Штамм дрожжей torulopsis apicola вкпм y-566-продуцент маннита

(541.А 1 СОА ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ ССПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫ А ВТОРСКОМУ С 8 ИДЕТЕЛЬСТВУ 4040760/31-1309.12.8523.07.87. Бюл. Мф 27Институт микробиологии АМ.В. Залашко, Г.А. Салохфедор и М.М. Грушенко663.15(088.8) Патент США У 3427224, кл 969.торское свидетельство СС 3543, кл. С 12 Р 7/18, 1 ШТАММ ДРОЖЖЕЙ ТОМАШ.ОРЯ 1 ПМ У- ПРОДУЦЕНТ МА 50 4 С 12 М 1/16, С 12 Р 7/18//, //(С 12 М 1/16, С 12 К 1:88(57) Изобретение относится к микробиологической промьппленности и касается нового штамма дрожжей, активно продуцирующего маннит, который может быть использован в различных отраслях народного хозяйства. Целью изобретения является получение нового штамма, обладающего высокой синтезирующей активностью экстрацеллюлярного маннита эа короткий период времени, Штамм ВКПМ У(БИМ 0-251) выделен из малины, перетертой с ром, и способен образовывать до маннита от использованного источника углерода. 1 табл.13 с 1-ГлюцитолСалицинЙ ь-Молочная кислота (слабо) Янтарная кислота Лимонная кислота ИнозитЭритритРаффиноэаЙ-Маннит д-Ксилоэа,-АрабиноэаЙ-Арабиноза Глюкоза Галактоэаь-Сорбоэа д-Рибоза1-РамнозаЭтанолГлицеринРибитолИнулин СахарозаМальтоэаЦеллобиоэаЛактозаМелибиозаГалактиол Дополнительно проверяемые углерод ные соединения: К лимонно-кислый одно замещенныйСа молочно-кисльп,сла -Иа янтарно-кислыйИа лимонно-кислый трех замещенный К лимонно-кислый двух замещенный бо) 1 13250Изобретение относится к микробио-логической промышленности и касаетсянового штамма дрожжей, активно продуцирующего маннит, который может бытьиспользован в различных отраслях народного хозяйства.Целью изобретения является получение нового штамма дрожжей, обладающего высокой синтезирующей активностью экстрацеллюлярного маннита за 1 Оболее короткий период времени,Штамм дрожжей ВКПМ -566 (БЮ"0-2511) выделяют из малины, перетертойс сахаром, следующим путем,В колбы Эрленмейера объемом 15250 мл с 100 мл среды следующего состана, Ж: глюкоза 5,0; КН РО О,1;М 880 д 0,5; СаС 1 0,01; ИаС 1 0,01;дрожжевой автолизат 0,5, рН 5,0, вносят 10 мл малины, перетертой с сахаром, и выдерживают на качалках при28 С 6 сут. Начиная с третьих сутокпроводят высевы на чашки Петри с сусло-агаром (37 агара, рН=4,0). Послемногократных пересевов выделяют чистую культуру дрожжей. Выделенныйштамм идентифицирован до вида. Прииндентификации дрожжей до рода используют руководство И.П. Бабьевой,а при определении до вида - руководства ВагпеС и Ьо 1 Лег,Полученный штамм обладает следующими морфолого-культуральными и физиолого-биохимическими признаками.Морфолого-культуральные признаки. 35Вегетативные клетки: в жидком суслеопри температуре культивирования 28 С Рост на среде без витаминов слабый, без пиридоксина растет хорошо без тиамина растет медленно. на третьи сутки клетки овальные или круглые. Размеры клеток варьируют в пределах (1,5-3,0)(3,0-6,5). Образует узкое кольцо, пленки не образует. В 30-суточной культуре - остатки узкого кольца, пленка не образуется.Вегетативные споры: артроспоры и хламидоспоры не обнаружены. Баллистоспор не образует.Рост на пластинках с кукурузным агаром: псевдомицелия не образует, истинного мицелия не образует. Наблюдения ведут аэробно и анаэробно.