Способ получения s -этил-2-оксо-1 пирролидинацетамида

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУ БЛИН 22 7 Р 295/18 ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯАТЕНТУ(57) Изобрете гетероцикличе ти получения лидинацетамитигипоксиче ктивность зовано в медицновых активныществ указаннведут из Блидинуксуснойдовательно обмиатом и аммит.Активная дозаность. Ю 1 ИЛСУДАРСТ 8 ЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР О ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТ(72) Жан Гобэр, Жан-Пьер Жери Ги Бодзон (ВЕ)(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЯОКСО-ПИРРОЛИДИНАЦЕТАИИДА ие касается замещенныхких веществ, в частносБ-Ы;этил-оксо-пирда (ПАЦ), обладающегокой и антиишемическойто может быть испольине, Цель - созданиеи малотоксичных вего класса, Синтез ПАЦИзобретение относится к способу получения левовращающего энантиомера с -этил-оксо-пирролидинацетамида, обладающего антигипоксической5 и антиишемической активностью,Целью изобретения является разработка на основе известных методов способа получения левовращающего энантиомера, имеющего абсолютную кон фигурацию Б и обладающего ценнымифармакологическими свойствами при низкой токсичности.11 р и м е р. а) Получение соли Нметил-бензиламина Бэтил 2-оксо-пирролидинуксусной кислоты.В реакторе емкостью 50 л суспендируют 8,7 кг (50,8 моль) рацемической (+)-1;этил-оксо-пирролидинуксусной кислоты в 21,5 л безводного 20 бензола. К этой суспензии постепенно добавляют раствор, содержащий 3,08 кг (25,45 моль.) 1 Б -(+ )-,;ме" тил-бенэиламина ,и 2,575 кг (25,49.моль) триэтиламина в 2,4 л 25 безводного бензола. Затем смесь кипятят с обратным холодильником вплоть до Полного растворения. Охлаждают и оставляют кристаллизоваться в течение нескольких часов, Таким образом 30 получают 5,73 кг соли Щ-м;метилбенэиламина Бэтил-оксо-пирролидинуксусной кислоты, Т.пл. 148о151 С. Выход 77,1 И. Эта соль может быть очищена путем кипячения с обратным холодильником в течение 4 ч в 48,3 л бензола. Охлаждают и отфильтровывают. Таким образом получают 5,040 кг целевой соли. Т.пл. 152 153,5 С, Выход 67,852. б) Получение Б 1этил-оксо-пирролидинуксусной кислоты.5,04 кг соли, полученной по пункту а), растворяют в 9 л воды. Туда 45 же медленно добавляют 710 г 307.-ного раствора гидроксида натрия. рН достигает 12,6 и температура не превышаоет 25 С. Раствор перемешивают еще в течение 20 мин и освободившийся Ы -50 метил-бенэиламин экстрагируют несколько раз объемом в целом 18 л бенэола.Затем водную фазу подкисляют до рН 1,1 добавлением 3,2 л бн. соляной55 кислоты. Образовавшийся осадок отфильтровывают, промывают водой и высушивают. фильтрат экстрагируют несколькораз объемом в целом 50 л дихлорметана, Органическую фазу высушивают надсульфатом натрия, фильтруют ее и выпаривают досуха при пониженном давлении.Полученный после выпаривания остаток и ранее выделенный осадок растворяют вместе при нагревании в 14 лдихлорметана. Дихлорметан отгоняюти заменяют постепенно 14 л толуола,в котором продукт кристаллизуется,Охлаждают до комнатной температурыи кристаллы отфильтровывают. Такимобразом получают 2,780 кг Бэтил 2-оксо-пирролидинуксусной кислоты,Т,пл. 125,9 С, (Ы)р = - 26,4 (сд 1;ацетон), выход 94,57,.в) Получение Б-Ы;этил-оксо 1-пирролидинацетамида.34,2 г (0,2 моль) Б-,-этилоксо-пирролидинуксусной кислотысуспендируют в 225 мл дихлорметанао9охлажденного до - 30 С. К полученнойсуспензии прикапывают 24,3 г(0,24 моль) триэтиламина в течение15 мин, Реакционную смесь затем охилаждают до -40 С и добавляют в нее24,3 г (0,224 моль) этилхлорформиатав течение 12 мин. Затем пропускаютток аммиака в течение 4,5 ч, Оставляют температуру повышаться до комнатной и удаляют образовавшиеся солиаммония путем отфильтровывания и промывки дихлорметаном. Растворитель отгоняют при пониженном давлении. Таким образомполученный твердый оста"ток диспергируют в 55 мл толуола иперемешивают в течение 30 мин, затемотфильтровывают и перекристаллизуютиз 280 мл этилацетата в присутствии9 г порошкообразного молекулярногосита 0,4 нм,Получают 24,6 г 1 Б 1этил-оксо-пирролидинацетамидаТ,пл. 115118 С (о), = - 89,7 (с=1, ацетон).