Способ количественного определения флавонол-3-гликозидов

60 мин измеряют оптическую плотность раствора Флавонол-гликозида с реал гентами на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 1 см при длине волны 405 нм для Фларонина и 415 нм для авикулярина, гиперозида, кверцитрина и рутина, применяя в качестве контроля раствор соответствующего флаво-нол- гликозида, подкисленного уксус ной кислотой, Параллельно в тех же условиях измеряют оптическую плотность растворов стандарФных образцов рутина, фларонина и гиперозида, прит готовленных таким же способом. 15Содержание флавонол-гликозида в процентах (Х) в пересчете на сухое вещество вычисляют по формуле1 ООД, С 20 где Д - оптическая плотность испытываемой пробы;Д - оптическая плотность стандартного образца;С - количество стандартного образца в пробе для спектрофотометрирования в пересчетена сухое вещество, мг;С - количество .испытываемого Фла"вонол-гликозида в пробедля спектрофотометрированияв пересчете на сухое вещест-.В связи с отсутствием стандартов авикулярина и кверцитрина проводят ,пересчет гиперозида на авикулярин, с этой целью в числитель укаэанной Формулы вводят коэффициент 1, 07, а для пересчета на кверцитрин применяют коэффициент 1,035. Указанные коэффи циенты получены из отношения молекулярной массы гиперозида к молекулярной массе авикулярина или кверцитри-. на.Для приготовления 1%-ного раствора 45 уксусно-кислой меди 1 г растертого в мелкий порошок ацетата меди растворяют в мерной колбе емкостью 100 мп в 20 мп воды, подкисленной 5 мп 30%-ной уксусной кислоты, затем прибавляют 15 мп 30%-ной уксусной кислоты, 35-40 г диметилформамида, перемешивают и доводят объем раствора водой до метки.П р и м е р 2. В две мерные колбы емкостью 25 мл помещают по 1 мп испытываемого раствора любого из опре" .деляемых веществ (авикулярин, гиперозид, кверцитрин, рутин, Фларонин, приготовленного, как в примере 1; в одну колбу прибавляют 2,3 мп 1%-ного раствора ацетата меди (0.,023 г) в 40%-ном диметилформамиде с 67-ной уксусной кислотой (О,38 г), затем добавляют 3,7 мл 15%-ного раст-. вора гексаметилентетрамина (0,555 г) в 40%-ном диметилформамиде, а в другую колбу прибавляют 0,1 мл 30%-ной уксусной кислоты и доводят объем растворов в колбах до метки 40%-ным водным раствором диметилформамида. Через 15-60 мин измеряют оптическую плотность проб и проводят расчеты, как в примере 1.П р и м е р 3.В две мерные колбы емкостью 25 мл помещают по 1 мп испытываемого раствора любого из определяемых веществ, приготовленного как в примере 1; в одну колбу прибавляют 2,5 мл 1%-ного раствора ацетата меди (0025 г) в 35%-ном диметилформамиде с 6%-ной уксусной кислотой (0,150 г), затем добавпя 1 от 4 мп 157-ного раствора гексаметилентетрамина (0,600 г) в 35%-ном диметилформамиде, а в другую колбу прибавляют 0,1 мл ЗОХ-ной ук-. сусной кислоты и доводят объем растворов в колбах до метки 357-ныи водным раствором диметилформамида, Через 15-60 мин измеряют оптическую плотность проб и проводят расчеты, как в примере 1.Пр и м е р 4, Количественное определение рутина в таблетках по 0,02 и фларонина в таблетках по 0,03.0,05-0,1 г (точная масса) порошка растертых таблеток Фларонина или 0,15- 0,3 г таблеток рутина взбалтывают с 15 мп диметилформамида в течение 15 мин.и раствор Фильтруют в мерную колбу емкостью 50 мл, остаток порошка в колбе и на фильтре промывают 5 мл диметилформамида, к фильтрату прибавляют 20 мл воды, перемешивают и доводят объем раствора водой до метки.