Патенты с меткой «мusсulus»

Номер патента: 1705343

Опубликовано: 15.01.1992

Авторы: Бердова, Ветрова, Сидоренко, Шлапацкая

МПК: C12N 5/18

Метки: антигену, антител, гибридных, дифференцировочному, животных, клеток, культивируемых, лимфоцитов, мusсulus, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...в среде РРМ 1-1640 ("ОЬсо", Великобритания)с 10 6 инактивированной прогреванием при раэтилпентадеквна или вазелинового масла, Клетки инъецируют внутрибрюшинно по 10 клеток в 5 мл среды Игла, Асцит формибруется через 12-14 дней в количестве 4 5 млБиосинтез полезного продукта, Секреция Мон-АТ, обозначаемого ИПО, на 3-4 день культивирования составляет 10-15 мкг в 1 мл культуральной среды и 5-10 мг в 1 мл асцитической жидкости. Продукция Мон-АТ сохраняется как минимум до 45 пассажей и ч 1 го и до 4-х пассажей в асцитной форме,Криоконсервирование, Для длительного хранения клеток штамма клетки замораживают в эмбриональной телячьей сыворотке с добавлением 10 ДМСО, Режим замораживания: 4/мин до+4 С, затем 1/мин до - 70 С, После замораживания...

Номер патента: 1710576

Опубликовано: 07.02.1992

Авторы: Ионов, Юрин

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, инсулину, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...жидкости 30 мкг/мп, в асцитной жидкости 12 мг/мл. Стабильностьпродуцирования антител сохраняется напротяжении 20 пассажей в культуре и 7пассажей на животных, если гибридомаперевивается.Контаминация. Бактерии и грибы. в культурах не обнаружены при длительном наблюдении ипосевах на питательные среды. Заражение микоплазмой не выявлено при окрашивании красителями на ДНК и тимидиновом промечиванин культуральной среды.Консервация клеток.Клетки штаммов замораживают после2 и 3 клонирования на 10 .и 15 пассажахв культуре и после роста в внде.асцитной опухоли в мышах. Криозащитная среда 50% ростовой среды, 40% эмбриональной телячьей сыворотки и 10% диметилсульфокеида,Режим замораживания: клетки в кри-озащитной среде помещают на сутки...

Номер патента: 1710577

Опубликовано: 07.02.1992

Авторы: Ионов, Юрин

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, инсулину, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...на мышах, Титр антител в культуральной жидкости составляет 1:128 а в асцитической1:100000.Продуктивность.Концентрация антител, продуцируемых5 штаммом 04 В 8, составляет в культурапьнойжидкости 50 мкг/мл, е асцитной жидкости20 мг/мл, Стабильность продуцированияантител сохраняется на протяжении 20 пассажей в культуре и 7 мпассажей на живо 10 тных, если гибридома перевивается.Контаминация.Бактерии и грибы в культурах не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на питательные среды. Заражение15 микроплазмой не выявлено при окрашивании красителями на ДНК и тимидиновомпромечивании культуральной среды.Консервация клеток.Клетки штаммов замораживают после 220 и 3-го клонирования на 10 и 15 пассажах екультуре и после роста в виде...

Номер патента: 1712410

Опубликовано: 15.02.1992

Автор: Злобина

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антигену, антитела, гибридных, железы, клеток, культивируемых, мusсulus, мол, моноклонального, поджелудочной, продуцент, штамм

...Режим замораживания; 1 градус в мин, до -70 С, далее клетки переносят в жидкий азот, Рэзмораживают гибридому при переносе ампулы с клетками изжидкого азота в водяную баню при 37 СЖизнеспособность клеток после хранения в жидком азоте около года не ниже 70%, судя по включению красителя эозина и трипа нового.синего,Использование. штамма иллюстрируется следующими примерами.П р и м е р 1. Гибридому высевают при плотности 5 10 клеток/мл в пластиковый5флакон с минимальной средой Игла, модифицированной Дульбекко, содержащей 10 эмбриональной телячьей сыворотки, 2 пМ 1:глютамина, 100 ед/мл гентамицина и 5 10 М 2-меркаптоэтанола, Клетки культи 20 вируют 3 - 4 дня при 37 ОС в атмосфере с 5% С 02, Далее культуральную жидкость соби-. рают,...

