Штамм дрожжей lеuсоsроridiuм gеliduм-продуцент липидов с высоким содержанием ненасыщенных жирных кислот

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛ ИСТИЧЕСНИХ 9) 01) УБЛИН 2 Р 7 4 С 12 М 1/1 ОБРЕТЕН ЛЬСТВУ л 57) Изобрете иологической к микро- и и пред относи мышлен ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИИ ОПИСАНИЕ ИН АВТОРСКОМУ СВИ(71) Всесоюзный научно-исследовательский институт биосинтеза белковых веществ, Московская сельскохозяйственная академия им, К. А, Тимирязева и МГУ им. М. В, Ломоносова(56) Прикладная биохимия и микробиология. 1982, т, 18, У 5, с. 622-626,Известия АН СССР, Серия биологическая, 1984, В 6, с, 938-941,Я, ой адгхсц 1 ььге апй ассой сЬешь. -зсгу, 1948, ч, 35, У 1, р, 59-65.Авторское свидетельство СССРУ 1212053, кл, С 12 Н 1/16, 1985,(54) ШТАММ ДРОЖЖЕЙ 1,Е 1)СОБРОК 1 Р 113 М СЕЫШЗМ - ПРОДУЦЕНТ ЛИПИДОВ С ВЫСОКИМСОДЕРЖАНИЕМ НЕНАСЫЩЕННЫХ ЖИРНЫХ КИСЛОТ ставляет собой новый штамм дрожжей 1.ецсозрогЫ 1 цш 8 е 1 хйцш ВКПМ Упродуцент липидов с высоким содержанием ненасыщенных жирных кислот. Предлагаемый штамм при выращивании на аэрируемой питательной среде, содержащей непищевое сырье - этанол в качестве источника углерода, а также источники азота, фосфора, минеральные соли и микроэлементы, позволяет получить биомассу, содержащую до 607 липидов, в состав которых входит 907 (к сумме кислот) ненасыщенных жирных кислот, иодное число этих липидов (161) превышает иодное число подсолнечного масла (120), К достоинствам липидов этого штамма относится высокое содержание триглицеридов (607. к липндам), практически полное отсутствие жирных кислот с нечетным чисом атомов углерода, Кроме того, предлагаемый штамм высокопродуктивен, обладает экономическим коэффициентом использования этанола - до 757., Предлагаемый штамм может быть использован как продуцент липидов, способных заменить растительные масла, и кормового белка из этанола.13 Морфологические признаки. Клеткиопри 12 С на жидком сусле. овальные,единичные или парами Размер клеток(2,2-5,9)х(4,8-9,2) мкм, Пленки икольца не образуют образуют осадок,через месяц - осадок и толстые мицелиальные кольца,Культуральные признаки. На солодовом сусло-агаре размер клеток (2,25,9)х(3,8-13,5) мкм. Рост мягкий,полублестящий, гладкий, перифериясильно,мицелиальная и морщинистая,Мицелий истинный, разветвленный срегулярно встречающимися септами наконцах, много терминальных и интеркалярных клеток, единичных, парами,короткими цепочками, Образует хламиИзобретение относится к микробиологической промьппленности и представляет собой новый штамм.,дрожжей с высоким содержанием липидов высокой с 1 епени ненасыщенности, способных по своему составу служить заменителем растительного масла, используемого, в частности, для технических целей,Цель изобретения - получение штамма, обладающего при росте на этаноле высоким содержанием липидов с высокой степенью ненасьпценности.Поставленная цель достигается селекцией нового штамма дрожжей, полученного в результате многоступенчатого отбора высокопродуктивных вариантов в условиях непрерывного культивирования на среде с этанолом.Штамм дрожжей ЬецсоярогЫгцш яе 11- Йцш выделен из дерново-подзолистых почв. Почвенную суспензию высевают на сусло-агар с молочной кислотой (4 мг/мл), инкубируют в холодильнике при 5 С 30 сут и выделяют развившийся тип колонии дрожжей. Затем проверяют способность расти на среде с этанолом, В результате отбирают штамм облигатно-психрофильных дрожжей, который идентифицирован по определи.