Способ выделения белка из белковых гидролизатов

ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз Советскик Социалистическик Республик(51)м. кл,з с присоединением заявки М(23) Приоритет -Государственный комитет СССР по делам изобретений и открытий(72) Авторы изобретения Н.Н.Абрамовская, Г.А.Кураков и А.С.Чеголя Калининский государственный Университ 1 е(54) СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ БЕЛКА ИЗ БЕЛКОВЫХ ГИДРОЛИЗАТОВИзобретение относится к способу выделения белка иэ белковых гидролиэатов животного и растительного сырья и может найти применение в легкой, пищевой, текстильной, фармацев тической промькаленности.Известны способы выделения белка из белковых гидролизатов путем обработки белковых гидролизатов активными сорбентами, например активирован О ными углями, с последующим осаждением белка иэ очищенных гидролизатов 13 .Однако процесс проводят при нагревании в течение довольно длительного времени, для разных гидролизатов и условий гидролиза требуются специальные марки активированных углей.Известны также способы выделения 20 белка из окрашенных гидролиэатов, в которых очистку гидролиэата, с целью его обесцвечивания, ведут обработкой раствора реагентами-осветителями, окисляющими и разрушающими окрашенные 25 примеси. В качестве такого реагента в известных способах используют перекись водорода, обычно обесцвечивагидролиэаты в щелочной среде 2 2Известен способ очистки гидролизатов соевого белка от окрашенных примесей путем обработки соответствующих белковых гидролизатов 30-ОГМ раствором перекиси водорода при 140 С, рН 8 с последующим подкислением и термообработкой гидролиэата при бб С с целью удаления летучих примесей. Осветленный гидролиэат упаривают ьа половину в вакууме, белок осаждают действием осадителя, осадок отделяют фильтрованием 3.Недостаток этого способа состоит в том, что обработку гидролизатов перекисью водорода ведут продолжительное время и при высокой температуре, причем очистка эффективна лишь для ъелочных гидролизатов. Кроме того, в этом способе, как и в остальных известных, очистку гидролизата и осаждение белка из него осуществляют как отдельные стадии процесса выделения белка из гидролизата.Цель изобретения - упрощение процесса и повышение качества выделяемого белка иэ белковых гидролизатов.Поставленная цель достигается путем выделения белка из белоквых гидролизатов, заключающимся в том, что очистку гидролизата и осаждение белка из него ведут путем обработки .ги. дролизатов растворами хлораминов до достижения иэозлектрической точки белка.Предлагаемый способ по сравнению с известными применим к широкому кругу белков, имеющих изозлектричест кую точку как н кислой, так и в щелочной средах; очистка гидролиэата от окрашенных примесей и осаждение белка осуществляется одновременно в одну стадию, в мягких условиях, что обеспечивает ускорение процесса ныделения белка и повышение эффектив ности его очистки. Сравнение известного спОсоба с предложенным, проведенное на гидролизатах биомассы дрож жевых микроорганизмов рода "Сацдда" показывает, что в сравнимых условиях, в кислой среде (рН ( 7), очистка гидролизата с помощью известного способа практически не происходит, гидро лиэат получается темноокрашенным и выделяемый белок имеет темнобурый цвет, степень чистоты очищенного белка снижается до 70-80 против 90- 95, получаемого предлагаемым спосо бом, без дополнительной очистки.П р и м е р 1. 5 г дрожжей рода "Сацдда" гидролиэуют раствором 10 г щелочи в 85 г воды при 100-120 С в течение 3-х ч, После охлаждения гидролизата до комнатной температуры добавляют к нему раствор, приготовленный иэ 3 г хлорамина Б в 5 г концентрированной соляной кислоты и 80-90 г воды, доводя рН гидролиэата до 5. Выпавший осадок, имеющий светло-желтый цвет, отделяют и промывают водой до полного удаления ионов хлора. Белок обрабатывают .смесью гекса этанол-вода в соотношении 80;15:5, а затем ацетоном в аппарате Сокслвта. 