Йодметилат 3е-ацетокси-1е, за-диметил-6ео-бензилоксифенил-4 пиперидон, проявляющий противовирусную активность

О П И С А Н "И Е пщ 536676ИЗОБРЕТЕН ИЯК АВ а ОРСИСМУ СВИДЕПЙЬС 1 ВУ Союз Советских Социалистических Республик//С 211/77/00 присоединением заявкиосударственный комитет авета Мнннстрав СССР) Приорите 43) Опубликовано 30.06,78, Бюллетень2445) Дата опубликования описания 29.06.78Авторытзобретени Э. А. Изергина, О. Т. Ан . Станишевский и И, Г. Красного Знамени научноемиологии и микробиологии сного Знамени государственный В, И. Ленина М. М, ТимофееваИ. Вотяков, В, ИБелорусскийисследовательБелорусский орд И, В. Брускова Тыворский, Л. дреева,Тищенко 1) Заявители рдена Трудовогокий институт эпидна Трудового Круниверситет им.ОКС Ие,За-ДИМЕ Л-ПИПЕРИДОН ИРУСНУЮ АКТИВ 1НОС Известные вирусные ингибиторы характериуются недостаточно высокими интенсивнотью действия и величиной химиотерапевтичекого индекса. относится к синтезу биологи- веществ, в частности к синтеЗе-ацетоксие,За-диметил-беил-пиперидона, обладаюусной активностью.соли аммония, например диметилнафтиламмонийхлорид, тором кишечных вирусов 111. же, что производные пипериЗ-окси,3-диметил-б-арил- дят применение в качестве ин - улучшени расширени на живой ор при примен идона, а име За-диметила формулыЦель изобретения щей активности и средств воздействи Это достигается производного пипер лата Зе-ацетоксисифенил-пиперидоингибируюарсенала ганизм.нии нового но йодмети- -о-бензилокв 12 сн,-Д н, - с - осн гибитор обладйвовирусным эфствующим.анного соединеный и проти с сущ ия ука1 ида в 10 25 5 - 10 С ими 25 мл метаноле.при 10 С шие крис 30 ным мета 0 мл метано пер емешива 15%-ного раРеакционну в течение 1 - аллы, промы иолом и кри Предлагаемыи виру ет более выраженным фектом по сравнениюТехнология получен ния следующая, К раствору 0,50 г м сирана и 0,36 г моль ль 2-метил-ацетилок- -бензилоксибензальдеИзобретение чески активных зу йодметилата о-бензилоксифен щего противовир Известно, что метилцетил - а являются ингиби Известно так дона, например пиперидон, нахо гибитора вирусола при охлаждении до ии приливают порция- створа едкого натра в ю смесь выдерживают 2 ч, отделяют выпаввают их 50%-ным водталлизуют из изо-про536676 С 22 25 О 4Вычислено, %:3,82,Раствор 0,01 г моль ацетата пиперидона в10 мл свежеперегнанного йодистого метилавыдерживают в течение 40 - 48 ч, осадок йодметилата отделяют и промывают смесью гексан-изо-пропанол. Получают йодметилат Зеацетоксие,За-ди метил-бе-о-бензилоксифенил 4-пиперидона в виде белых кристаллов с вы 10 ходом 90%т. пл. 14 С.Найдено, %: М 2,58.С 23 Н 28 Ь 1041.Вычислено, %: Х 2,75.Антивирусную активность полученного сое 15 динения определяют в отношении кишечныхвирусов ЕСНО 6, Коксаки В 4 типов, В опытах используют 100 ЦПД 5 о в 0,1 мл вируса напробирку.Исследование проводят на пассируемых20 кожно-мышечных клетках эмбриона человекаи клетках Н по снижению инфекционной активности вируса.Пассируемые кожно-мышечные клетки эмбриона человека выращивают на среде, состо 25 ящей из 5% гемогидролизата с 10% бычьейсыворотки, используют пробирочные культуры на 3 - 4 сутки роста с посевной дозой300000 - 200000 в 1 мл.Геревиваемые клетки г 1 выращивают на30 2,5%-ном гемогидролизате с 10% бычьей сыворотки. Культуру клеток берут в опыт на 2 -3 сутки роста при посевной дозе 100000 клеток на пробирку, В качестве поддерживающейсреды применяют 5%-ный гемогидролизат.35 Соединение йодметилат ацетата Зе-оксие,За - диметил - 6 е - о-бензилоксифенилпиперидонаоказывает вирусингибирующее действиев концентрациях 10; 5,0; 2,5; 1,0; 0,5 мкг/мл.