Номер патента: 1712411

Опубликовано: 15.02.1992

Авторы: Воеводин, Зоделава, Клоц, Талло

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, иммуноглобулину, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, павианов, продуцент, штамм

...и вирусами:контаминации бактериями, грибами и микроплазмы нет.Один из родительских клеток продуцируют эндогенный ретровирус С-типа мышей;11, Характеристика полезного вещества, продуцируемого штаммом; мон-АТ дО -класса, направленные к классоспецифической детерминанте тяжелых цепей, дО павианов: специфичность оцениваласьиммуноферментным методом и вестернблотин гом.12, Концентрация полезного продухта (моноклональных антител) в среде около 10 мкг/мл, в асцитной жидкости около 10 мг/мл;Титры данных антител при определении с помощью твердоазного иммуноферментного метода около 2 х 10 (среда/ и 2 х 10-6/асцит при концентрации антитенэ 1 мкг/мл.Определение антител можно проводить также иммунофлюоресцентными и радиоимму нологическими методами....

Номер патента: 1712412

Опубликовано: 15.02.1992

Авторы: Панютич, Петевка, Фомин

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антитела, гибридных, еsснеviнiа, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклонального, пирофосфатазе, продуцент, штамм

...пирофосфат, 30 - ,50 мкМ в 0,05 М Трис-НС циллина и стрептомицина, 0,05 мМ меркап буфере, рН 9,0, 0,5 мМ МдС 2 и инкубируют тоэтанола. Клетки культивируют при 37 С в 20 мин при 37 С, Окрашивание лунок учитыатмосфере 5% С 02. Посевная доза 2 10 вают после добавления раствора, содержа- клеток в мл, щего молибдат аммония и малахитовыйДля выращивания гибридомного Штам- зеленый на спектрофотометре при длине ма в асцитной форме пригодны мыши 30 волны 620 нм.ВаЬ/с. Мышам за 7 - 30 дней до инъекции Результаты опыта по определению клеток штамма вводят внутрибрюшинно по специфичности связывания МКА, продуци,5 мл пристана. Клетки инъецируют внутри-руемого клетками штамма РГВ с пирофосбрюшинно по 2 - 5 миллионов в 0,5 мл среды . фатазой Е.со,...

Номер патента: 1717147

Опубликовано: 07.03.1992

Авторы: Белкина, Дерюгина, Леменева, Оловникова, Проскурина, Удалов, Чертков

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антигену, антитела, гибридных, группоспецифическому, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональные, продуцирующий, системы, человека, штамм, эритроцитов

...5 к 1 0 М 2-меркаптоэтанола, 5 О/-ной среды, кондиционированной спленоцитами мыши, антибиотики; 37 С, 6 СО в воздухе.г время роста гибридомы в форме асцитной опухоли 12 сут.Морфология клеток: штамм представ.лен слабо прикрепляющимися к субстрату клетками с обычной для антителопродуцирующих клеток морфологией.Видовая принадлежность штамма; доказана цитогенетическим методом, Кариотип соответствует виду Мцэ птцзсацз. Число хромосом составляет 83-92, генетические маркеры - 1 метацентрическая и 1 большая субметацентрическая хромосомы. Сведения о контаминации линии: контаминация бактериями, грибами, микоплазмами не обнаружена, вирусы не тестированы.Характеристика полезного вещества, продуцируемого штаммом:.анти-Й антитела,...

Номер патента: 1721089

Опубликовано: 23.03.1992

Авторы: Дамбинова, Калантаров, Орлова, Трахт

МПК: C12P 21/08

Метки: антитела, гибридных, глутаматным, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, мозга, моноклонального, продуцент, рецепторам, человека, штамм

...5. Моноклональное антитело, продуцируемое штаммом А-НОЯС 5, относится кизотипу 1 дО, подкласс О 1 и связывает надмембранный участок глутаматных рецепторов мозга человека. Специфичность взаимодействия антител с нейрорецепторами-глутамата выяв ляют с помощью иммуноферментного и иммуногистохимического анализов.Для получения препарата моноклональных антител в количестве. необходимом для проведения иммунохимических исследований, гибридные клетки помещают в пластиковый флакон площадью 25 см по 5 х 102 5 клеток в 5 мл среды ВРМ 1 1640 с 10эмбриональной телячьей сыворотки, 100 лошадиной сыворотки, 4 мМ глутамина, 10 мМ 510 пирувата йа, 100 мкг/мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина и 0,05 мМ меркаптоэтанола, Клетки культивируют 3 - 4 дн при...

