Способ получения простагландинов

ОП ИКАНИЕ ИЗОБРЕТЕН ИЯ 461731 Союз Соеетекнк Социалнстнческнх Респубпнн.74 (21) 201 1 1 51/3151) .Ч.Кл, А 611 27/00 с присоединением заявя осударственнын коцит Совета Министров ССС но делам иэобретенийи открытийБюллетень М 8 иковано 28.02.7 Дата опубликовапи описания 11.09.75 Бобылев, И. К, рлова и Н, В. С тигнеева, Р, Вников, Г. Ш.ина и орденам. И, М, Сечени институтМ. В. Ломон П. Евс Печен на Ле титут и Знамим рычева,брянник Трудового Крнова и Московонкой химичесова сного Знаменкии орденаой технологи ОВ ОСТАГЛА СОБ ПОЛУЧЕН(71) Заявители 1-й Московский ордмедицинский инТрудового Красног Изобретение относится к медицинской промышленности, а именно к способу получения лекарственных препаратов.Известен способ получения простагландинов, согласно которому к арахидоновой кислоте добавляют рибосомальный фермент, инкубируют в буферной системе с рН 7,4 - 8,5 в течение часа, прерывают биосинтез добавлением лимоиной кислоты и смесь экстрагируют петролейным эфиром.Целью изобретения является расширение сырьевой базы.Для этого арахиден хроматографируют в тонком слое, элюируют этиловым спиртом, обрабатывают концентрированным раствором едкого патра в этиловом спирте, подкисляют до рН 2,0, экстрагируют бензолом, бензол отгоняют, хроматографируют с последующей обработкой выделенной арахидоновой кислоты известным образом.Способ получения простагландинов осуществляют следующим образом.П р и м е,р. На десять хроматографических пластинок с силикагелем наносят 2,5 г арахидеца, првдварителы о смешанного с 1,5 мл 96%-ного этилового спирта, и хроматографируют в системе хлороформ - метанол - уксусная кислота - вода в соотношении 90:6:1:0,75. По окончании хроматографировация полоску с Й0,66 - 0,68 срезают и элюируют этиловым спиртом, Элюат испаряют под вакуумом до полного удаления этилового спирта, и получают сумму эфиров арахидоновой кислоты и других полиненасыщенных высших жирных 5 кислот в количестве 135 мг, которую затемомыляют на водяной бане с обрятньом холодильником в течение 4 час с 10 мл этилового спирта и 20 мл 5 н. раствора едкого патра.После омыления спирт отгоняют в вакууме, 2 о остаток подкисляют 2 н. раствором НС 1 дорН 2,0, после чего арахидоновую кислоту дважды экстрагируют бецзолом. Бензол отгоняют в вакууме и получают 100 мл арахидоновой кислоты, которую включают в биосинтез, 15 проводимый в темноте или прц свете краснойлампе в 40 вт.Для осуществления биосинтеза к 100 мгарахидоновой кислоты приливают 200 мл 0,2 М раствора хлорида аммония, доведенного до 20 рН 8,5 добавлением водного раствора аммиака, ц 200 мл рибосомального фермента, полученного из 150 г семенников баранов, очищенных от жира ц посторонних ткяцсй ц измельченных в измсльчцтелях с последующим 25 цснтрцфугпровяццсм с 300 мл того жс буферного раствора при 4 С и 5000 об/миц в течение 15 миц. Биосинтез осуществляют аэробно, прерывают его добавлением 0,2 М водного раствора лимонной кислоты до рН 2,5, затем ЗО смесь экстрагируют дважды этцловым эфиром3медициноиим, Эфирные вытяжки об ьединяют и эфир отгоняют в вакууме до полного удаления при температуре не выше 35 С.Сухой остаток растворя 1 от в 10 мл метанола; 0,1 мл метанольного раствора хроматографируют на пластинке с силикагелем в системс бензол - диоксин - уксуеная кислота (20:20:1) . Зону с Я 0,62 - 0,64 элюируют метанолом для спектрофотометрви, спектрофотометрируют и определяют максимум поглощения при 278 нм.Биологическая активность водного раствора элюата соответствует активности простагландина Е 2. 461731 4 Предмет изобретенияСпособ получения простагландинов путемферментативного превращения ненасыщенных 5 высших жирных кислот в буферном раствореи экстрагирования петролейным эфиром, отличаюи 1 ийся тем, что, с целью, расширения сырьевой базы, арахиден хроматографируют в тонком слое, элюируют этиловым спиртом, обра О батыва 1 от концентрировавным раствором едкого патра в этиловом спирте, подкисляют до рН 2,0, экст 1 рагируют бензолом, бензол отгоняют и проводят ферментацию известпы ми прием а ми.Заказ Мо 3260 Изд, ЛЪ 1173 Тнрагк 559 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР но делам изобретений и открытий Москва, Ж, Раушская наб., д, 4/5 МОТ, Загорскпй фнлнал