Способ получения метилсульфатов n, n, n-триметиламмониевых производных полиеновых макролидов

натанатрия и по каплям вводят 2 млдиметилсульфата. Раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 10 ч. Затем при пониженномдавлении из реакционной смеси отгоняют метанол, добавляют диэтиловый 5эфир, полученный осадок отделяюти смешивают с 50 мл бутанола.Раствор целевого продукта в бутаноле отделяют на центрифуге отнерастворившегося бикарбоната натрия, дважды промывают 20 мн воды,упаривают с добавлением воды припониженном давлении до объема примерно 15 мп и обрабатывают диэтило.вым эфиром. 15Выцелившийся осадок отделяют,промывают последовательно диэтиловым эфиром и гексаном и высушивают.в вакууме.,Получают 1,6 г метилсульфата метилового сложного эфираИ,И,М-триметиламмониевого производного полифунгина с ЕЦ = 700 (при304 нм), что составляет 80 теоретического выхода.П р и м е р 2. 20 г нистатинас Ц,"= 860 (при 304 нм) растворяютв 50 мл метанола, добавляют 2 г бикарбоната натрия и вводят по каплям12 мл диметилсульфата. Полученный раствор перемешивают при 25 С в течение4 ч и далее обрабатывают, как описано в примере 1.Получают 1,5 г метилсульфата метилового сложйого эфира И,И,И-триметиламмониевого производного нистатина с Е" = 760 (при 304 нм), что 35составляет 75 теоретического выхода.П р и м е р 3. 1,0 г амфотерицинаБ с Е 1 = 1420 (при 382 нм) растворяют в 20 мл смеси диметилформамидметанол (10".1), добавляют 1 г бикарбоната натрия и по каплям вводят 1 мпдиметилсульфата,Раствор перемешивают при 15 С вотечение 1 сут и далее обрабатывают,как описано в примере 145Получают 0,9 г метилсульфата.метилового сложного эфира И,И,И-триметиламмониевого производного амфотерицина Б с Е,.о = 900 (при 382 нм), чтосоставляет 90 теоретического выхрда. Полученный осадок очищают методом противоточного разделения в системе хлороформ:метанол:вода (2:2 ф 1),Получают 0,3 г метилсульфата метилового сложного эфира М,М,М-триметиламмониевого производного амфотерицина Б с Е= 1400 (при 282 нм),П р и м е р 4, 1 г канамицина сЕ 1 с = 820 (при 383 нм) растворяют в20 мп смеси диметилацетамид-метанол.трия и по, каплям вводят 1 мл диметилсульфатаРаствор перемешивают при 20 С вотечение 15 ч и далее обрабатывают,как описано в примере 1. 65 Получают О, 8 г метилсульфата метилового сложного эфира И,И,И-триметиламмонивого производного канамицина с Е,= 550 (при 383 нм), чтосоставляет 80 теоретического выхода.Полученный продукт очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, предварительно насыщенном водой, в системе хлороформ:метанол:вода (20:10:1),Получаю 0,2 г производного канамицина с Е,= 850 (при 378 нм).П р и м е р 5. 1 г трихомицина сЕ= 450 (при 378 нм) растворяютв 30 мл смеси диметилацетамид-метанол (10:1) добавляют 1 г бикарбоната натрия и по каплям вводят 1 млдиметилсульфата. Раствор перемещивают при 20 С в течение 15 ч и далее.обрабатывают, как описано в примере1.Получают 0,6 г метилсульфата метилового сложного эфира И,И,И-триметилаьмониевого производного трихомицина с Е " = 560 (при 378 нм).П р и м е р б1 г пимарицинаа Е = 960 (при 304 нм) растворяют в 2 мл метанола, добавляют 1 гбикарбоната натрия и по каплям вводят1 мл диметилсульфата. Раствор переомешивают при 25 С в течение 15 чи далее обрабатывают, как описанов примере 1.