Номер патента: 1721090

Опубликовано: 23.03.1992

Авторы: Вербицкий, Фидлер

МПК: C12P 21/08

Метки: антитела, гибридных, животных, клеток, культивируемых, лгч, лощади, мusсulus, моноклонального, продуцент, реагирующего, субъединицей, ттгч, хгч, штамм

...удаляют селезенку и готовят суспензию спленоцищв, Клетки селезенки сливают (гибридизуют ") с клетками. мышиной миеломы Х 63 А 9 8.653. Сливающий агент - ПЭГ(50-ный раствор). Селекцию проводят на среде НАТ, два клонирования методом лимитирующего разведения (1 клетка на 3 лунки), 100% позитивных клонов.;Стандартные условия выращивания: среда. ВРМ1640 с 10% фетальной сыворотки крупного рогатого скота (РСЯ), температура при культивировании 37 ОС, газовая фаза - воздух с 5;4 С 02.Способ культивирования в пластиковых флаконах на 50-250 мл, посевная доза 500000 клеток/мл, кратность рассева 1:2, время субкультивирования 3-4 дня. В организме. животного - мышь ВА В/С. обработанная пристаном (1,0 мл в/брюшинно эа 5-10 дней до инокуляции), доза...

Номер патента: 1721091

Опубликовано: 23.03.1992

Авторы: Вербицкий, Фидлер

МПК: C12P 21/08

Метки: антитела, гибридных, гонадотропного, гормона, животных, клеток, культивируемых, лютеинизирующего, мusсulus, моноклонального, продуцент, реагирующего, субъединицей, хорионического, человека, штамм

...агент - ПЭГ 1500 (50-ный раствор). Селекцию гибридных клеток проводят на среде НАТ, два клонированияметодом лимитирующего разведения (1клетка на 3 лунки), 100% позитивных клонов.Стандартные условия выращивания;среда ВРМ 11640 с 100 фетальной сыворотки крупного рогатого скота (гСЗ), газоваяфаза - воздух с 5 СО 2, Способ культивирования в пластиковых флаконах на 50-250мл, посевная доза 500000 клеток в 1 мл,кратность рассева 1:2, время культивирования 3-4 дня, В организме животного - мышьВА 1 В/С, обработанная пристаном (0,5 млв/брюшинно за 5-10 дней до инокуляции),доза инокуляции 3 - 8 млн клеток, время образования асцита 10-20 дней.Полученный штамм гибридных клетокмыши обозначен Ф 14, Штамм хранится вСпециализированной коллекции...

Номер патента: 1721092

Опубликовано: 23.03.1992

Авторы: Аксенова, Иванов, Игнатова, Ковалева, Кожухарова, Плескач, Фель, Фирулина

МПК: C12P 21/08

Метки: активность, антитела, гибридных, гликопротеиду, головного, естественных, животных, киллеров, клеток, культивируемых, мusсulus, миелина, мозга, моноклонального, продуцент, угнетающего, человека, штамм

...гибридомной среды с удвоенным количеством ГАТ. Клоны гибридомных клеток появлялись на 5-7-е сутки после слия ния в 50-70 лунок. В эти сроки начинают .замену среды ГАТ. Тестирование наличия в среде МонАт к МАГ проводили иммуноферментным.методом через 12-18 сут после слияния. Идентифицированные клетки-про дуценты клонируют на питающих слоях макрофагов, культивируют ин.витро или замораживают жидким азотом в смеси 900 эмбриональной сыворотки и 10 ОМНО.Получение асцитной формы гибридомы.25, Мышам линии Ва 1 Ь/с вводят внутрибрюшинно по 0;5 мл пристана, Через 8-10 дней этим мышам внутрибрюшинно вводят культуру гибридомных клеток в растворе 0,14 М МаС 1 на 0,2 М фосфатном буфере рН .30 7,2 по 1 х 10 клеток на мышь. Через 7-8 суту мышей...

