Способ определения сенсибилизации организма к билиарным антигенам

(5 ОСУДАРСТ ЕДОМСТВ ГОСПАТЕН ЕНИ цинскии институт и Бульда, А, В.Федорич пидемический гепатит, й сессии института виру- кого. М., 1962, с.16-18. ДЕЛЕНИЯ СЕНСИБИИЗМА К БИЛИАРХЫМ. ления сенсибилизации ным антигенам относит- делу иммунологической изобретения - повы шем обВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕО СССРТ СССР)ОПИСАНИЕ ИЗОБ АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(21 4918541/14 (22 12,03.91 (46 15,03.93. Бюл. (71) Киевский мед А,А,Богомольца (7 ) Т.Д.Никула, В,И АСзинцицкий (5 Фомий Д,Х. Э Те,докл. ХУ научно со огии им. Иванов (54) СПОСОБ ОПР-Ц-. АТИГЕНАМ (57) Способ опред организма к билиар ся к медицине, к ра диагностике. Цель Изобретение относится к частности к разделу иммуноло агностики сенсибилизации орга лирным антигенам,Целью изобретения является повышени 1 е точности способа за счет выявления се сибилизации к билиарным антигенам в от ельной желчной кислоте,Способ осуществляется следующи раом,При постановке реакции с желчью 1 ча ть сыворотки крови смешивают с 0,3 част ми желчи для каждой фракции (пузырной и еченочной) желчи в отдельности. При пост новке реакции с желчными кислотами оп еделяют дозы реагентов с использованием реакции потребления комплемента, которые составляют для: дезоксихолевой кислоты 1;2 (50 мг кислоты + 3 мл изотоничефкого раствора хлорида натрия, небольние точности способа за счет выявления сенсибилизации организма к билиарным антигенам в отдельной желчной кислоте.Сущность заключается в том, что инкубируют сыворотку крови с цельной желчью и с каждой из желчных кислот в отдельности, проводят количественную оценку связывающей способности иммуноглобулинов основных классов сыворотки крови с желчью и желчными кислотами путем установления процентного соотношения суммарных иммуноглобулин-антител к суммарным иммуноглобулинам и при его значении от 3,2 до 9,4 для любой из желчных кислот или цельной желчи устанавливают наличие сенсибилизации организма к соответствующей желчной кислоте или цельной желчи, 3 табл. 3 шой осадок); холевой кислоты 1;2 (50 мг кислоты+ 1 мл изотонического раствора хлори. да натрия); литохолевой кислоты 1:16 (50 мгкислоты + 5 мл изотонического раствора 00 хлорида натрия, небольшой осадок); глико- С) холевой кислоты 1:32 (50 мг кислоты + 1 мл с,) изотонического раствора хдорида натрия), (Д Разведение антигенэ подбирают таким об- ( ) разом, чтобы в нем проявились лишь начальные антикомплементарные свойства, если они имеются. Кроме того, создаются две контрольные пробы, одна из которых содержит 1 часть сыворотки крови и 0,3 ча- ф сти изотонического раствора хлорида натрия, а вторая - 1 часть изотонического раствора хлорида натрия и 0,3 части желчи или 0,3 части найденного разведения для каждой кислоты в отдельности, Пробы инкубируют при 37 С в течение 1 ч, затем центрифугируют при 8000 об/мин 20 мин. После осажде1802332 20 25 30 40 45 50 55 3ния центрифугированием образовавшихся комплексов энтиген-антитело определяют связавшиеся с антигеном иммуноглобулинантитела по разнице между суммарным количеством, иммуноглобулинов сыворотки крови в цельной желчи либо в отдельной желчной кислоте, инкубированных (сыворотка и желчь) раздельно, и количеством иммуноглобулинов сыворотки крови и желчи, либо отдельной желчной кислоты, инкубированных вместе, причем указанное определение проводят для каждого класса иммуноглобулинов, например, при помощи реакции преципитации в геле методом радиальной иммунодиффузии. Указанное определение проводят для каждого класса иммуноглобулинов, Затем высчитывают показатель процентного соотношения суммарных иммуноглобулин-антител к суммарным иммуноглобулинам и при его значениях от 3,2 до 9,4 для любой из желчных кислот или цельной желчи устанавливают наличие сенсибилизации организма к соответствующей желчной кислоте или другим компонентам желчи.