Устройство для проведения реакции агглютинации

)5 О 01 й 33/5 ЕТЕНИ Ы ОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕВЕДОмстВО сссРГОспАтент сссР) ОПИСАНИЕ ИЗОК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬ(56) Авторское свидетельство СССР 133960, кл. 6.01 й 33/53, 1986.(54) УСТРОЙСТВО ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ РЕАКЦИИ АГГЛ ЮТИ НАЦИИ(57) Использование: в вирусологии для идентификации и индикации вирусов в реакции агглютинации. Сущность изобретения: устройство содержит полистирольную панель 8 с расположенными параллельными рядами лунками, платформу 1 из полимерного материала, установленную на четырех вертикальных стойках и источник магнитного поля, выполненный в виде пластины, расположенной под платформой и закрепленной посредством подвижных резиновых втулок 5 на стойах, при этом в платформе выполнены отверстия, соосные лункам панели, и в каждом из отверстий установлена пенопластовая пробка с осевым металлическим штырем 4, верхним концом 7 прилегающим к дну панели, 2 табл., 3 ил..Изобретение относится к медицинской технике и может быть использовано в вирусологии для идентификации и индикации вирусов в реакции агглютинации в материале от клинически здоровых лиц, больных, а также в образцах окружающей среды и т.п.Целью изобретения является создание оригинального устройства для проведения реакции агглютинации (выполненной в различных вариантах - на твердой фазе, в планшетах микротитратора Такачи и т,п.), где в качестве твердотельного носителя используют магниточувствительные,носители, позволяющие сократить сроки учета до 1 ч, вместо 3 - 5 ч или на следующий день, после внесения диагностикума.Это достигается тем, что после внесения диагностикума в лунки, полистирольную панель устанавливают по периметру на специальное устройство, индуцирующее магнитное поле силой 30,0 +. 2,0 Т (тесла) в центре для каждой лунки, Под воздействием магнитного поля несвязавшиеся магнитные сорбенты оседают на дно. В случае связывания носителя специфическим анти- геном (последний зафиксирован антителами на твердой фазе) осеДание магниточувстви тельных частиц на дно лунки не наблюдается,На фиг.1 - 3 изображено предлагаемое устройство,Устройство для проведения реакции эгглютинации состоит из следующих частей; 1 - платформа.из полимерного материала, установленная с помощью крепления 6 на четырех вертикальных стойках 2, сделанных из материала, не обладающего магнитными свойствами; 3 - источник магнитного поля, выполненный в виде пластины, расположенной под платформой и закрепленной посредством подвижных резиновых втулок 5 на стойках, при этом в платформе выполнены отверстия, соосные слунками панели, в каждом из которых установлена пенопластовая пробка с осевым металлическим штырем 4, верхним концом 7 прилегающим к дну панели,Магнитное поле усиливают или уменьшают путем перемещения магнитной пластины 3 вверх или вниз по длине стоек. Для проведения реакций в полистирольной панели 8, ее устанавливают на платформу устройства таким образом, чтобы металлические штыри 4 были соосными с лунками панели. Предварительно, с помощью аппарата Ш 1 - 8 определяют силу магнитной индукции на конце верхней части штырей, которая должна составлять 30,0 + 2,0 Т(тесла). Время нахождения полистирольной па- Р45 50 55 Панели выдерживают 1,5 ч при 37 С с последующим помещением полистирольной панели на устройство для оценки реакции коагглютинации (на 15 - 20 сек) и окончательный учет реакции. Предварительно, перед установлением планшеты на устройство с помощью измерителя магнитной индукции (Ш 1-8) измеряют равномерность и силу магнитного поля на верхних концах металлических штырей, Интенсивность магнитной индукции должна быть равномерна и составлять 30,0 + 2,0 Т (тесла), Результаты анализа определяют визуально, обязательно с учетом контролей. по 4-х крестовой шкале,нели под воздействием магнитного поля составляет до 20 сек, Результаты реакции учитывают только при прохождении контролей по 4-х крестовой шкалеП р и м е р. Выявление ротавирусногоантигена в копрофильтратах больных острым гастрознтеритом, а также в образцах сточных вод и воды открытых водоемов в реакции коагглютинации на твердой фазе.10 . В полистирольную панель с О-образными лунками (производство ПО "Ленмедполимер", ТУ 04-2-278-79) вносят по 75 мкл асцитной жидкости против ротэвируса, разведенной 0,01 М ФСБ 1:200. Титр асцитной 15 жидкости (иммуноглобулинов) крысы, имму-.