Способ получения иммуностимулирующего агента

Союз СоветскихощиалистическихРеспублик ИЯ К П А 1 Е Н 1 У(32) 24.12.7 (33) франция Гасударственный комитат Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий(45) Дата опубликования описания 11.0.7 2) Автор изобретения Иностран обер фов (франция Иностранная фирмафЭнститю Пастоо"(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИИ ИММУНОСТИМУЛИРУЮЩЕГО АГЕНТА Изобретение относится к медицине, в частности к получению лекарственных препаратов.Известен способ получения иммуностимулирующего агента путем обработки различныхмикроорганизмов смесью хлороформа и метанола или другими органическими растворителямис последующим высушиванием и получениемводной суспензии 1.Недостатком известного способа являетсявысокая токсичность и низкая активность препарата,С целью снижения токсичности и повышения активности препарата по предлагаемомуспособу суспензяю микроорганизмов обрабатывают смесью хлороформа и метанола в соотношении 1:1, полученные жидкие фракции разделяют, затем смесь растворителей выпаривают,полученный осадок растворяют в хлороформе ииз раствора осаждают целевой продукт физиологическим раствором.Способ осуществляют следующим образом.Готовят сустгензиЬ, включающую следующие микроорганизмы: ИЬпо сЬоега, 1.Ыепагпопосу 1 одепеэ, Яа 1 гпопе 11 а 1 урЬ 1 гпцг 1 цгп,ЕэсйепсЫа со 11, СогупеЬас 1 сгшп рагчшп цМусоЬас 1 епцгп 1 цЬегсцозцз, в смеси хлороформа и этанола, взятых в равных объемах. Полученную суспензию гомогенизируют путем измельчения, затем последовательно отделяют от полученного раствора нерастворенные твердые вещества н подвергают последние испарению в частичном вакууме при температуре порядка 40 С до образования твердого осадка, который растворяют в хлороформе, причем нерастворившуюся часть этого осадка отбрасывают, а оставшийся светлый хлороформный раствор, содержащий в растворенном виде иммуностимулирующий агент, сливают с водным физиоло- О гическим раствором. Через смесь хлороформно.го раствора и водного физиологического раствора барботируют инертный газ до полного удаления из этой смеси хлороформа. Затем в среде водной фракции твердый продукт, содержащий иммуностимулирующий агент, ранее растворенный в хлороформе, но не растворимый в воде, гомогенизируют до получения водной суспензии. После этого суспензия готова для инъекций. Полученную суспензию можно лиофилизировать, при этом получают желтоватый гигроскопичный порошок, который может быть растворен в хлороформе.Целесообразно, чтобы объемы раствора хлороформа и водного инъекционного раствора при смешивании имели такие значения, при ко.592333Э формула изобретения Составитель Г. СмирноваТехред О. Луговая Корректор Е. Папп Тираж 702 Подписное Редактор Л. ВолковаЗаказ 221/1 ЦНИ И ПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и огкрытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Филиал ППП Патент, г, Ужгород, ул. Проектная, 4 торых полученная водная суспензия содержала около 105275 мкг сухого вещества мг.1 Хример. Для получения иммуностимулирующего агента используют клетки, полученные из культур: селезеночные клетки мыши, зараженной Ы 5 ег 1 а гпопосутодепез, Ьагпопе 11 а урЫ 1 пцг 1 цгп ЕвсЬег 1 сЬ 1 а со 11 к 12, СогупеЬас 1 ег 1 цгп раглип, Ч 1 ЬГ 1 о сЬО 1 ега,К одному объему обрабатываемых клеток добавляют десять объемов смеси равных количеств хлороформа и метанола. Полученную смесь гомогенизируют в дробилке 2 ч при 4 С и центрифугируют при 3500 Ст 20 мин. Раствор помещают в емкость и подвергают испарению в вакууме при 40 С. Затем емкость наполняют хлороформом и подвергают содержимое вращению со скоростью 40 об/мин в течение 30 мин. По истечении этого времени раствор хлороформа фильтруют на Ватманской бумаге3. Фильтрат, содержащий иммуностимулирующий агент, хранят при 4 С в стеклянном флаконе.Для получения водорастворимого препарата, в пробирку вводят определенный объем полученного хлороформного раствора и равный объем апирогенного 8%-ного раствора хлористого натрия.Через полученный раствор барботируют инертный газ, например, азот или смесь, состоящую из 95% воздуха и 5% углекислого газа. Барботаж ведут до полного удаления хлороформа. Иммуностимулирующий агент из хлороформнсго раствора переходит в суспечзию в водной фазе. Эту суспензию затем гомогенизируют до размера частиц суспензии 20 мкм.Полученная суспензия имеет опаловый отлив,1. Способ получения иммуностимулирующего агента путем обработки суспензии микроор О ганизмов смесью хлороформа и метанола споследующим выделением целевого продукта, отличающийся тем, что, с цлью снижения токсичности и повышения активности препарата, суспензию микроорганизмов обрабатывают смесью хлОроформа и метанола в соотношении 1:1, полученные жидкие фракции разделяют, затем смесь растворителей выпаривают, полученный осадок растворяют в хлороформе йз раствора осаждают целевой продукт физиологическим раствором.2. Способ по и. 1, отличающийся тем,что обработке подвергают суспензию, включающую следующие микроорганизмы: Ч 1 Ьг 1 о с 11 о 1 ега, 1.151 ег 1 а гпопосу 1 одепез, Яа 1 гпопе 11 а 1 урЫгпцг 1 цгп, Езс 11 ег 1 сЬ 1 а со 11, СогупеЬас 1 ег 1- цгп рагчцтп ц МусоЬас 1 ег 1 цп 1 цЬегсцозцз. 5 Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:1. К бот Е. и Майер М. Экспериментальнаяиммунохимия. 1968, с. 549.