Способ выделения -изолейцина из смеси аминокислот

гв 715573 Союз Советских Социалистических Республик(22) Заявлено 1 Ы 878 (21) 2654664/23-04с присоединением заявки МУ(51) М. Кл.2 С 07 С 101/30 Государственный комитет СССР по делам изобрегений и открытий(54)СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ Е-ИЗОЛЕВЩИА ИЗ СМЕСИАМИНОКИСЛОТ Предлагается усовершенствованный способ выделения-изолейцина, который находит широкое применение в пищевой промышленности, в пептидиом синтезе, в медицине, а также входит в состав питательных сред.Известен способ выделения аминокислот, в частности изолейцина, путем фракционной дистилляции этиловых эфиров И-карбамоиламииокислот, По этому способу выделение аминокислот проходит следующие этапы:получение хлоргидратов аветнокислот; получение сложных эфиров аминокислот; получение сложйых эфировМ-карбамоиламинокислот,фракционная дистилляция в вакууме; гидролиз сложных эфиров М-карбамоиламинокислот до соответствующих аминокислот, Так, смесь Ь -аминокислот (глицина, аланина,валина,иэолейцина,лейцина, аспарагиновой кислоты,метионина,пролина, глутаминовой кислоты) суспендируют в абсолютном этиловом спирте, пропускают хлористый водород и реакционную смесь кипятят 2 ч. Этиловый спирт удаляют в вакууме, Остаток повторно обрабатывают аналогичным способом, К остатку добавляют толуол и дистиллируют-реакционную смесь до тех пор пока температура перегонки не поднимется вышетемпературы кипения толуола, Реакционнуюсмесь охлаждают, добавляют еще толуол и нагревают до кипения, Фосгенпропускают вкипящий раствор, Послеокончания реакции растворитель и изЖток фосгена Отгоняют, Остатокдистиллируют в атмосфере инертногогаза, затем подвергают фракционнойдистилляции в вакууме. Выход отдельных этиловых эфиров й-карбамоилами-нокислот 40-50. Гидролиз последнихпроводят как щелочью, так и кисло той, Индивидуальную аминокислотуполучают с выходом 25-35, считаяна ее содержание в смеси, Полученныеаминокислоты пригодны для фармацевтических целей 1).20 Особенностями способа являются:низкий выход отдельных аминокислот(25-35); применение сильно ядовито"го вещества - фосгена; сложностьпроцесса (многостадийность, дистилля ция в вакууме, дистилляция в инертной атмосфере) .Белью изобретенкя является получение Ь-изолейцина иэ многокомпонентной смеси аминокислот с более высо- ЗО ким,выходом и упрощение процесса.715573 Формула изобретения пииипи заказ ееии/ии тираж 4 эи подписное Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул, Проектная,4 Поставленная цель достигается тем,что 1. -изолейцин высокой степени .чистоты выделяют из смеси - -аминокислот путем этерификации, причем этерификацию смеси аминокислот в присутствии тионилхлорида проводят втечение 0,5-3 ч до образования смесихлоргидратов сложных эфиров сопутствующих аминокислот и хлоргидратаЕ-изолейцина, а (.-изолейцин выделяют из реакционной смеси нейтрализацией, выход 70-75 в расчете на-изолейцин в смеси аминокислот.известно, что в зависимости отприроды аминокислоты условия этерификации варьируются в широких пределах, В отличие от других аминокислот, присутствующих в исходной сме"си, Ь-изолейцин этерифицируетсятруднее и в течение 0,5-3 ч преврацается только в гидрохлорид, Различие в реакционной способности аминокислот обеспечивает полную этерификацию сопутствуюцих аминокислот, вто время как (изолейцин превращается в хлоргидрат. Последующая нейтрализация реакционной смеси хлоргидратов Ь-изолейцина и сложных эфироваминокислот приводит к образованиюрастворимых в спирте эфиров аминокислот и нерастворимого ).-изолейцина,вследствие чего изолейцин выпадает в осадбк.Предлагаемый способ обеспечиваетполучение Е-изолейцина из смеси 1=аминокислот различного состава, втом числе из смеси Ь-аминокислот:изолейцин, лейцин, норвалин, валин,аргинин, треонин, лизин, глицин,глутаминовая кислота и другие.П р и м е р 1. 20 г смеси ).-ами".нокислот (глутаминовой кислоты, аргинина, валина, норвалина, лейцина,глицина, лизина, треонина) и60 изолейцина при перемешиваниисуспендируют в 250 мл абсолютногоэтилового спирта и добавляют 20 митионилхлорида РеаКциониую смесьпри перемешивании выдерживают при50-60 ьС в течении 2,5 ч, охлаждаюти нейтрализуют 70 мл диэтиламина,Выпавший осадокотФильтровывают,кристаллизуют из 150 мл воды и900 мл этилового спирта, Получают8,4 г хроматографически однородного(,-изолейцин в смеси) формулй С Н,О И,Содержание основного вещества 100,Удельное врацение 1 1 +39,0 (с=1;5 н,НС 1),П р и м е р 2. 16 г смеси Е-аминокислот (глутаминовой кислоты, аргинина,валина,норвалина,лейцина,глицнна,лизина,треонина) и 60 изолейцинапрй перемешивании суспендируют в100 мл метилового спирта и добавляют 15 мл тионилхлорида, Реакционнуюсмесь при перемешивании выдерживаютпри 50 С в течении 1 ч охлаждают,нейтрализуют 55 мл триэтиламина, Выпавший осадок отфильтровывают икристаллизуют из 100 мл воды и500 мл этилового спирта, Получают7,3 г хроматографически однородногоЬ-изолейцина (75,88 в расчете наЬ-изолейцин в смеси) формулыС Н , О Б, Содержание основного вещества 100, Удельное вращение(.с 1 + 39,4 (с = 1; 5 н,НСР),ьП р и м е р 3. 20 г смеси ) -аминокислот. (глутаминовой кислоты, аргинина, лейцина, глицина, лизина,треонина) и 80 изолейцина при перемешивании суспендируют в 250 млабсолютного этилового спирта и добавляют 20 мл тионилхлорида. Реак/ционную смесь при перемешивании выдерживают при 60 С в течение 0,5 ч,охлаждают, нейтрализуют 70 мл диэтил;амина, Выпавший осадок отфильтровывают, кристаллизуют из 200 млводы и 900 мл этилового спирта, Получают 12 гхроматографически однородного (.-изолейцина (75 в расчетеена Ь-изолейцин в смеси) формулыСН О Н, Содержание основного вещества 100, Удельное врацение)о 139,7 (с = 1; 5 н,НС),Данный способ обеспечизает получение Ь-изолейцина для медицинскихнужд из технического Ь-изолейцина,полученного микробиологическим путеми содержащего в качестве примесейряд аминокислот, в удобном для производства процессе. Выход Ь-изолей-цина повышается на 40-50,Способ выделения ).-изолейцина изсмеси аминокислот путем ее этерийикации в присутствии кислотного катализатора, о т л и ч а ю ц и й с ятем, что, с целью упрощения процесса и увеличения выхода целевогопродукта, этерификацию проводят вприсутствии тионилхлорида в течение0,5-3 ч; и целевой продукт выделяютиз реакционной смеси нейтрализацией,Источники инФормации,принятые во внимание при экспертизе1, Патент ФРГ Р 1063174,кл,12 с) 5, опублик, 1968 (прототип),