В две мерные колбы емкостью 25 мл помещают по 2 мп полученного извлечения, затем прибавляют реактивы и проводят определение по методике, описанной в примере 1. Содержание рутина или Фпаронина водной таблетке в граммах вычисляютпо формулеДС 50 аг Дб 2. ваемой пробы; характеристики известного и предлаД - оптическая плотность пробы гаемого способов определения флаво;стандартного образца рутина нол-гликозидов.или фпароиина; В табл. 3 приведены результатыС - количество рутина-стандарта количественного определения флавонолили фларонина-стандарта в 3-гликозидов в искусственных смесяхснектрофотометрируемой про- с агликонами предлагаемым способом,бе, г; 10 Таким образом, избирательностьО - средняя масса таблетки, г; предлагаемого способа повышена в- масса порошка таблеток, г. 10 раз, а точность определения - вВ табл. 1 приведены результаты 6-10 раз.определения рутина и фларонина в модельных смесях и таблетках. 15 Формула изобретения Та блиц а 1 Найденофпавонол-гликозида Норма содержания по НТД Объект Навеска, г исследования Модельная О, 0151смесь 98,599,1 101,2 0,0212 составатаблеток 0,0311 0,1515 0,2103 0,3011 0,0154 рутинаТаблетки 0,0190 0,0196 0,0194 0,018-0,022 рутинапо 0,02Модельнаясмесьсоставатаблетокфлар онина 101,3 99,4 0,0231 0,033 98,3. Изобретение раапиряет область применения спектрофотометрического метода для анализа флавонол-гликозидов .в смесях, содержащих 0,1-10% .сопутствущцих им агликонов, с точностью спектрофотометрического определения и позволяет получать достоверные ре-. зультаты анализа в случае разложения фпавонол-З-гликоэидов, что дает возможность использовать предлагаемый способ для изучения сроков хранения исходных субстанций в лекарственных формах (например, таблетках). Предлагаемый способ обеспечивает сокраще ние времени процесса, включает применение общедоступных недорогостоящих реактивов и исключает исполЬзование спиртов, обычно применяемых при анализе флавоноидов,Способ количественного определения фпавонол-гликозидов путем обработки раствора анализируемой пробы 20 в органическом растворителе химическим реагентом с последующим фотометрированием полученного раствора,о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, сцелью повышения избирательности и 25 точности способа, в качестве органического растворителя используют35-40%-ный водный диметилформамида,в качестве химического реагента -ацетат меди, обработку ведут в при сутствии уксусной кислоты и гексаметилентетрамина и фотометрирование ведут с использованием в качестве контрольного раствора раствора анализируемой пробы, подкисленной уксусной 35 .кислотои1483339 Продолжение табл,1е Норма содержа"ния но НТДХ0,027-0,033 Найденолавонол-гликозида Нанеска, г ОбЪектисследования Таблетки 0,0511 0,0271 фларонина 0,0724 0,0278 по 0,03 0,1 О 53 0,0274 П р и м е ч а н и е. Результаты анализа модельныхсмесей выражены в % от взятойнавески флавонол-гликозида,что показывает точность анализа,Результаты анализа таблетоквыражены в граммах в 1 таблеткев соответствии с нормами по НТД.: Таблиц а 2) Извест-. Предлагаеный спо- мый способ соб Показ ат ель Избирательность способа (допустимый % примеси агликонов в смеси с гликозидами)Точность анализ а при 10% примеси агликонов 0% 0% 13-23%1 ОО,З ОО,28. 1 ОО,гг 1,0650,4379 0,4616 0,46 17" : . 0,296 . 03040 2,86 1,83 1,88 100,2 100,14 0,19, 0,5704 О э 195. 013374 ,212,1 оптимальных условий и поэтомувовс Опыты полученыв расчеты не вкаюч 335,611,2