Номер патента: 1723127

Опубликовано: 30.03.1992

Авторы: Булатов, Вербицкий, Григорьян, Осипова, Фидлер

МПК: C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, соматотропину, человека, штамм

...РСЗ+ 10 ОМНО, замомона в фосфатном буфере (ФБ). Через три раживэние в пенопластовой коробке при -дняпослереиммунизацииумышейстериль С. Жизнеспособность клеток послено берут селезенку и готовят суспензию 25 размораживания 70-90 (оценка жизнеспленоцитов. Гибридомы получают путем способности клеток по исключению трипаслияния спленоцитов с клетками мышиной нового синего после 24 ч культивирования).миеломы Х.63.А 9.653 с помощью 50 поли- Определение специфичности моноклоэтиленгликоля с М.м, 1500, Соотношение нальныхантител Ф 17,клеток селезенки и клеток миеломы 5:1. Се Моноклональные антитела против солекцию проводят на среде НАТ, выполняют матотропиначеловека получены путем выдва клонирования методом лимитирующих деления их из асцитической...

Номер патента: 1726511

Опубликовано: 15.04.1992

Авторы: Демчева, Носыркова, Савицкий, Чередникова

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антигенным, антител, гибридных, детерминантам, инсулина, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, общим, свиньи, человека, штамм

...клонируют вполужидком агаре, Клонирование гибридомы повторяли трижды, Клонированную гибридому 6 Е 66 2 А перевивают на мышах5 ВаЬ/с для получения асцитной жидкости,Полученный штамм гибридных клетокпродуцирующий моноклональные антителак общим антигенным детерминантам инсулина человека и свиньи, депонирован в спе 10 циализированой коллекции перевиваемыхсоматических клеток позвоночных Всесоюзной коллекции клеточных культур Институтацитологии АН СССР под М ВСКК (П) 420 Д ихарактеризуется следующими признаками,15 Культуральные свойства. Для выращивания штамма используют культуральныефлаконы. Во флакон с 3 мл среды ОМЕМ,содержащей 10 СПК, 3,5 мМ глютамина,17,5 мкМ пирувата натрия и 50 мМ 2-меркэп 20 тозтанола, засевают 250000 клеток...

Номер патента: 1726512

Опубликовано: 15.04.1992

Авторы: Василов, Втюрина, Литвинова

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, белку, гибридных, глиальному, используемый, кислому, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, фибриллярному, человека, штамм

...16 ч; затем срезы промывали (по 5 мин) в 3 сменах забуференного физиологического раствора, рН 7,3, а затем инкубировали с антисывороткой к иммуноглобулинам мыши, меченным ФИТЦ или пероксидазой. Результаты реакции учитывали в люминесцентном или световом микроскопе в зависимости от природы используемой метки, Для клонирования отбирали гибридомы, которые продуцируют МКА, взаимодействующие с глиальными клетками в виде четкого фибриллярного свечения и не дающие реакций с другими клеточно-тканевыми структурами.Клонирование отобранных гибридом. Культуры гибридом, в супернатантах которых обнаруживаются антитела к ГФКБ, не дающие перекрестных реакций с другими тканевыми антигенами человека, клонировали методом предельных разведений из...

Номер патента: 1740415

Опубликовано: 15.06.1992

Авторы: Кулаков, Разина, Титова, Храпова

МПК: C12N 5/00

Метки: антигену, антител, близкородственным, возбудителем, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, рsеudомаllеi, рsеudомоnаs, реагирующих, сапа, штамм

...антител к видоспецифическому антигену Р.рзецбоааИе 1,Моноклональные антитела получаютлибо из культуральной жидкости (при культивировании "ин витро"), либо из асцитической жидкости (при культивировании гибридом "ин вива"). Для демонстрации их избирательной (в отношении возбудителя мелиоидоза) специфичности используют метод иммуноферментного анализа, прямой и непрямой иммунофлюоресценции,Иммуноферментный анализ.В качестве антигена на твердой фазе для сравнительного анализа в ИФА используют водно-солевые экстракты из взвесей инактивированных бактерий (двухсуточные культуры либо Р,щаИе либо Р.рзецбощаИе 1, типичных штаммов, обладающих полным набором антигенов, присущих каждому виду), подвергнутых обработке ультразвуком и осветлению...

