Способ получения белковых гидролизатов

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ Сшов Советских Социалистических Республик3) Опу оо деизм изобретен и открытий юллетеиь 5) Дата опубликования описания 06.04.79(71) Заявители обиологии АН Бел аучно-исследовател кладной энзимолог усской ССРкий институт ститут мик сесоюзный 54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯЕЛКОВЫХ ГИДРОЛИЗАТОВ Изобретение относится к области миккробиологической промышленности и касается техники получения белковых гидролизатов из биомассы дрожжей.Известны способы получения белковых 5 гидролизатов из биомассы дрожжей путем плазмолиза, термолиза, механического разрушения, кислотного гидролиза и ферментативного гидролиза 11, 2, 3, 4, 5).Известен также способ получения белковых гидр олизатов из биомассы дрожжей путем ферментативного гидролиза ее литическими ферментами из Ас 11 потпусез с последующим выделением гидролизата и сушкой 16.15Этот известный способ является наибоблизким решением к описываемому изобретению по технической сущности и достигаемому результату.Недостатком известного способа является то, что дрожжелитические ферменты, гидролизующие клеточную стенку дрожжей в достаточной степени, обладают сравнительно низкой протеолитической активностью и не в состоянии вызвать глубокий 25 гилролиз содержащегося внутри оболочки клеточного дрожжевого белка.Процесс получения белковых гидролизатов по известному способу протекает медленно. Целью изооретения является получение продукта с высоким содержанием аминокислот, а также ускорение процесса.Это достигается тем, что в предлагаемом способе получения белковых гидролизатов из биомассы дрожжей гилролизат перел выделением подвергают дополнительному ферментатпвному гидролизу протеолитическим ферментным препаратом Протосубтилином Г-ЗХ для расщепления клеточных белков и высокомолекулярных полипептплов, а из рода Ас 11 погпусез используют штамм Ас 11 поптусез спегозиз За,Способ осуществляют следующим образом.Для получения гидролпзата используют различные дрожжи, например, дрожжи Сапс 11 с 1 а дц 1111 егтпоис 111, выращенные на углеволоролах нефти,Взвесь дрожжей с водой, взятых в соотношении 1: 10, кипятят 1 час для повышения их чувствительности к лизирующему воздействию литических ферментов, охлаждают до 45 С, доводят рН ло 7,5 20%-иым раствором аммиака или 10%-ным раствором ХаОН для создания условий в среде, необходимых для оптимального действия ферментов, п вносят Лрожжелитический ферментный препарат Ас 11 потпусез с 1- пегозцз За в количестве 1% от сухого веса649745 полученный гидролизат высушивают одним из известных способов, например, лиоф ил и 3 и р уют. 5 Данные сравнительной характеристикикачественного состава гидролизатов дрожжей Сапс 1 Ыа дц 1111 еггпопс 111 по предлагаемому способу и известному (контроль) приведены в табл. 1. Таблица 1 Контроль,время гидролпза 1 О час и ри 50Условиягидролиза Сумма свободных аминокислот, мкг/00 лг сухого веса дрожжей 18538,7 11576,7 10 Данные сравнительной характеристикигидролизатов дрожжей Сапс 1 Ыа дц 1111 еггпопЙ 1, полученных при действии на них различных ферментов и по предлагаемому способу (время гидролиза 6 час, концен трация ферментов 1% от веса, дрожжей),приведены в табл. 2,Таблица 2 А минный азот,мг/г гидролизата154,0 17,8 127,4 20,9 175,3 23,2 67,5 14,0 156,8 17,9 60,9 20,2 113.5 180,2 Ферменты Ас 1 погпусез спегозцз За 165,8 22,8 20,8 200,3 181,5 120,3 Протосубтилин Г-ЗХ По предлагаемому спо. собу 28,1 44,5 174,3 230,1 й 1, полученных по предлагаемому способу и при действии ферментов Ас 11 погпусез с 1- пегозцз За и протосубтилина Г-ЗХ в от дельности и одновременно (концентрацияферментов - 1% от веса дрожжей), приведены в табл. 3,дрожжей, Гидролиз проводят при 45 С прп периодическом пер емеш ива ни и в течение 4-х час. Затем в реакционную смесь вносят ферментный препарат Протосубтили 1. Г-ЗХ до концентрации 1% от сухого веса гидролизуемых дрожжей и гидролиз продолжают при тех же условиях еще 2 часа,Затем отделяют осадок центрифугировапием при 7 тыс. об/мин в течение 20 иин Результаты таблицы 1 показывают, что сумма свободных аминокислот, характеризующая глубину разрушения белков в клетках дрожжей, по предлагаемому способу выше на 50% при сокращении продолжительности процесса гидролиза примерно в 2 раза. Терризин ПКТг. гозецгпОризин ПКЛпзосубтилип Г-ОХ Результаты табл. показывают, что получаемый гидролизат имеет повышенное качество (растворимый белок, аминный азот, редуцирующие сахара) и повышенный %их выхода.