П р и м е р. Больной Н., 45 лет, Поступил с жалобами на периодически возникающее чувство тяжести в правом подреберье, сопровождающееся зудом и лихорадкой, При проведении традиционных методов исследования (трехмоментного дуоденального зондирования и внутривенной контрастной холецистографии) патологических изменения со стороны желчного пузыря и желчевыводящих путей не выявлено, Общий анализ крови: гемоглобин 148 г/л; эритроциты 4,7 х х 10 в 1 л; цветной показатель 0,94; тромбоциты 280 10 в 1 л, лейкоциты 6,0 10 в 1 л; палочкоядерные нейтрофилы 2 О; сегментоядерные нейтрофилы 68 О/; энзинофилы 5 О; базофилы 1 лимфоциты 20/,; моноциты 4 О/; скорость оседания эритроцитов 8 мм/ч, Проведено определение сенсибилизэции к желчным кислотам и другим компонентам желчи, Для этого использовали сыворотку и кровь больного, Определяли связавшиеся с антигеном иммуноглобулин-антитела следующим образом: в две пробирки (опытнуюи контроль, 1) наливали по 0,15 мл сыворотки крови, а в 3-ю пробирку (контроль 11) - такое же количество изотонического раствора хлорида натрия, Антиген в объеме 0,05 мл добавляли в опытную пробирку в контроль 11, а в контроль - такое же количество изотонического раствора хлорида натрия. Разведения анти- гена, как было указано выше, подбирались таким образом, чтобы в нем,проявлялись лишь начальные энтикомплементарные свойства, если они имелись, Содержимое пробирок смешивали, инкубировали в течение 1 часа при 37 С, затем центрифугировали при 8000 об/мин, После осаждения центрифугированием образовавшихся 5 комплексов антиген-антител определялисвязавшиеся с антигеном иммуноглобулинантитела по разнице междусуммарным количеством иммуноглобулинов в сыворотке крови и антигене, инкубированных раз дельно, и количеством иммуноглобулиновсыворотки крови и антигена, инкубировэнных вместе, причем указанное определение проводили для каждого класса иммуногл обул ин о в (см.табл,1).15 В табл.2 представлено количество сывороточных иммуноглобулинов, определенных при помощи реакции преципитации в геле методом радиальной иммунодиффузии (в г/л),Расчет показателя процентного соотношения суммарных иммуноглобулин-антител к суммарным иммуноглобулинам приведен в табл.3.На основании полученных данных была определена сенсибилизация организма больного к холевой кислоте, а также к печеночной пузырной желчи в целом, причем к холевой кислоте в большей степени. После проведенного трехнедельного курса специфической гипсосенсибилизирующей терапии самочувствие больного нормализовалось.Эффективность предлагаемого способа по сравнению с прототипом заключается в повышении точности определения сенсибилизации организма к билиарным антигенам в количественном выражении (в прототипе использован менее точный качественный метод), Предложенный способ в отличие от прототипа, обеспечивает возможность дифференцировки сенсибилизации к отдельным билиарным антигенам.Формула изобретения Способ определения сенсибилизации организма к билиарным антигенам, включающий инкубацию сыворотки крови с желчью того же лица, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности способа за счет выявления сенсибилизации к отдельной желчной кислоте определяют количественное содержание иммуноглобулинов классов А, 6, У и иммуноглобулин-антитела к ним в цельной желчи и в отдельной желчной кислоте, далее высвечивают показатель процентного соотношения суммарных иммуноглобулин-антител к суммарным иммуноглобулинам и при значении его 3,2 - 9,4 для любой из желчных кислот или цельной желчи определяют наличие сенсибилизации организма к билиарным антигенам.Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Уж л.Гагарина, 10 Заказ 847 ВНИИПИ Г ВТираж Подписноеарственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5