низированной ротавирусом в реакции торможения гемагглютинации равен 1:480. В контрольнь 1 е лунки вносят по 75 мкл нормальной сыворотки, не содержащей антите ла к ротавирусам в тех же разведенияхПанель инкубируют при 37 С в течение 2 - .3ч. Затем постукиванием панели по фильтровальной бумаге удаляют иэ лунок несорбированные антитела, с последующим 3-х 25 кратным промыванием 0,01 М ФСБ (рН 7,2 -7,4) с 0;054 твин, После этого в лунки вносят по 75 мкл раствора 200 копрофильтрэтов на 0,01 М ФСБбольных гастрознтеритом.Для.контроля используют копрофильтраты, 30 суспенэии фекалий больных такой же концентрации, содержащие и не содержащие рота- вирусные антигены. Используют также вкачестве контроля лизаты незараженной культуры клеток и культуральные антигены 35 ротавируса обезьян. Панель с исследуемымматериалом и вышеуказанными контролями инкубируют 1 - 2 часа при 37 С. Несвязавшиеся антигены и посторонние примеси удаляют 3-х кратным (2 - 3 мин) промыванием ФСБ, 40 с 0,05% твин. Затем в каждую лунку вносят по 50 мкл диагностикума, представляющего собой магнитные частицы, заключенные в целлюлозную оболочку и сенсибилизирован н ые иммуногл обул и на ми к ротэви русу.Оценка реакциикоагглютинациии ототип Результатанализа редложенная технология проведения реакциикоагглютинации полож. от и ат. 16 41 Положи- тельные ценка реакции коагглютИнации с помощью разработанного устройства (оригинал) 86,9 88,9 87,1 274 Отрица- тельные П р и м е ч а н и е; Чувствительность =(прототип и оригинал положительные/+ прототип отрицательные) х 100,Всего было исследовано в реакции коагглютинации с использованием предло жЕнного устройства и устройства-прототипа 333 пробы, в т.ч. 49 проб фекалий, 284 образца проб водных объектов (144 - сточные воды, 120 - вода открытых водоемов, 20 - образцы проб питьевой воды). В табл.1 показано сравнение чувствительности и специфичности определения ротавирусного антигена в реакциях коагглютинации, реализованных с помощью известного и предложенного устройств.В табл.2 показано сравнение чувствительности и специфичности определения ртавирусного антигена в реакциях коагглютинации, реализованных с помощью известного и предложенного устройства методом иммуноферментного анализа (И,ФА).Предлагаемое устройство для проведения реакции агглютинации отличается оригинальной конструкцией и позволяет значительно сократить сроки учета реакции агглютинации на твердой фазе до 2-хвместо 24 ч,Формула изобретения5 Устройство для проведения реакции агглютинации, содержащее полистирольнуюпанель с расположенными параллельнымирядами лунками, отл и ча ю щ ее с я тем,что, с целью повышения производительно 10 сти за.счет сокращения времени оценки результатов реакции, оно дополнительноснабжено платформой из полимерного материала, установленной на четырех верти кальных стойках, и источником магнитного15 поля, выполненным в виде пластины, расположенной под платформой и закрепленнойпосредством подвижных резиновых втулокна стойках, при этом в платформе выполнены отверстия, соосные с лунками панели, в20 каждом из отверстий установлена пенопластовая пробка с осевым металлическимштырем, верхним концом прилегающим кдну панели,1802331 ям при ГКНТ СС Тираж Подписн твенного комитета по изобретениям и откр 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5роизводст издательский комбинат "Патент", г, Ужгоро агарина, 101 Редактор В.Трубченк аказ 847 ВНИИПИ Гос Составитель К.Спцехред М.Моргента орректор М,Самборская