Данные сравнительной характеристики гидролизатов дрожжей Сапс 11 с 1 а дц 1111 еггпопПо предлагаемому способу,время гидролиза 6 час при 45Аминныйизот, лг/ггидролизата Способполучениягидролизатов По предлагаемому способу28,174,3 4 6,6 230,1 Кислотный гидролиз18,5 215,7 124,3 32,1 2 8,4 Результаты табл. 3 показывают, что гидролизат, полученный по предлагаемому способу, имеет повышенное качество и повышенный выход по сравнению с использованием ферментов Асйпогпусез спегозцз За и протосубтилина Г-ЗХ по отдельности и при их одновременном действии,Это объясняется тем, что каждый из Результаты табл. 4 показывают, что широко распространенные и применяемые кислотные гидролизаты по своим характеристикам уступают гидролизатам, полученным по предлагаемому способу. Таким образом, комбинированное (последовательное и регламентированное во времени) действие дрожжелитических ферментов Асбпогпусез с 1 пегозцз За и протеолитического ферментного препарата протосубтилина Г-ЗХ приводит к повышению эффективности процесса получения гидролизата. Дрожжелитические ферменты Асбпогпусез спегозцз За предназначены для лизиса дрожжей, вызывают разрушение их клеточной стенки, а протосубтилин затем расщепляют высвободившиеся цитоплазматические белки, завершая гидролиз.По сравнению с кислотным гидролизом ферментов самостоятельно не может вызвать глубокий пдролиз дрожжей вследствие отсутствия соответствующего типа специфической активности в них.5 Сравнительная характеристика гидролизатов дрожжей, полученных с помощью кислотного гидролпза и по предлагаемому способу, приведена в табл. 4. 10 предлагаемый способ обеспечивает увеличение содержания в гидролизатах аминного азота на 52%, редуцирующпх сахаров на 40%, свободных аминокислот на 93% при одновременном повышении выхода гид ролизата на 40% (табл. 4). Полученные по предлагаемому способугидролизаты могут быть широко использованы в микробиологической промышлен ности, например, как компонент питательной среды при получении лизина. На основании лабораторных и полупропзводственных исследований установлено, 25 что полученный по предлагаемому способугидролизат в количестве 1 % обеспечивает полноценную замену 2% -ного кукурузного экстракта, применяемого в производстве лизина.649745 Формула изобретения Составитель А. Бражннкоза Техред Н. СтрогановаКорректор С. Файн Редактор Н. Грязнова Заказ 50/16 Изд. Ъв 72 Тираж 548 Подписное г 110 Государственного комитета СССР по делам изобретений н открытий 113035, Москва, Ж, Раушскап наб., д, 4/5Тнп. Харьк. фпл, пред. Патент Способ получения белковых гидролизатов из биомассы дрожжей путем ферментативного гидролиза ее литическими ферментами пз Ас 11 погпусез с последующим выделением гидролизата и сушкой, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с целью получения продукта с высоким содержанием свободных аминокислот, а также ускорения процесса, гидролизат перед выделением подвергают дополнительному ферментативному гидролизу протеолитическим ферментным препаратом Протосубтилином Г-ЗХ для расщепления клеточных белков и высокомолекулярных полипептидов, а из рода Ас 1 погпусез используют штамм Ас 11 погпусез с 1 пегазиз За. Источники информации, принятые вовнимание при экспертизе:1, Патент США3961080, кл, 426-60,опублик. 1970.5 2, Авторское свидетельство СССР335277, кл. С 12 С 11/26, 1970,3. Авторское свидетельство СССР367140, кл, С 12 С 11/26, 1962.4. Авторское свидетельство СССР1 О292688, кл. А 23 1 1/18, 1969.5. Яровенко В. Л. и др. Производствоферментных препаратов из грибов и бактерий, М., 1970,б, Коновалов С, А, и др, Ферментативный метод разрушения клеточных стенокдрожжей, ж-л Прикладная биохимия имикробиология, 1975, т. 11,4, с, 620 -622 (прототип).