телю "1 еаягя, а гахопошхс ягцйу" ей Ьу Ьоййег 19 О, как относящийся к виду Ьецсо ярог Ыцш яе 1 Ыцш.Полученный штамм ЬецсоярогЫхцш яе 1 Ыцш депонирован во Всесоюзной коллекции промышленных микроорганизмов под номером ВКПМ У. Штамм хранится также в коллекции микроорганизмов института ВНИИ синтезбелок под номером ВСБ, Штамм непатоге- НЯНе 355672до-споры размером (5, 4- О, 8) х (б, 513,5) мкм.Физиологические признаки. Ассимилирует глюкозу, сахарозу, галактозу,5Ь-арабинозу, ксилозу, раффинозу, инозит, рамноэу, адонит, сорбит, маннит,сорбозу, рибит, этанол, Сбраживаетсахарозу, глюкозу, мальтозу, Азотно 10 кислый калий ассимилирует, разжижаетжелатину Уреазная активность обнаружена, На безвитаминной среде не растет, Культура способна расти при0-20 С и рН 4,0-6,0. Оптимальные усо15 ловия выращивания при 13-15 С и,рн 5,5,Предлагаемый штамм способен растина стандартных питательных средах,таких как среда "9 М", содержащих источники азота, фосфора в виде солей,а также источник углерода в виде синтезированного этанола. Культура синтезирует биомассу, содержащую до 307белка и до 607. липидов.Аминокислотный состав белка, 7.:аргинин 2,1; гистидин 1,1; лизин4,9; аспарагиновая кислота 8,0; глютаминовая кислота 11,4 треонин 4,1;серин 4, глицин 5,9; алании 5,3;пролин 2,3; цистин 0,9; метионин 1,2;валин 6,2; изолейцин 3,8; лейцин 6,1;тирозин 2,6; фенилаланин 3,1,Жирно-кислотный состав липидов, 7:С , следы; С., следы; С ь о 5,0;С4,9; С 1 б: 1,41 С 1 в.о 08135С 1 ц, 307; С 485; С, 87,Сумма ненасыщенных кислот94,2 мас,7, Теоретическое иодное число 161,5,40 Таким образом, предлагаемый штаммотличается от известного размером иформой клеток, способностью, ассимиолируя этанол, расти при 15 С и рн 5,5,образовывать биомассу с высоким со 45 держанием ненасыщенных жирных кислот.П р и м е р 1, Штамм Ьецсоярог 1- с 1 ьцш яе 1 Ыпп ВКПМ Увыращивают вколбах 750 мл на круговой качалке соскоростью вращения 200 об/мин при ис 50 пользовании питательной среды состава, г/л: этанол 7,8; ИаН 2 РО 7,0;КНРО 4 6,8; ИНН РО 2,0; МАЗО 0,7,Дрожжевой экстракт 0,5. Процесс ведут при температуре культивирования5515 С и рН 5,5. Выход биомассы 80 мас,7.при содержании белка до 15 мас7 илипидов до 757,Зкстрагированные известным способом липиды имеют в своем составеФормула изобретения15 П р и м е р 2, Непрерывное выращивание штамма ЬецсозрогЫ 1.ош ее 1- йиш осуществляют в ферментере емкостью 1 л в составе питательной среды, г/л: КС 1 12,9; МяБОх 7 НО 7,7; РеБО х Штамм дрожжей Ьецсозрогдй 1.цш яе 1 Ышп ВКПМ Т- продуцент липидов с высоким содержанием ненасыщен-.1 ных жирных кислот. Составитель И. ТарееваРедактор И. Горная Техред В.Кадар Корректор А, Обручар Заказ 4018/22 Тираж 499 ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 11 3035, Москва, Ж, Раушская наб д, 4/5(Е к липидам); фосфолипидов 6,5; х 7 НО 0,78; 2 пБОх 7 Н 0 0,44; МпБО хмоноглицеридов 0,31; диглицеридов х 5 НО Оф 041 НзРО+ ,дц 12 мл; акт. ил4,0; многоатомных спиртов 0,4; сте,5 г/л (0,05 мас.7). В качестве исринов 7,0; свободных жирных кислот Б точника углерода используют этанол в20,1; триглицеридов 58,0; восков . количестве 1,5 об,7, Коэффициент ско 0,7; эфиров-стеринов 3,0; теоретичес- рости протока Д = 0,05 при рН 5,5 икое йодное число 161,5 ед. Т -" 15 С, При этом выход биомассыЖирно-кислотный состав: С,д сле- составляет до 70 мас.Е содержаниеды; С следы; С5,0; С 4,9; 10 белка 30 мас.Ж, содержание липидовС. 1,4; С. 0,8; С,. 30,7 60 мас,Ж, содержащих 907. ненасыщенС,. 48,51 С . 8,7. Сумма ненасы- ных жирньйс кислот,щенных кислот 94,2 мас.Х,