Получают 0,85 г метилсульфата метилового сложного эфира М,М,И-триметиламмониевого производного пимарицина с Е" = 700 (при 304 нм), чтосоставляет 80 теоретического выхода.П р и м е р 7. 1 г леворина сЕ о = 800 (при 378 нм) растворяют в20 мл смеси диметилформамид-метанол(10:1), добавляют 1 г бикарбонатанатрия и по каплям вводят 1 мл диметилсльфата. Раствор перемешиваютпри 20 С в течение 15 ч и далее обрабатывают, как описано в примере 1.Получают 0.,7 г метилсульфата метилового сложного эфира И,И,И-триметиламмониевого производного леворинас Е" = 600 (при 304 нм), что составляет 70 теоретического выхода.П р и м е р 8. 1 г римоцидина сМой = 600 (при 304 нм) растворяютв 20 мл смеси диметилформамид-метанол (10:1), добавляют 1 г бикарбона-та натрия и по каплям вводят 1 мндиметилсульфата. Раствор перемешивают при 20 С в течение 15 ч и далееобрабатывают, как описано в примере1,Получают 0,8 г метилсульфата метилового сложного эфира И,И,И-триметиламмуниевого производного римоцидинас Е = 560 (при 304 нм), что составляет 80 теоретического выхода.П, р и м е р 9. 0,1 г перимицинас Е= 650 (при 380 нм) растворяютв 2 мл смеси диметилацетамид-метанол(10:1), добавляют 0,1 г бикарбоната натрия и по каплям вводят 0,1 мл диметилсульфата. Раствор перемешивают при 20 С в течение 10 ч, а затем обрабатывают, как описано в примере 1. 5Получают 0,05 г метилсульфата Х,М,И-триметиламмониевого производного перимицина.с Е /" = 600 (приоси380 нм), что составляет 50 теоретического выхода.П р и м е р 10. 1 г ауреофацинас ЕЛф = 800 (при 378 нм) растворяют в 23 ж смеси диметилформамид-метанол (10:1), добавляют 1 г бикарбоната натрия и по каплям вводят 1 мл 5 диметилсульата. Раствор перемешивают при 20 С в течение 20 ч, после обрабатывают, как описано в примере 1.Получают. 0,7 г метилсульфата метилового сложногб эфира М,М,В-триме.тиламмониевого производного ауреофацина с Е = 760 (при 378 нм), что составляет 65 теоретического выхода.П р у м е р 11. 0,1 г кандицидина с Е ф 400 (при 378 нм) раство ряют в 5 мл смеси диметилформамидметанол (10,1) добавляют 0,1 г бикарбоната натрия и по каплям вводят ЗО 0,1 мл диметилсульфата. Раствор перемешивают при 20 фС в .течение 15 ч, после чего обрабатывают, как описано в примере 1.(Получают 0,04 г метилсульфата . метилового сложного эфира И,И,И- -триметиламмониевого производного кандицидина с Еф = 560 (при 378 нм), что составляет 45 теоретического выхода.П р и м е р 12. 1 г микогептина 40 с ЕЦД700 (при 378 нм) растворяют в 20 мл смеси диметилацетамид-метанол (10:1) добавляют 1 г бикарбоната натрия и по каплям вводят 1 мл диметилсльфата. Раствор перемешивают 45 при 20 С в течение 15 ч, а затем обрабатывают, как описано в примере 1,Получают 0,8 г метилсульфата метилового сложного эфира И,И,И-триметиламмониевого производного микогептина 5 О с 1."ф = 680 (при 378 нм), что составляет 85 теоретического выхода.Структура полученных производных доказана спектроскопическими методами. Для примера описывается идентификация производногокандицидина, полученного в результате алкилирования диметилсульфатом согласно способу и далее называемого РМБ-кандицидином. В условиях кислого гидролиза 60 кандицидина выделяется остаток микозамина. Вещество, полученное в результате расщепления О-гликозильной связи действием разбавленных растворов кислот на РМБ-кандицидин, было 65 идентифицировано как М,И,М-триметилмикозамин. Структура последнего была определена на основании анализа масс-спектра, проведенного технической десорбции полем (основной,ион, одновременно являющийся массовым ионом при м/е = 206), а также спектра протонного магнитного резонанса (снгнал при Б = 3,68, характерный для метильных групп, связанных с атомом азота, с интенсивностью, в три раза превышающей сигнал при Б = 1,68, характерный для трех протонов метильной группы в позиции 6 аминосахара) .