Штамм продуцент глюкоамилазы

(71) Звявител огический инстит Воронежский те 54) ШТАММ ЯНХ 20 РОВ ТИПСТ ГЛВКОАМИЛАЗЫ УЦЕ пищевой прового штамдуцентаиспользуекрахмалпо паточной,мышленностиению ввЫ. Купь- И ей- луномеа Изобретение относится кмышленности, к получению нома Я 1 т 1" оров 1 г 1 бс 1 1 провысокоактивной глюкоамилазымой при гидролиэе крахмала исодержащего сырья в крахмспиртовой и пивоваренной проНаиболее близким к изобреляется штамм Мц 2.аро СгЖтура гриба хранятся в коллекциитута микробиологии АН СССРром ВКМ 1619.Фе ментативный комплекс р исходного штамма содержит глюкоамилазу с активностью 80 ед/г воздушно-сухой культуры и с-амилазу с активностью 15-20 ед/г воздушно-сухой культуры.Юимроб т.гЖс 1 ВКМ 1619 - термотолерантный, с максимумом температуры роста 42-43 С Я .Недостатком этого штамма можно счят ть низкую активность глюкоамилазы и с-амилаэы, что осложняет применение его в ферментной ,промышленности,Цель изобретения - повышение активности ферментов амилолитического комплекса, и, прежде всего, глюкоамилаэы.Псставленная цепь достигается методом индукцированной селекции, а именнотем, что на споры исходного штамма дствуют нитрозодяметилмочевиной и УФчами в комплексе с этиленимином.Полученный штамм обладает в 2,5- 3,0 раза большей глюкоамилаэной активностью, в 2,2-2,5 раза более высокойактивностью сС-амилазы.Штамм РЬ 12 орцэ Ьй,тс 1 т. обладает1следующими свойствами,Морфология.Столоны слабо выражены. Ризоиды коротко и слаборазветвленные, немногочисленные, Спорангиеносцы до 500 мкм длиной и прямые извилистые, 10-20 мкм в диаметре, простые" ,отходят по 1-3 отшейки ризоида или столоновидных гиф; часто с раздвоенной или неправильно мутовчато-разветвленной верхушкой. Иногда спорангиеносцы являются продолжением737456 тав казат Содержание декстриновг /100 мл 2,2азота, м В, % одержание С язкость, спз Коагулируемый азот,мг/100 мл 20,38 26,8880,5 Содержание общегоазота, мг/100 мл 9,6 2 азота по Лундину, вк общему азоту:фракция Афракция Вфракция С 19,4 26,2 54,4 22,3 24,9 52,8 5основного затора 2-3 солода, темпераотура 40 С; белковая пауза 30 мигг; смешивание отварки и затора, температурал ОО 3 С; мальтозная пауза 40 мигп подогревдо температуры осахаривания 70 С; осахаривание;подогрев до 75 ОС; центрифугирование.Сусло кипятят с хмелем в течение2 ч задают хмель в 3 приема.Состав и основные показатели свойст,сусла приведены в табл. 1.Охмеленное сусло охлаждают до 6 Сои засевают дрожжами. После главногоброжения "зеленое" пиво снимают с осадка и ставят на пображиваиие при 1-2 С,По истечении 21 суток пиво подвергаютфил ьтрации,Показатели готового пива представлены в табл, 2.По органолептической оценке опытноепиво аналогично контрольному.Методы определения активностей.Определение глюкоамилазной активности проводят глюкозооксидазным методомпо Далквисту, модифицированным лабораторией технохимконтроля институтаВНИИсинтезбелок,6Активность с -амилаэы определяетсяколориметрическим методом (Фертман Г.И.и Шойхет М. И.),Протеолитическую активность определяют модифицированным методом Ансона.предлагаемый штамм Ц 1 гормэ 11 1 Ос 11 может быть внедрен в производство как высокоактивный продуцент глюкоамилаэы, устойчивый к повышенным температурам при культивировании в камерахбез кондиционирования воздуха и не имеющий ферментов трансферазного действия.