Номер патента: 1742324

Опубликовано: 23.06.1992

Авторы: Булатов, Вайль, Василов, Втюрина, Мартынов, Осипова, Смирнова

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, высокоспецифичных, гибридных, гормону, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, тиреотропному, человека, штамм

...14 - 20 дн.Данные видовой принадлежности, мышиные клетки Ва в/с.Продукция М КА ста бил ьна на и ратяжении 25 пассажей в культуре и 5 пассажей на животных.Характеристика целевого продукта, Штамм гибридных клеток Тпродуцирует моноклональные антитела подкласса 01, высокоспецифичные к ТТГ человека. Специфичность оценивают иммунаферментным методом. УКА не реагируют с Л Г, ФСГ50 55 иммуноглобулинов мыши, коньюгированных с пероксидазой хрена, После трехкратного промывания планшетов фосфаты буфером с Твинв лунки добавляют 0,04 ф-ный раствор о-фенилендиамина в0,2 М фосфэтно-цитратном буфере (рН 5,0) с добавлением 0,012 перекиси водорода, После появления окраски реакцию в лунках останавливают раствором 2 М серной кислоты и проводят регистрацию...

Номер патента: 1742325

Опубликовано: 23.06.1992

Авторы: Кириллова, Лесных, Мареев, Славянская

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, биотипа, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, холерному, штамм, эльтор, энтеротоксину

...иммуноферментном анализе (ИФА) и реакции преципитации (РП) по Оухтерлонии с ХТ 1310, понейтрализации специфического действияХТ 1310 в тесте кожной проницаемости поКрейгу и нейтрализации цитотоксическогодействия ХТ на овариальные клетки китайского хомячка (СНО), Класс иммунаглобулинов определяют в РП по Оухтерлони или вИФА с "НЬчЫогпа э 0 Ьзотурпц КИ, пзооэе,СаЬ 3 осЬегп" (США).Титр МКА в культуральной жидкости1/265-1/512 (ИФА); в асцитической жидкости 1/51200. (И ФА), 1/16 - 1/32 (РП); нейт-.рализации ХТ 1310 в пробе по Крейгу1/2000; нейтрализации ХТ 1310 на клеткахСН О 1/320 - 1/640,Стабил ьность п родукции антител сохраняется на протяжении пассажей в культуре и пассажей на животных в течение 18мес (срок...

Номер патента: 1742326

Опубликовано: 23.06.1992

Авторы: Андросова, Владимирский, Ильиных, Погуляева, Трахт, Ходун, Шипина

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, воvis, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, мyсовастеriuм, моноклональных, продуцент, штамм

...КРМ 1-1 640 с 20 телячьей эмбриональной сыворотки, 4 мМ-глутимина, 10 мМ пирувата натрия, аминокислотами для базальной среды Игла, витаминами для среды Игла, 0,05 мМ меркаптоэтанола и в атмосфере 5 углекислоты.Для выращивания штамма использу-. ют пластиковую посуду. Посевная доза 100 тыс,кл./мл. Клетки пассируют 1 раз в 3 - 4 дня, ратность рассева 1:10, Культура суспензионная.Культивирование в организме животных,Для выращивания опухоли пригодны мыши ВА.В/с, Свежим мышам за 3 - 30 дней до инъекции штамма вводят внутрибрюшинно по 0,5 мл пристана или вазелина. Штамм инъецируют внутрибрюшинно по 4- 5 10 кл. в среде Игла, Асцит образуется через 20 - 25 дней. Штамм не перевивают.Продуктивность штамма: секреция моноклональных...

Номер патента: 1744107

Опубликовано: 30.06.1992

Авторы: Амбарцумян, Завольная, Казаков, Климович, Машуров, Морозова, Швецова

МПК: C12N 5/00

Метки: f-системы, антигена, антител, видов, гибридных, ему, животных, клеток, крупного, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, против, рогатого, родственных, скота, штамм, эритроцитарного

...и м е р 1. 1 млн клеток штамма после криоконсервации освобождают путем центрифугирования (1000 об/мин в течение 10 мин) от среды криоконсервации; пипеткой (1 мл) распределяют клетки по 200 тыс. в лунки (2 мл) 24-ячеечного планшета (Еочч) на среду ПС, кондиционированную предварительно посеянными макрофагами. План. шет помещают в атмосферу 95% воздуха и 5% СО 2 при абсолютной влажности и 37 С. Через 48 ч клетки из каждой лунки переносят во флаконы Карреля в 4 - 5 мл среды ПС, соблюдая при этом оптимальную посевную дозу 200 - 300 тыс,клеток в 1 мл. При достижении культуральной плотности 600-700 тыс, клеток/мл их рассеивают в свежую среду(ПС) во флаконы. В третьем пассаже ПС заменяют НПС или НПС с добавлением КС,Культуру пассируют до...