Выход 72,3 Б.Рассчитано,l: С 56,45; Н 8,29;И 16,46.Найдено,l: С 56,71; Н 8,22;И 16,48,Используемую в этом синтезе рацемическую (+ )-Ы-этил-оксо-пирролидинуксусную кислоту получают описанным образом.В колбу емкостью 20 л, содержащую3,65 кг (18,34 моль) (этил)-(ф)-р(этил-оксо-)-пирролидинацетата в течение 2 ч добавляют при температуре, не превьшающей 60 С, раствор, содержащий 788 г (19,7 моль) гидроксида натрия в 4,35 л воды. Когда это добавление закончится, температуруосмеси доводят до 80 С и отгоняют образующийся спирт до тех пор, пока температура в среде не достигнет 100 С, Охлаждают до О С и в течение 2,5 ч добавляют 1,бб л (19,80 моль) 12 н. соляной кислоты. Отфильтровывают осадок, промывают его двумя лиграми толуола и перекристаллизуют его из изопропилового спирта. Таким образом получают 2,447 кг рацемической (+)-ю-этил-оксо-пирролидинуксусной кислоты, плавящейся при 155-156 С. Выход 787Рассчитано,l; С 56,12; Н 7,65; И 8,)8.Найдено,l: С 55,82; Н 8,10; Б 7,97.Фармакологические испытания.Рацемический о -этил-оксо-пирролидинацетамид (продукт А) и ЯЫ,-этил-оксо-)-пирролидинацетамид (продукт В) изобретения подвергают Фармакологическим тестам.Защита по отношению к гипоксии (мышь).Метод этого теста основан на измерении возможностей выживания организма мыши в постоянно обедняемой кислородом атмосфере, Учитывая особую чувствительность нервной системы к такого типа поражению (агрессии), полученные в этом тесте результаты могут интерпретироваться как величина сопротивления нервной системы. Продукты, увеличивающие сопротивление животных, следовательно, пригодны для лечения и предохранения от поражений типа гипоксии центральной нервной системы,Прибор состоит из герметичной и прозрачной камеры, имеющей высоту 37 см, глубину 39 см и ширину 97 см. Эта коробка (камера) емкостью )40 л снабжена 60 прозрачными отделениями (секциями) Ьх 10 х 10 см, позволяющими принимать ЬО мышей, по отдельности. Вентилятор обеспечивает там перемешивание атмосферы, которая циркулирует среди отделений (секций) через . решетчатое перекрытие, Камера снаб месте клетки,Спустя 30 мин после введения клетки закрывают и туда впускают азот с постоянным дебитом (7,750 л технического азота в минуту) в течение примерно 37 мин; атмосфера содержит тог 20 да 3,7/ кислорода,Коробка (клетка) остается закрытой вплоть до критического момента,когда не наблюдается более, чем троевыживших из 20 контрольных животных.В этот момент клетку открывают и ту 25 30 да попадает окружающий воздух. Несколькими моментами позднее пересчитывают выживших в каждой группе животных.Для каждой дозы испытуемого продукта эксперименты повторяют один или два раза, результаты обобщают для получения минимума 40 (или 60) обработанных дозой животных и 40 (или 60) соответствующих контрольных животных.Для каждой дозы испытуемого про 35 40 дукта число выживших животных из обработанных продуктов животных сравнивают с числом выживших животных изконтрольных животных. Разница междуэтими числами выражает загитнуЩ активность продукта по отношению к ги 45 поксии, вызванной лишением кислорода, Статистическое значение (Р) этой разницы оценивается тестом РЫспег 1 ат,ез.В табл.1 даются результаты, полученные для возрастающих доз продук-: тов А и В. 50 В тесте левовращающий энантиомер (продукт В) повышает вы 55.живание животных, лишенных кис,лорода, начиная с дозы 0,032 ммоль/кг, Рацемат (продукт А) проявляет жена устройством для подачи азота спостоянным дебитом и отверстием, сообщающимся с окружающим воздухом.Животными являются мыши самцы (родБМВт) весом по 20-22 г. Они подвергаются натощак бопрствованию до опыта. Эксперимент осуществляется наследующий день и одновременно на трех 10группах иэ 20 мышей; контрольная группа получает воду (25 мл/кг) перорально, а две другие группы, каждая перорально, получают испытуемый продукт.