Способ определения гамма-оксибутирата натрия

г г,гО П И С А Н И Е (и) 466449ИЗОБРЕТЕНИЯ Союз Советских Социалистических Республик(22) Заявлено 21.07.72 (21) 1808658/23-4 51) М. Кл. б 01 н 31/08 исоединением заявки М Госудерственнык комит Совета Министров СС ,по.делам изобретенил открытий 32) ПриоритетОпубликовано 05,04.75. БюллетеньДата опубликования описания 29,07.75 53) УДК 543,544.45ь достигается тем, что жидкостную хроматограсредственно при 200 -5 качестве цикмалолетучие слые соли ( рной, ортоф изирующих агентов испольмногоосновные кислоты или 0 - 30%-ные водные раствосфорной кислот или их ис зуюихры Изобретение относится к способам определения у-оксибутирата натрия (натриевой соли у-оксимасляной кислоты) - лекарственного вещества, применяемого при нервных и психических заболеваниях и в анестезиологии, 5Известен способ определения оксибутирата натрия, например, в крови путем циклизации анализируемого вещества циклизирующим агентом, например многоосновной кислотой, при температуре до 100 С с последующим га зожидкостным хроматографированием полученного при этом продукта.Недостатком такого способа является длительность (- 2 час) процесса подготовки пробы для проведения газожидкостного хромато графирования. Кроме того, способ трудоемок и каждая операция подготовки пробы связана с ошибкой. Общая ошибка определения 6,6%.Целью изобретения является исключение трудоемких подготовительных операций, по вышение точности способа и сокращение времени анализа.Поставленная целциклизацию и газофию проводят непо 2 лые соли, например соли калия, насыщенный водный раствор щавелевой кислоты или ее кислой соли, например соли калия).Предлагаемый способ осуществляется следующим образом.Биологическую пробу помещают в цснтрифужную пробирку, вводят в нее циклизирующий агент, перемешивают и центрифугируют. Аликвоту верхнего слоя вводят в дозатор хроматографа (например, марки Хром, колонка которого заполнена хромосорбом Р, покрытым полппропиленглпкольадипатом). Хроматографирование проводят в течение 10 мин при следующих параметрах: температура колонки хроматографа 140 С, температура доза- тора хроматографа 200 С - 250 С, скорость газа-носителя (азота) 50 мл/мин, расход водорода 40 мл/мин, воздуха 600 мл/мин, после чего анализируют полученную хроматограмму, измеряя высоту пика, соответствуюц,его у-бутиролактону (ГБЛ), и определяя по калибровочному графику концентрацию -оксибутпрата натрия в организме.Пример 1. 0,05 мл крови (или сыворотки крови) смешивают с равным объемом одного из циклизирующих агентов, например 20%-ного водного раствора серной кпслоты, Полученную смесь центрифугируют 3 мин со скоростью 8000 - 1000 об/м 1 н и 5 мкл верхнего слоя вводят в дозатор хроматографа, после чегоГБЛ Воемя мин Составитель В. Чехлато Техрел Т. Курилко Корректор Л. Орло актор 3. Горбун зд,70-"1 раж 902 аказ 181 одписное 1 ппографпп, пр. Сапу"с проводят хром атографпрование в течение 10 мин, а затем анализ хроматограммы.П р и м е р 2. 0,02 - 0,03 г ткани смешивают в соотношении 1:4 с раствором одного из циклизирующих агентов (циклизирующие агенгы и последующие операции такие же, как в примере 1).На фиг, 1, 2 и 3 приведены хроматограммы, полученные по вышеописанной методике анализа гомогената ткани мозга крысы после введения ей внутрибрюшного раствора: смеси у-оксибутирата натрия и циклизирующего агента - насыщенного водного раствора щавелевой кислоты (см. фиг. 1, где пунктиром показана хроматограмма без введения у-оксибутирата натрия), чистого у-бутиролактона (см, фиг. 2), у-оксибутирата натрия с добавкой в анализируемый гомогенат чистого у-бутиролактона (см. фиг. 3).Количественный анализ проводят по хроматограммам методом абсолютной калибровки. На фпг. 4 приведены калибровочные графики 4для крови (кривая А) и ткани мозга (кривая Б) при анализе на.хроматографе Хром.Калибровочные графики строят на основании данных, полученных при анализе искусствен но составленных смесей крови или гомогенатов ткани с точно известным количеством у-оксибутирата натрия. Относительная ошиб.ка определения 3% . Чувствительность метода для ткани 5 мкг/г, для крови 2 мкг/мл, 10Предмет изобретенияСпособ определения гамма-оксибутиратанатрия путем циклизации анализируемого вещества циклизирующим агентом, например 15 малолетучей многоосновной кислотой, с последующим газожидкостным хроматографированием образующегося при этом гамма-бутиролактона, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и сокращения време пи анализа, циклизацию и газожидкостноехроматографирование проводят при 200 - 250 С непосредственно в хроматографе. сои о апичестдо = аксибутирагпа натрия, ИКГ/мл кради или М/.ТУг гпкаии