Номер патента: 1744112

Опубликовано: 30.06.1992

Авторы: Мечетнер, Сахаров, Степанова

МПК: C12P 21/08

Метки: антитела, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклонального, продуцент, тюленя, фосфатазе, штамм, щелочной

...40 45 2 клонирования 1000 субклонов продуцируют антитела к щелочной фосфатазе тюленя, Продукция антитела сохраняется как минимум в течение 10 пассажей в культуре.Гибридомные клетки помещают в пластиковый флакон площадью 25 см по 5 х 10 в 5 мл среды ВРИс 100 эмбриональной телячьей сывороткой, 4 мМ глютамина, 10 мМ пирувата натрия, 40 мкг/мл гентамицина и культивируют 4 дня при 37 С в атмосфере, содержащей 5% С 02. Для получения асцитной опухоли 5 х 10 гибридомных клеток вводят в брюшную полость мышей ВА В/С, обработанных пристаном. Через 2 - 3 недели собирают асцитную жидкость и иммуноглобулины осаждают сульфатом натрия, Осадок растворят в 0,2 М боратном буфере (рН 8,1) с 0,15 М КаС и диализуют против того же буфера.Культуральную...

Номер патента: 1751202

Опубликовано: 30.07.1992

Авторы: Баранов, Бурдов, Глобенко, Давыдова, Иванющенков, Кирюхин, Кожаева, Молчанова, Спирин, Худяков

МПК: C12N 5/00

Метки: алье, антитела, вируса, гибридных, животных, клеток, компоненту, культивируемых, мusсulus, моноклональные, продуцирующий, штамм, ящура

...Через 10 дней супернатанты гибридных клонов тестировали на наличие антител в ИФА. Позитивные клоны составляли 5 - 70 от общего количества гибридных клеток, Эти клоны дважды субклонировали методом лимитирующих разведений, Отобранный стабильный клон с наивысшим титром антител обозначали М 7 ГПЯА 5-89 и депониРовали во Всесоюзной коллекции клеточных культур (г, Ленинград) под регистрационным М ВСКК(П) 476 Д,Подученный штамм имеет следующие1 морфологические и культуральные признаки.Морфологические признаки.Клетки круглые, различной величины,Ядра занимают большую часть клетки,Кариология культуры,Кариотип соответствует виду (мышиный), Модальный класс 84 16;6), 86 10), 588 (16%) хромосом, Модальный класс дляродительской миеломной...

Номер патента: 1752764

Опубликовано: 07.08.1992

Авторы: Боровиков, Булашев, Дмитриев, Ескендирова, Шенжанов

МПК: C12N 5/00

Метки: brucella, антител, бактериям, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, рода, штамм

...60 и20 КД сооттветственно. Константа связывания 2 х 10 М,Методы оценки специфичности МКА:непрямой и "сэндвич" варианты ТИФА, иммуноблот.Контаминация штамма, Контаминатовлинии, включая бактерии, грибов, дрожжейи микоплазм не обнаружено,Криоконсервация, К осадку гибридныхклеток добавляют фетальной сыворотки теленка и диметилсульфооксида до конечнойконцентрации 10%. Суспензию клеток разливают в стерильные пластиковые ампулы сзавинчивающимися крышками по 1-5 млн.кл., помещают в коробку иэ пенопласта и1752764 10 20 40 табл, 2,55 ставят на 1 сут в морозильник при -70 С,после чего ампулы переносят в жидкий азот, Условия размораживания. Замороженные клетки штамма вынимают из сосуда с жидким азотом и быстро помещают в водя ную баню на 37 С, Как...