Рост на сусло-агаре: у 3-суточного штриха культуры белый цвет, мягкий, блестящий и гладкий, а у 30-суточного штриха цвет от бледно-белого до кремового, блестящий или слегка матовый, гладкий или слегка сморщенный по краю, Гигантская колония (после 30 сут) 22 см почти круглая, поверхность матовая, гладкая, профиль колонии слегка изогнутьй цвет бледно-белый (до кремового оттенка). Гигантская колония (1 год) 44 см круглая, поверхность матовая, профиль плоский, слегка бугристый в центре, цвет светло-коричневый.Физиолого-биохимические признаки. Оптимальная температура культивирова о ния 28 С, максимальная 37 С (при культивировании на среде с 107 глюкозы).Осмотолерантность: культура хорошо растет на средах, содержащих 10, 20 и 307 глюкозы. На среде с 603 глюкозы при 28 С рост не наблюдается.Ассимиляция источников углерода: При изучении ассимиляции источников углерода и роста культуры на среде без витаминов используют синтетиГлюкоза,г/лг/л Время Условия культивиВыход маннита куль- тиви- роварования 7 от использованной глю козы ния 30 67,47 79,50 12,3010,О 96 Колбы на качалке 72 Лабораторный фер- ментер 30 50 12,50 65,19 79,70 96 Колбы на качапке 50 7,50 72 Лабораторный фер- ментер 100 15,63 60,70 96 Колбы на качалке ВНИИПИ Заказ 3021/24 ТиРаж 499 Подписное Произв.-полигр. пр-тие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 3 13250 ческие среды, рекомендованные Бабьевой И.П. и Голубевым В.И.Условия и состав сред для хранения штамма. Штамм хранится на агариэованном сусле (ЗХ агара, 6-7 Б)оюрН 6,0, при 4-5 С.Условия и состав среды для размножения штамма. Штамм культивируется на агаризованном сусле (37 агара, 6-7 Б), рН 5,0-6,0 при 28 С. 10Условия и состав среды для ферментации. Применяют среду следующего состава, 7: глюкоза 5,0; КНРО 4 0,1; МяЯО 0,5; СаС 1 0,01; МаС 1 0,01; дрожжевой автолизат 0,05, рН 5,0 (6). 5П р и м е р 1, Штамм Тогп 1 оря.я арсо 1 а выращивают в глубинных условиях на качалке (200 об/мин) в колбах Эрленмейера на 500 мл, содержаниеосреды 100 мл, при 28 С. Для выращи вания используют среду следующего состава, Х: глюкоза 3,0; КН Р 04 0,1; МАЗО 0,5; СаС 1 0,01; ИаС 1 0,0; дрожжевой автолиэат 5,0, рН 5,0.Посевной материал выращивают 3 сут 25 на качалке в 200 мл колбах Эрленмейера,содержащих 100 мл среды того же состава. Засев производят 3-суточной культурой дрожжей, выращенных на скошенном сусло-агаре, 30Спустя 96 ч биомассу дрожжей отделяют центрифугированием. Фильтрат деионизируют на ионообменных смолах,73 4концектрируют под вакуумом до получения 25-307-ного раствора маннита,добавляют 4-6-кратный объем подогретого этанола и оставляют кристаллизоваться на ходу. Выпавшие кристаллыотделяют центрифугированием илифильтрованием. Выход составляет67,477 от использованного источникауглерода. П р и м е р 2. Условия культивирования, состав среды и извлечение маннита аналогичны примеру 1. Культивирование проводят в ферментере емкостью 3 л (объем среды 500 мл). Интенсивность,аэрации 4 об/л вч. Выход маннита составляет 79,73 от использованного источника углерода, Время ферментации 72 ч.П р и м е р 3. Условия культивированин, извлечение маннита аналогичны примеру 1. В качестве источника углерода используют мелассу 50 г/л. Выход маннита 677 от использованного источника углерода. Время культивирования 96 ч.Свойства штамма приведены в таблице. Формула изобретения Штамм дрожжей Тогц 1 оря 1.я ар 1 со 1 аВКПБ У- продуцент маннита.