм

...полость мышей БАВ/с, которым предварительно (за 7 - 10 сут) внутрибрюшинной иньецируют пристан. Время образования асцита 10-14 дней,Характеристика полезного продукта, МКА, продуцируемые штаммом А 5 В 8, относятся к 1 д 61 подклассу, специфически взаимодействуют с 1 ц 61, 1963, 1 ц 64 человека и их ЕаЬ- и Рс-фрагментами. Принадлежность к подклассу 1 ц 6 определяют при помощи преципитирующих сывороток против 1 ц 6 мыши разных подклассов (5 цва, США) методом радиальной иммунодиффузии по Оухтерлони. Взаимодействие антител с 1 д 61, 3, 4 человека определяют методом иммуноферментного анализа.Продуктивность штамма, стабильность антител,Концентрация МКА через 3 - 4 дня культивирования "ин витро" составляет 5 - 10мкг/мл, в асцитной жидкости 5...

Номер патента: 2003679

Опубликовано: 30.11.1993

Авторы: Ефетов, Князева, Троицкий, Тэтин

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: musculus, антител, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, моноклональных, человека, штамм

...мл. Посевная доза 5 10 клеток на:1 мл. Кратность рассева 1:5, время субкультивирования 3-4 дня. Среда для культивирования - КРМИ 640 с добавлением 10фетальной бычьей сыворотки, 2 мМ глутамиЗО на, 2 мМ пирувата, по 100 ед./мл пенициллина и стрептомицина, 8 первые 3 неделилпосле гибридизации в среру добавляют 10М гипоксантина, 4 10 аминоптерина и1,6 10 5 М тимитидина, так как клетки ми 35 еломы Яр 2/О Ад 14 дефектны по ферментугипоксантингуанинфосфорибозилтрансферазе. Клетки выращивают а атмосфере 56С 02 при 37 ОС.Культивирование в организме животно 40 го. Для выращивания гибридомы а асцитнойформе клетки (10 ) вводят в брюшную полость мышей ВА В/с, которым предварительно (эа 7-10 сут) внутрибрюшинно. иньецируют пристан. Время...

Номер патента: 2003680

Опубликовано: 30.11.1993

Авторы: Ефетов, Князева, Троицкий, Тэтин

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: musculus, антител, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, моноклональных, преципитирующих, человека, штамм

...бычьей сыворотки, 2 мМ глутамина, 2 мМ пирувата, по 100 ед/мл пенициллина и стрептомицина, В первые 3 недели после гибридизации в сзеду добавляют 10М гипоксантина,4 10 М аминоптерина и 1,6 10 М тимидина, так как клетки мие-. ломы Яр 2/О Ад 14 дефектны по ферменту гипоксантингуанинфосфорибозилтрансферазе, Клетки выращивают в атмосфере 5 С 02 при 37 С.Культивирование в организме животного. Для выращивания гибридомы в асцитной форме клетки (10 ) вводят в брюшную полость мышей ВА В/с, которым предварительно (за 7-10 сут,) внутрибрюшинно иньецируют пристан. Время образования асцита 10-14 дней.Характеристика полезного продукта, МКА, продуцируемые штаммом В 2, относятся к 962 Ь, специфически связывают дМ и (Ес)5 р -фрагменты 9 М человека и...

Номер патента: 2003681

Опубликовано: 30.11.1993

Авторы: Ефетов, Князева, Троицкий, Тэтин

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: musculus, антител, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, моноклональных, цепям, человека, штамм

...в течение 30 пассажей в культуре и 25 пассажей на животных.Способ криоконсервирования. Для длительного хранения клетки штамма замора живают в фетальной бычьей сыворотке сдобавлением 10 одиметилсульфоксида. Режим замораживания: сутки при -70 С, затем ампулы с клетками переносят в жидкий азот.Размораживают клетки. перенося ампулу из 45 жидкого азота в водяную баню на 37 С.Жизнеспособность клеток после размораживания составляет 70-80(по окрашиванию трипановым синим).Контроль контаминации. Бактерии игрибы в культуре не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на питательные среды. Заражение микроплазмой не обнаружено при окрашивании красителями на ДНК.55 П р и м е р 1, Гибридомные клетки помещают в пластиковый флакон площадью 25 см в 5...

Номер патента: 2003683

Опубликовано: 30.11.1993

Авторы: Ефетов, Князева, Тэтин

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: apis, mellifera, musculus, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мелиттину, моноклональных, продуцент, пчелы, штамм, яда

...сывороткой, 2 мМ глутамина, 2 мМ пирувата, по 100 ед/мп пенициллина и стрептомицина, Посевная доза - 10 клеток5в 1 мл. Через 2-3 дня концентрация антител в культуральной жидкости достигала примерно 40 мкг/мл.Контаминации бактериями, грибками имикроплазмами не обнаружено.Дпя длительного хранения гибридомные клетки могут быть заморожены в фетальной бычьей сыворотке с добавлением 10% диметилсульфоксида. Способ криоконсервирования - 1 сут, при -70 С, затем клетки переносятся в жидкий азот.Размораживают клетки, перенося ампулу из жидкого азота в водяную баню на 37 С, 40 Для выращивания гибридомы в асцитной форме клетки водили в брюшную полость мышей ВАВ/с (предварительно обработанных пристаном) в количестве 107 клеток на мышь. Опухоли...

Номер патента: 2003685

Опубликовано: 30.11.1993

Авторы: Ефетов, Князева, Троицкий, Тэтин

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: musculus, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...- 10 клеток в 1 мл. Через 2-3 дня концент 5рация антител в культуральной жидкости достигала примерно 40 мкг/мл.Контаминации бактериями, грибками имикроплазмами не обнаружено.25 Для длительного хранения гибридомные клетки могут быть заморожены в фетальной сыворотке с добавлением 110диметилсульфоксида. Способ криоконсервирования - 1 сут, при -70 С, затем клетки30 переносятся в жидкий азот. Размораживают клетки, перенося ампулу из жидкого азота в водяную баню на 37 С.Для выращивания гибридомы в асцитной форме клетки вводили в брюшную по 35 лость мышей ВА 1.В/с, предварительнотобработанных пристаном, в количестве 10клеток на мышь. Опухолиразвивались у мышей через 10-14 дней. Секреция антителклетками гибридомы, выращиваемыми в ас 40...