Номер патента: 1756352

Опубликовано: 23.08.1992

Авторы: Зоделава, Самильчук, Сарсания, Хаджирисьян

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: альфа-1-антитрипсина, антигенной, антител, гибридных, детерминанте, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, обезьян, общей, человека, штамм

...же момента через день в каж- дой лунке меняют приблизительно половину средыКультивирование гибридных клеток в поисутствии ГАТ проводят в течение первых двух недель после слияния, затем еще 4 дня клетки культивируют в присутствии ГТ (без аминоптерина) и далее переводят на обычную среду без добавок. Отбор гибридсм, продуцирующих МКА требуемой специфичности, осуществляют с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА). В первом случае на твердой фазе адсорбируют ААТ человека, во втором - ААТ павиана гамадрила, Для реакции используют 96-луночные ИФА панели, в лунки которых вносят ААТ (2 мкг/мл, 100 мил на лунку), разведенный в 50 мМ карбонатном буфере, рН 9,5, Адсорбци;о ведут при 4 С в течение 16-18 ч, после чего панели трижды...

Номер патента: 1759872

Опубликовано: 07.09.1992

Авторы: Березкина, Завадская, Игнатова, Ковалева, Плескач, Синакевич

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, трансферрину, человека, штамм

...температуре. Затем промывают . водой и ФБР и добавляют в каждую лунку по 50 мкл конъюгата кроличьих антимышиных антител с пероксидазой хрена в разведении 1:500, Через 1 ч платы промывают водой и Ф БР и добавляют по 50 мкл субстрата (0,1 О(, ортофенилдиамин, 0,03Н 20 О, 0,2 М цитратный буфер, рН 4,5) в каждую лунку. По окончании ферментативной реакции расщепления Н 20 о в присутствии арто-фенилендиамина при наличии МКА развивается желтая окраска, которую регистрируют на спектрофотометре Мультискан при длине волны 450 нм. Связывание МКА с трансферрином человека обнаруживают при разведении супернатанта до 10Отсутствие взаимодействия полученных МКА с гемоглобином, альбумином и С- реактивным белком человека определяют следующим образом. В...

Номер патента: 1768635

Опубликовано: 15.10.1992

Авторы: Арэ, Галактионов, Гринчук, Корнилова, Соркин, Сорокин, Сорокина

МПК: C12N 5/20, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, рецептору, роста, фактора, человека, штамм, эпидермального

...культивируемых гибридныхклеток штамма й 10 сингенным мышам /линия ВА в/с/ вызывает у них образованиеасцитной опухали. В асцитной жидкости содержатся МонАТ к рецептору зпидермэльного фактора роста. Способность кпродуцированию МонАТ стабильно сохраняется, по крайней мере, 16 пассажей вкультуре и 3 пассажа при перевивках нэмышах /срок наблюдения/,Кариологическая характеристика,В клетках с модальным числом хромосом /95-94 хромосом у 42% всех клеток/при рутинном окрашивании, кэк правило, присутствуют 4 хромосомы, меньшие по размеру, чем 19 хромосома, мыши и не менее 2 маркерных хромосом больших, чем 1-я хромосома стандартного набора, Обнаружены также 2 метацентрических маркера, отличающихся по размеру,Продуктивность штамма.При...

Номер патента: 1773938

Опубликовано: 07.11.1992

Авторы: Кенжебулатов, Муканов, Мукантаев, Соколова, Сырманов, Шегидевич

МПК: C12N 5/00

Метки: адгезивному, антигену, антител, гибридных, еsснеriснiа, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, штамм

...35 продуцировали антитела к К 99 адгезивномуантигену ЕзсЬегсЫа со, Штамм гибридных клеток продуцирует антитела в культуральную среду и в асцитную жидкость.Штамм гибридных клеток ЗР 60 хранит ся в специализированной коллекции перевиваемых соматических клеток позвоночных Института цитологии АН СССР под номером ВСКК(П) 519 Д. Штамм характеризуется следующими свойствами.45 Морфологические свойства, Гибридныеклетки представляют собой слабоприкрепляющиеся к носителю округлые клетки размером с исходную миеломную клетку, Ядро занимает большую часть клетки. Цитоплаз ма имеет вид тонкого ободка.Культуральные свойства. Гибридныеклетки выращивают в среде ЙРМ 1-1640, содержащей инактивированную нагреванием сыворотку эмбрионал коров (10-20%), -...

