Миериня

Номер патента: 1311253

Опубликовано: 10.03.1995

Авторы: Баев, Бурьянов, Зеидака, Косых, Миериня, Шпрунка

МПК: C12N 9/16

Метки: метилазы

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МЕТИЛАЗЫ E CO R11, предусматривающий культивирование продуцента Escherichia coli, инкубацию и дезинтеграцию клеток ультразвуком, получение бесклеточного экстракта, осаждение фермента сульфатом аммония, хроматографию на диэтиламиноэтилцеллюлозе и фосфоцеллюлозе и последующее концентрирование, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода и удельной активности фермента, в качестве продуцента используют штамм Escherichia coli суспензию клеток инкубируют в присутствии лизоцима, фермент осаждают полиэтиленимином, который добавляют к бесклеточному экстакту до концентрации 0,3 - 0,4% с последующей элюацией метилазы из осадка 0,4 - 0,5 М хлористым калием,...

Номер патента: 1262952

Опубликовано: 30.05.1994

Авторы: Ансберга, Баев, Бурьянов, Зилбере, Косых, Миериня, Филипченкова

МПК: C12N 9/22

Метки: рестрикции-модификации, системы, ферментов

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФЕРМЕНТОВ СИСТЕМЫ РЕСТРИКЦИИ-МОДИФИКАЦИИEco R 11 из бесклеточного экстракта штамма Escherichiacoli B 834 ( rв- , mв- ) /pSK 323, включающий получение биомассы, обработку клеток дезинтегрирующей смесью, содержащей фосфат калия, этилендиаминтетрауксусную кислоту, меркаптоэтанол и лизоцим, отделение экстракта, осаждение фермента полиэтиленимином, экстракцию фермента раствором хлористого калия или хлористого натрия, осаждение из экстракта сульфатом аммония, диализ, хроматографию диализата на диэтиламиноэтилцеллюлозе, ипользуя для элюции раствор с градиентом концентрацией хлористого калия или хлористого натрия, последующую хроматографию на фосфоцеллюлозе в градиенте концентрации того...

Номер патента: 1161550

Опубликовано: 15.06.1985

Авторы: Зейдака, Миериня, Неймане, Орна, Полякова, Тарасевич, Шпрунка

МПК: C12N 9/22

Метки: нуклеазы

...на ДЭ-целлюлозы концентрировани ем на ультрафильтрах и диализом против глицерина, а также исключение хроматографии на сульфо-сефадексе , позволяет сократить число стадий с 16 до 14. В результате получают пре- ЗО парат с удельной активностью 20,000- 70.0 дО ед/мг белка, выход 173, практически не содержащий примеси нееспецифических фосфатаз, Фосфодиэстераз и экзонуклеаз. П р и м е р 1. 160 г амилоризина экстрагируют 1,6 л 0,02 М буфера ацетата натрия, содержащим 0;05 М ЮаС 1 и 0,1 мМ Е и+ . Осадок отделяют центрифугированием. Экстракт подвер б гают термообработке, постепенно повышая температуру раствора до 70 С в водяной бане с температурой 75 ОС. К раствору добавляют сульфат аммония до насыщения 0,7 (800 г),перемеши вают и осадок...

Номер патента: 998502

Опубликовано: 23.02.1983

Авторы: Вина, Зейдака, Миериня, Орна

МПК: C12N 9/22

Метки: нуклеазы

...18125 ед/мг белка, выход.30, степень очистки 10000 раз Г 2 . 10Однако известный способ имеет сравнительно низкое качество полученного препарата (имеются примеси рибонуклеаз Т и Т 2 , фосфодиэстераз, ферментов, расщепляющих нативную дезоксири бонуклеиновую,кислоту). Сложность процесса -.повторная очистка препарата .гельхроматографией на сефадексе 6-75.Целью изобретения является повышение активности и качества нуклеазы 20 5 (под повышением качества понимают отсутствие примесей сопутствующих Ферментов).Поставленная цель достигается способом получения нуклеазы 51 на осно ве продуцента Азрес 9111 цз огугае, включающим фракционированное осаждение белков сульфатом аммония и выделение нуклеазыхроматографией на диэтиламиноэтил-целлюлозе, причем З...

Номер патента: 942759

Опубликовано: 15.07.1982

Авторы: Аавиксаар, Вина, Зариня, Миериня, Сийгур, Тара

МПК: A61K 35/58

Метки: фосфодиэстеразы

...фосфодиэстеразу, объединяют (11 пик выход 170 мл)и высушивают лиофильно.Выход лиофилизированного препарата31 мг; степень очистки 30 раз; примесьэндонуклеазы отсутствует; активностьфосфодиэстеразы 0,39 ед/мг препарата;примеси 5-нуклеотидазы 2,6 .10 ед/мгпримеси неспецифической Фосфомоноэстеразы 2,910 5 ед/мг препарата; содержание белка 793.25 П р и м е р 2. К 5,0 г яда гюрзы добавляют 50 мл раствора уксуснокислого аммония с удельной электропроводностью 16,010Б см , смесьмедленно перемешивают в течение 4 ч,зО Растворенный яд центрифугируют при5000 об/мин в течение 30 мин при 4 ОС.Осадок выбрасывают, надосадочную жидкость используют для гельфильтрации,На уравновешенную раствором уксуснокислого аммония (удельная электропроводность 15,9-10 з...