Доказательством присутствия сложноэфирной связи в молекуле производного антибиотика является наличие интенсивной полосы поглощения в инфракрасном спектре при ) = 1730 см при одновременном отсутствии полосы карбоксильного иона, характерной для исходного антибиотика при1590 см ф. Спектры поглощенйя в диапазоне видимого и ультрафиолетового света кандицидина и его производного лишь незначительно отличаются интенсивностью, а положение максимумов поглощения и осцилляционная структура идентичны. Это свидетельствует о неизменной структуре полиенового хромофора в РМБ-производном. В спектре ядерного магнитного резонанса персилильного РМБ-кандйцидина обнаружено наличие полос пр.; Б - 3;65 и Б = 3,03, характерных для водородов метоксильной и И-зачещенной метильных групп. с. В водных растворах основани:", иэ кандицидина выделяется р-айиноацетоФенон, а из РМБ-кандицидина - Ы-диметил-, Х-метил- и неэамещенный р-аминоацетофенон в молярных соотно;шениях 3:5:2,Результаты испытаний описываемых соединений на противогрибковую и гемолитическую активности представлены в таблице.+В Ф .Нз) э Нз ОФО 0,054 20 ВМБ-канамицин 70 0,15 0,005 0,005 0,005 0,003 0,007 0,009 0,005 2,5 Кандициди н ВМБ-кандицидинАуреофацинРМБ-ауреофацинЛеворинВМБ-леворин 0,35 15 2,5 Трихомицин 0,01 10 ВМБ-трихомицин ПеримицинВМБ-перимицин 0,002 0,003 Составитель Ю,ХроповРедактор Н.Безродная ТехредМ,Гергель Корректор М.Иарснтщ Заказ 6496/78 Тираж 445 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, й 35, Раушская наб., д.4/5 Филиал ППП "Патентф, Г.ужгород, ул.Проектная,4 Антибиотик 1 С ЕН(мкг/мл) (мкг/мл) П р и м е ч а н и е: ВМБ - метил- сульфат метилового сложного эфира И,М,М-триметиламмониевого производного соответствующего полиенового макролида или метилсульфат М,М,М-триметиламмониевого производного перимицина;1 С -концентрация вещества, вызывающая 50-ное торможение роста клеток Бассагоюусез сегеу 1 з 1 ае в жидкой питательной среде и определенная спектрофотометрически при )-= 660 нм после 24 ч инкубации при 28 С;ЕНО- концентрация вещества, вызывающая в стандартных условиях 50- ное выделение гемоглобина и определенная спектрофотометрически при550 нм. Способ получения метилсульфатов.И, Х, М-триметиламмониевых производных 15 полиеновых макролидов общей формулы- остаток перимицина;Х - водород,о т л и ч а ю щ и й с я тем, чтоисходный полиеновый макролид,. соответЗ 0 ствующий указанным значениям радикалов К и Хобрабатывают диметилсульфатом в присутствии бикарбоната натрия в органическом растворителе,таком как диметилформамид, диметил 35 ацетамид, диметилсульфоксид и алиФатические спирты с длиной цепивысаживают целевой продукт диэтиловым эфиром, растворяют в бутаноле,промывают водой, упаривают при пони 40 женном давлении и высаживают диэтиловым эфиром.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Машковский М.Д.Лекарственные4 средства. М., "Медицина", 1972, ч.П,с.296-319.2. Физер Л. и Физер М, Реагентыдля органического синтеза. М.,