Спустя 25 мин после введения, живот ных размещают в отделениях так, чтобы ни одна из трех групп животных небыла локализована в предпочтительномподобную активность только начиная с 0,32 ммоль/кг (1-я эФФективная доза) и, следовательно,в 10 раз менее активен, чем левовращающий энантиомер.Защита по отношению к церебральной ишемии (крысы).ЭлектрознцелограФические контролипоказали, что лигатура (перевязка)обеих сонных артерий вместе у крысывызывает постоянную церебральную ишемию: кривая электроэнцелограммы сплющивается и становится даже изоэлектрической (электрическое молчание).Самцы крыс Вистер весом по 250350 г анестеэируются пентабарбиталом, вводимым интраперитонеально вдозе 50 мг/кг (0,5 мл/100 г). Немедленно после анестезии животным вводят интраперитонеально по 0,5 мл/100 г испытуемого продукта, растворенного в изотоническом растворе хлорида натрия (обработанные животные)или только изотонический раствор хлорида натрия или плацебо (контрольныеживотные),Спустя примерно 20 мин обе сонныеартерии вместе обнажают и, спустяоколо 1 О мин, их одновременно перевязывают. Эта операция проводитсяодновременно на контрольных и на обработанных животных,Спустя час после введения испытуемого продукта или плацебо снова вводят интраперитонеально, в той же дозе, либо испытуемый продукт (обработанным животным), либо плацебо (контрольным животным).Спустя 5 ч после первого введениятретий раз инъекцируют дозу либо испытуемого продукта (выжившим обработанным животным), либо плацебо (выжившим контрольным животным). Спустя24 ч после первого введения, у всехживотных под анестезией за счет пентабарбитала проверяют эФФективность лигатуры путем сечения сонных артерий ниже ее, Отмечают число выжившихживотных как среди обработанных животных, так и среди контрольных животных. Для каждой дозы испытуемогопродукта число выживших среди животных, обработанных продуктом, сравнивают с числом выживших среди конт 10 рольных животных. Различие выражаетзащитную активность продукта по отношению к летальности, вызванной одновременной лигатурой (перевязкой) обеих сонных артерий,15 Статистическое значение (Р) этогоразличия оценивается тестом ВгапЫЗпейесог.В табл.2 представлены результаты, .полученные для возрастающих доэ про 20 дуктов А и В,Из табл.2 следует, что рацемат(продукт А) активен только начинаяс дозы 0,64 ммоль/кг. Напротив, левовращающий энантиомер изобретения25 (продукт В) защищает животных от летальности, вызванной одновременнойлигатурой обеих сонных артерий, начиная с 0,16 ммоль/кг, и, следовательно, оказывается в 4 раза более актив 30 ным, чем рацемат.В табл.З приведены значения. внутривенно, для продуктов А и В, ЛД определенные у самца мыши и самца крысы.Иэ табл.З следует, что левовращающий энантиомер изобретения (продуктВ) является, как и рацемат (продукт А), очень мало токсичным и токсическая доза находится выше активной дозы.40 Формула изобретения. Способ получения Бэтилоксо-пирролидинацетамида, о т л ич а ю щ и й с я тем, что Б-,45 этил-оксо-пирролидинуксусную кислоту подвергают взаимодействию с этилхлорФормиатом, затем с аммиаком.1402260 Таблиц а 1 ИспыДозаперорально,ммоль/кг Число выживших животных туемый контрольные обработанные про- дукт 16/60 12/60 А 0,032 8/60 7/60 0,1 12/ЬО 12/60 0,16 с 0,001 10/60 30/60 0,32 5/40 11/40 Незначительная В 0,016 разница со,б17/40 8/40 0,032 19/40 6/40 0,1 6/40 19/40 0,16 17/40 5/40,0,32 Т а б л и ц а 2 Дозаинтрапе- ритонеально,ммоль/кг 0,32 Незначительнаяразница0,01 0,64 0,1 Незначительная разница0,05 0,16 0,32 0,01 Испытуемыйпродук Число выжившихживотных конт- обрарольнь ботанных 6/29 8/29 11/зо 21/зо9/29 14/29 6/29 14/30 8/30 19/29 Незначительная разница10 1402260 Таблица 3 Испытуемый продукт Лд,о, мг/кг, для мыши крысы 1500 1790 1038 1081 . Составитель И.БочароваТехред А.Кравчук Редактор А,Шандор Корректор О.Кравцова Заказ 2796/58 Тираж 370ВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб д, 4/5 Подписное Производственно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул, Проектная, 4