40 Получают светло-желтый порошок белка, в то время как белок выделяемый подкислением раствора н отсутствии хлорамина темнобурого цвета. Выход2,0 г. 45П р и м е р 2. 10 г дрожжей рода"Сацд)дац гидролизуют раствором25 г щавелевой кислоты в 65 г водыпри 10-120 С в течение 4-х ч. После50выпавшей в осадок щавелевой кислотыи прибавляют к нему раствор 3 г хлорамина Б в 100 г воды, доводя рНгидролиэата до 5. Выпавший осадокотделяют и промывают водой до полного удаления ионов хлора. Далееочистка производится как и в примере 1. Гидролиэат и выделенный белонпосле добавления хлорамина Б имеетсветло-желтый цвет. Выход 3,5 г.П р и м е р 3. Аналогично при- О меру 2 иэ 10 г дрожжей рода "Сацдда"после обработки кислотного гидролизата раствором, изготовленным иэ 3 гхлорамина Б в 10 г щелочи и 90 г воды, осаждения белка при рН=4 и очистки получают 3,5 г белка снетло-желтого цвета.П р и м е р 4. 5 г казеина гидролизуют раствором 10 г щелочи н 85 воды при 100-120 С в течение 5 ч.оДалее очистку .гидролизата ведут раствором хлорамина Б аналогично примеру 1. Получают белок светло-желтого цвета,П р и м е р 5. 10 г каэеина гидролизуют раствором 25 г щавелевой кислоты в 65 г воды при 100-120 ОС в течение 5-6 ч. Далееочистку гидролизата ведут раствором хлорамина Б аналогично примеру 2. После отделения осадка и очистки получают белок светло-желтого цвета. Выход 7 г.П р и м е р 6. 5 г дрожжей рода "Сацдда" гидролиэуют раствором 10 г щелочи в 85 г воды при 100-120 ОС в течение 3-х ч. После охлаждения до 30 С добавляют раствор, приготовленный иэ 3 г дихлорамина Б в 5 г концентрированной соляной кислоты и 90 г этанола, к гидролиэату, доводя рН до б, Выпавший осадок отделяют и промынают смесью этанол-нода н соотношении 50:50 до полного удаления ионов хлора, Далее очистка гидролизата и выделение проводится так же как н примере 1. Гидролизат и выделяемый белок, после добавления дихлорамина Б имеет светло-желтый цвет.Выход 3 г.П р и м е р 7. Аналогично примеру 5 иэ 5 г казеина после обработки кислотного гидролизата растнором,изготовленным из 5 г дихлорамина Б в 10 г концентрированной НС 1 и 90 г этанола, осаждения белка при рН=5 и очистки получают 3,5 г белка светло-желтого цвета.П р и м е р 8. 10 г дрожжей рода "Сацдда" гидролизуют растнором 25 г щавелевой кислоты н 65 г воды при 100-120 С в течение 4-х ч. После охлаждения гидролизат отделяют от выпавшей в осадок щавелевой кислоты и добавляют в него раствор 5 г дихлорамина ХБ в 95 г этанола, доводя рН гидролиэата до 4. Выпавший осадок отделяют и промывают смесью этанолвода в соотношении 50:50 до полного удаления ионов хлора. Гидролизат и выделенный белок после добавления дихлорамина ХБ имеет светло-желтый цвет, Выход 3,3 г.П р и м е р 9. Аналогично примеру 7 из 10 г казеина после обработки кислотного гидролиэата раствором, приготовленным из 5 г дихлораиина ХБ, 10 г щелочи и 95 г этанола, доведения рН гидролизата до 4-х, осаждения белка и его очистки, получают 7 г белка светло-желтого цвета.763354 Формула изобретения Составитель В.Волкова Редактор Н.Горват Техред А.Ач Корректор Г. Решетник тЗаказ 6572/9 Тираж 495 Подписное ВЯИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д.4/5филиал ППП фПатенте, г,ужгород, ул.Проектная,4 Способ выделения белка из белковых гидролиэатов, включающий очистку гидролиэатов от окрашенных примесей, осаждение белка из гидролизата действием осадителя и его последующее отделение от гидролизата, о т л и - ч а ю щ и й с я тем, что с целью упрощения процесса повышения качест" ва выделяемого белка, гидролиэат обрабатывают растворами хлораминов до достижения изозлектрической точки белка. Источники информации,принятые во внимание при экспертиз1. Грандберг И.И. Практическиеработы по органической химии. М., 5 Высшая школа, 1973, с. 150. 2. Авторское свидетельство СССР9 583152, кл. С 09 Я 3/02, опублик.1977.30 3. Патент США Р 4038437,кл. А 23 4 3/00, опублик. 1977 (прототип).