Инфекционная активность вируса типа ЕСНО46 6 при данных концентрациях снижается на6,81; 6,81; 6,81; 6,15; 1,31 1 ТЦД 53(3,4 соответственно, В трех первых дозах отмечается полХарактер действия Режим обработки вируса типа ЕСНО 6 снижение контроль опыт соединения Введение 100 ЦПДао от вируса на культуру ткани йосле предварнтельной обработки ее соединением в течение 2 ч 6,75 Профилактическое 6,75 Инкубация 0,1 мл.цельного вируса. в присутствии препарата, 2 ч при 37 С 5,25 В ирулнцидное 5,0 Адсорбция 100 ЦПД 58 о 1 вируса в присутствии препарата, 1 ч при 37 С 6,5 6,75 0,25 На стадии адсорб- цин Препарат вносят на клетки после адсоРбЦин 100 ЦПД 5 о о т виРУса6,75 6,75 На стадии репро- дукции 3панола, Получают 2-метил-о-бензилоксифепил,2-эпокси-пентен-З-он в виде бесцветных кристаллов с выходом до 62%, т. пл.69 С,Найдено, %: С 77,29; Н 5,94..18 г 18 О 3.Вычислено, %: С 77,55; 1-1 6,12.Раствор 0,16 г моль 2-метил-о-бензилоксифенил,2-эпокси-пентен-З-она и 0,20 г моль метиламина в 700 мл изо-пропанола выдерживают при 18 - 20 С в течение 40 - 48 ч, изопропанол отгоняют, остаток при охлаждении проточной водой подкисляют 5% -ной серной кислотой до рН 2 - 3 и экстрагируют непрореагировавшее исходное соединение эфиром. Водный слой обрабатывают насыщенным раствором бикарбоната натрия до прекращения выделения углекислого газа, продукт реакции экстрагируют эфиром и объединенные эфирные вытяжки сушат сульфатом магния. Остаток после отгонки эфира кристаллизуют из смеси изо-октан - изо-пропанол и получают Зе-оксие,За - диметиле-о-бензилоксифенил-пиперидон в виде белых кристаллов с выходом 83%, т, пл. 108 С.Найдено, %: К 4,16.С 20 Н 23 ХОЗВычислено, %; Х 4,31.Раствор 0,03 г моль пиперидона в 30 мл хлористого ацетила выдерживают при 18 - 20"С в течение 40 - 48 ч, разбавляют 300 мл сухого эфира, выделившийся осадок отделяют декантацией и растворяют в 50 мл воды. Продукт реакции выделяют аналогично указанному действием бикарбоната натрия и экстракцией эфиром, Эфирные вытяжки сушат сульфатом магния и .остаток после отгонки эфира кристаллизуют из смеси гексан-изопропанол, Получают Зе-ацетоксие,За-диметиле-о-бензилоксифенил-пиперидон в виде белых кристаллов с выходом 51%, т, пл. 69 С.Найдено, %: Х 3,98. Титр репродуцированного вируса в 1 я ТЦД ц,.ГЪ сн, - с - о+- оЯо снзз 15 Составитель в, Навина Редактор П. Горькова Корректор О. Тюрина Техред И. Михайлова Заказ 1258/5 Изд.520 Тираж 568 НПО Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва; Ж, Раушская наб., д, 4/5Подписное Типография, пр. Сапунова, 2 ное отсутствие репродукции вируса, Полученные результаты показывают, что терапевтический индекс предлагаемого соединения равен 20.Репродукция вируса Коксаки В 4 в присутствии указанных концентраций снижается на 4,87; 4,87; 4,87; 3,62; 1)87 1 д ТЦДзоге,ьИзучают профилактическое действие соединения на клетки, его впрулицидпое свойство. Определяют действие соединения на этапы взаимодействия вируса с клеткой - адсорбцию и репродукцию вируса. Соединение исследуют в концентрации 6 мкг/мл.Полученные результаты приведены в таблице.При изучении действия соединения на синтез РНК и белка в клетках культуры ткани, инифицированных вирусом ЕСНО 6 (по включению Н-уридина и С 4-лейцина) выяснено, что соединение подавляет вирусиндуцированный синтез РНК более чем на 75%, а на синтез белка в инифицированных клетках соединение не влияет.Представленные данные свидетельствуют о том, что предлагаемый препарат не обладает профилактической и вирулицидной активностью, Антивирусное действие определяется на стадии репродукции вируса, конкретно на вирусиндуцированный синтез РНК.5Ф о р мул а изо бр етенияИодметилат Зе-ацетоксие,За-диметиле-обензилоксифенил-пиперидона формулы проявляющий противовирусную активность. 20 Источники информации,принятыс во внимание при экспертизе1, Авторское свидетельство СССР381684,М. Кл. С 12 К 7/00, 1973.2, Авторское свидетельство СССР380131,25 М. Кл. С 12 К 7/00, 1973.