Наряду с глюкоамилвзой гриб синтезирует активную с,-амилаэу (30-40 ед/г 15 воздушно-сухой культуры), что выгодноотличает его от известных штоммов КЫгорю де 6 ьмаг В и ргФг 1 оров Р%"щ"г Р 1Наличие активной А -амилазы в ферментативном комплексе продуцента позволяет облегчить 20 и ускорить процесс раскладки питательнойсреды при производственномвыращивании.Использование комплексного препарата"Глюкотритицина П 10 Х" в пивовареннойпромышленности при переработке 40% несоложенного ячменя для завода производительностью. 7 мли.ад, в год обеспечивает экономический эффект 104 тыс.рублей. Таблица 1737456 продолжение табл, 2 2, Таннйовы й" показатель, ед. опт. пл. 0,37 3, Холодное помутнение, ед, опт.пл,203 0,46 4, Предел осаждения, мп5. Высота пены, мм6. Пеностойкость, мин 6,0 8,050,0 45,0 4,0 15 Составитель И, ПриваломТехред Н. Бабурка Корректор Г, Назарова Редактор Г. Прусом Заказ 2607/8 Тираж 522 ПодписноеЦБИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москм, Ж, Раушская набд. 4/5 филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул, Проектная, 4 формула изобретення Штамм Ютг.ороь и 11 с 1 1 1 пРО- дуценг глюкоамилазы.Штамм хранится в музее культур кафед ры микробиологии и биохимии Воронежского технологического института.Морфологические признаки. Стопоны слабо выражены. Ризоиды коротко и слаборазветвленные, немнрго 25 численные, Спорангиеносцы до 5000 мкм длиной прямые и извилистые, 10-20 мкм в диаметре, простые; отходят по 1-3 от шейки рнзоида или столоновидных гиф; часто с раздвоенной или неправильно мутовчато-разветвленной верхушкой. Иногда спорангиеносцы являотся продолжением гиф и тогда более длинные. Спорангии до 250 мкм в диаметре, при достижении полной зрелости они раскрываются. З ,Колонка чапе ширококоническая, режеприплюснуто-шаровидная или слегка коническая, 50-120-18050-110-140 мкм. Споры 5,5 10 к 4-5 дбмкм в диаметре . аллиптические, часто и неправильной фор- . мы, частично уродливые и тогда. до 30 мкм в диаметре, коричневые. Образует многочисленные хламидоспоры до 30- 40 мкм в диаметре.Культура льные признаки.Минеральная среда Чапека с 2% крах мала и 10-ным водным екстрактом из солодовых ростков, Мнцелий хорошо развитвойлокообразный, сначала белый, эатем 1буровато-темно-серого цвета. Спорообразование начинается после 24 ч. Высота мицепия 2-2,5 мм.Органическая среда, Сусловый агар.М ицелий плотнь войлочный, характеризуется врастанием в в,гар вначале белый,рыхлый, затем буровато-серы. Высотамнцелия 3-5 мм, Агаризованная средаиз 8%-ной вытяжки пшеничных отрубейн 8%-ного водного екстракта из солодовых ростков. Мицелий воздушный, плотйьвойлочный, вначале белого цвета. После2-3 суток роста мицелнй буровато-темносерый. Высота мицелия 2-3 см.Отношение к углеводам.Ассимилирует глюкозу, рамнозу, арабинозу, галактозу, сахарозу, мальтозу,фруктозу. Ассимилирует слабо пактоэу,манннт, раффиноэу. Не ассимилирует сорбит,Температурный интервал роста 28-55 Со1оптиМальный рост при 34 С,Активность глюкоамилазы составляет200-250 ед/г воздушнсь сухой культуры.Свободен от глюкоэилтрансфераз, имеет,ендо--глюконазу и протеиназу.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Коллекция Института микробионногин АН СССР ШтаммКЬаорвЬ 10 слВКМ 1619 (прототип).