Способ получения белкового гидролизата

СОЮЗ СОВЕТСНИХНСССИИВЕИиРЕСПУБЛИК зш А 23 3 3/00 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯН ЕВТСССНСИУ СЕНЕЕТЕВЕСТВУ(56) 1. Степанова Ц,Н. Изучение биохимических свойств трихолизина - протеолитического комппекса ТгдсЬогЬес 1 цш гозецш. Авторефе канд. дис.ф., фГУ, 1977.2. Авторское свидетельство СССР У 860765, кл, А 61 К 37/02, 1979. 801106469 А(54)(57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БЕЛКОВОГОГИДРОЛИЗАТА, предусматривающий фер"ментативный гидролиз эритроцитарного белка ферментом, выделенным избиомассы грибов, о т л и ч а ющи й с я тем, что, с целью улучшения качества гидролизата путем повыщения в нем содержания аминокислот,гидролиз осуществляют ферментативнымкомплексом, выделенным из грибаТгсЬогЬесдцш гозеца, при 40-60 Си рН 10,011064Изобретение относится к медицине,в частности к способу получения белкового гидролизата для парентерального азотистого питания организма.Известен способ гидролиза соединений типа эфиров с помощью протеолитического комплекса - трихолизина,выделенного из гриба Тг 1 сЬоспес 1 цшгозецтп, при рН 8 1 .Данный способ не пригоден для 10получения белкового гидролизатаиз эритроцитарной массы.Наиболее близким к предлагаемомупо технической сущности и достигаемому эффекту является способ получения белкового гидролизата, предусматривающий ферментативный гидролизэритроцитарного белка ферментом,выделенным из биомассы грибов, который заключается в получении белкового гидролизата, где в качестве белкового. сырья используют эритроцитарную массу и гидролизуют ее грибковым ферментом Аспощусез Ргайхе 110при 37 ОС и рН 8,0 до свободных аминокислот 2 .Однако в гидролизате остается ещезначительное количество пептидов,т,е, происходит неполный гидролизбелка, в результате чего количествосвободных аминокислот сравнительно.низкое (79,18 г/л).Цель изобретения - улучшение качества гидролизата путем повышенияв нем содержания аминокислот.Незаменимые 2,10 3,0 Изолейцин 12,6 15,70 12,50 Лейцин Лизин 10, 12 13,6 6,64 Фенилаланин Метионин 2,03 3,16 5,39 Треонин Триптофан Валин 187 11,36 13,67 69 3Так при рН 6-9 глубина гидролизадостигает всего 30-70%, при рН 1090% и при рН 11-14 15-70%.При температуре ниже 40 С общийвыход аминокислот составляет 72,3%,при температуре выше 60 С 68,6%,При интервале температур 40-60 Сглубина гидролиза достигает 90%,Содержание незаменимых и заменимыхаминокислот в белковом гидролизатепредставлено в таблице.Аспарагиновая 1,44 кислота Глютаминовая кислотаГлицин Следы3,2 3,28 Гистидин 0,8г,зг 1,79 0,54 Пр олинСерии 0,12 4 68 0,63 1 40 ЦистинТирозин Поставленная цель достигаетсятем, что согласно способу получения,белкового гидролизата, предусматривающему ферментативный гидролиз40эритроцитарного белка ферментом, вы"деленным из биомассы грибов, осуществляют гидролиз ферментативнымкомплексом, выделенным из грибаоТг 1 сЬоСЬесцш гозецш, при 40-60 Си рН 10,0,45Сущность способа заключается вследующем.Ферментативный,комплекс - трихолизин обладает протеолитическимисвойствамиВыбор значений рН и тем 50пературы гидролиза обусловлен тем,что рН оптимумы у одного и тогоже фермента, определенные в присутствии различных субстратов, неодинаковы,что объясняется тем, что для воз-.никновения связи энзим-субстрат, нетолько энзим но и субстрат должныбыть в диссоцированном виде.Заказ 5652/1 Тираж 589 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 3П р и м е р 1, ьерут 1 л эритро- . цитарной массыгемолизируют 1 л воды, заливают в стеклянный резервуар с автоматической мешалкой 8 л ацетона и 80 мл концентрированно 9 соляной кислоты, маленькими порциями добавляют в ацетон эритроцитарную массу и включают мешалку на 2 мин. Выделившийся при этом белыми хлопьями белок вместе с окрашенным ацетоном 1 р сливают в приемник, который оснащен фильтром, промывают массу чистым ацетоном до полного обесцвечивания, а затем сушат в термостате и просеива" ют через металлические сита, Из полученного белка готовят 27.-ный раствор и проводят ферментный гидролиз с помощью микробного фермента ТгсЬойЬесцв гозеив следующим образом: белок заливают дистиллированной водой и кипятят до полного растворения (15 мин), охлаждают, доводят рН до 10,0, а затем переливают в специальный реактор. Добавляют фермент по весу в соотношении 1:20=о =Ф:С. Гидролиз проводят при 55 С и рН 10,2 в течение 72 ч.К реактору присоединена система фильтров, которая обеспечивает удаление всех нежелательных примесей из гидролизатаАвтоматическое регулирование рН, температуры, а также герметическая фильтровальная система позволяют проводить гидролиз в стерильных условиях. Глубину гидролиза определяют соот.ношением аминного азота к общему, ана аминоанализаторе "Зео 1 1 ЬСАН"определяют качественное и количественное содержание свободных аминокислот.В примере 1 глубина гидролизадоходит до 907. с сохранением всехнезаменимых аминокислот, всего97,44 г/л аминокислот.П р и м е р 2. Способ осуществляютаналогично примеру 1, но при рН9,0 и 40 С. Общий выход аминокислот составляет 80 г/л.П р и м е р 3. Способ осуществляютаналогично примеру 1, но при рН 11,0и 60 ОС. Общий выход свободных аминокислот составляет 79,64 г/л,что не превышает показателя известного способа,Таким образом, предлагаемый способ позволяет вести гидролиз белка до 90 Ж, в то время как в известном способе глубина гидролиза доходит до 80 .Достигнутая глубина гидролиза бел ка дает основание предполагать повышение лечебной эффективности при использовании белкового гидролизата при некоторых патологических состояниях (белковое голодание организма, гипопротеинемия различного происхождения, ожоговая болезнь, гнойно-хирургические заболевания и др,).