Номер патента: 1776691

Опубликовано: 23.11.1992

Авторы: Гервазиева, Климович, Крутецкая, Овсянникова, Пашкова, Полищук, Самойлович

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, против, человека, штамм

...МКАТ может быть проверена в твердофазном иммуноферментном анализе с помощью 1 дЕ, адсорбированного на твердой фазе. МКАТ связываются с белком А стафилококка, что может быть использовано при их очистке. При адсорбции на твер 20 25 30 35 40 45 50 55 дой фазе МКАТ способны связывать сывороточный 1 дЕ и могут использоваться в качестве захватывающих антител в системе двухдетерминантного иммуноанализа (в паре с мечеными 1 дЕ-специфичными антителами) или при афинном извлечении 1 дЕ иэ сывороточных препаратов. МКАТ Е/5 Д 4, сохраняя антиген-распознающие свойства после присоединения ферментной метки,могут также служить выявляющим реагентом в двухдетерминантном иммуноанализе,Антитела специфичны в отношении эпитопа на 1 дЕ, который не...

Номер патента: 1778183

Опубликовано: 30.11.1992

Авторы: Бауер, Беккерт, Белова, Оглоблина, Смирнов

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, ингибитору, используемый, кислотостабильному, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, мочи, трипсина, человека, штамм

...разведений антител М 2 с концентрац ией от 2700 до 0,325 нг в 1 мл буфера Б и инкубируют 1 ч при комнат ной температуре. После этого панель отмывают три раза направленной струей водопроводной .воды и для проявления связавшихся в лунках МКА вносят в ячейки по 100 мкл раствора коньюгата 25 пероксидазы хрена с антителами кролика к иммуноглобулинам мыши, разведенного в 1000 раз буфером Б, и инкубируют в течение 1 ч при комнатной температуре, После трехкратного отмывания водой для определения связавшейся в лунках пероксидазы в лунки вносят по 100 мкл субстратной смеси (100 мкл раствора о-фенилдиамина 1 мг/мл в 1 О мл 0,02 М раствоое цитрата натрия, рН 4,5, с 10 мкл 303- ного раствора НО) и инкубируют при комнатной температуре до развития...

Номер патента: 1778184

Опубликовано: 30.11.1992

Авторы: Аркина, Кускова, Лимарева, Менявцева, Мирютова, Ратнер

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, иммуноглобулинов, используемый, клеток, кролика, культивируемых, легким, мusсulus, моноклональных, цепям, штамм

...препаратом иммунохимицес.ки чистых легких цепей иммуноглобули"нов кролика, режим активации: концентрация белка - 40 мнг/мл, наслаивающий буферный раствор - карбонатбикарбонатный буфер рН 9,6, время инкубации - 18 ч при 4 С. После отмывания планшетов от несвязавшегося белка (6 раз поочередно водопроводнойводой и дистиллированной водой с0,053 твина) в лунки вносят исследуемые пробы культуральной жидкостис продуктами жизнедеятельности гибридного клона Я 5, а также положительный (сыворотка мышей, иммунизированных легкими цепями иммуноглобули нов кролика) и отрицательный (культуральная жидкость, не содержащаяпродуктов жизнедеятельности гибридом)контроли (К+ и К- соответственно).Проволят инкубацию в течениео37 С, спмывают...

Номер патента: 1791450

Опубликовано: 30.01.1993

Авторы: Барков, Липницкий, Луговая, Свиридов, Синюкова, Фарбер, Храпова

МПК: C12N 5/00

Метки: антигену, антител, возбудителя, гибридных, клеток, культивируемых, мusсulus, мелиоидоза, моноклональных, продуцент, рsеudомаllеi, рsеudомоnаs, штамм

...ацзсццз 1. ВСКК(П)276 Д для получения моноклональных айотител.Моноклональные антитела к антигену 8возбудителя мелиоидоза получают из куль туральной жидкости среды), в которой клетки штамма выращивают вне организма ииэ асцитной жидкости мышей, которым клетки штамма вводят внутрибрюшинно,Для получения антител иэ культураль ной жидкости клетки штамма выращивают встандартных условиях: при температуре 37 С, влажности 98%, СО 2 - 5% в среде культивирования, Затем производят постепенный рассев культуры, Клетки выдерживают 0 для пролиферации без смены среды до достижения максимальной плотности, при которой клетки погибают. Культуральную жидкость осветляют центрифугированием и используют как источник антител.5Для определения титра...