Способ расщепления рибонуклеиновых кислот

Номер патента: 1752773

Авторы: Веньяминова, Зарытова, Иванова, Репкова

ZIP архив

Текст

752773 А СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК я)5 С 12 0 4 РЕ ЕНИ ЕТЕЛЬС ТОРСКО ПЛЕНИЯ РИБОНУК(21) 4827 (22) 23,0 (46) 07.0 (71) Нов ской хим (72) В Ф 531/135.908,92. Бюосибирсии СОЗарытои М,Н.Реег. Спе л. %29кий инстАН СССРва, Е,М,Иепковащ, Яос., 1 биоорганич анова, А,Г,Веньяминова(56),3. А6882,10, р,688 9 ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯПРИ ГКНТ СССР ИСАНИЕ ИЗ Изобретение относится к биотехнологии и биохимии нуклеиновых кислот и может быть использовано для получения фрагментов рибонуклеиновых кислот (РНК), создания противовирусных препаратов; для изучения функций РНК, для создания геннаправленных соединений и т.п.Наиболее близким к предлагаемому является способ расщепления РН К с помощьюосновных пептидов путем инкубации РНК с расщепля ющим агентом.Существенным недостатком этого способа, как и всех известных неферментативных методов расщепления РНК, является недостаточно высокая специфичность (т.е. множественность разрывов цепи РНК),Целью изобретения является повышение специфичности за счет обеспечения единичного разрыва РН К в заданном месте.Поставленная цель достигается тем, что согласно способу расщепления рибонуклеиновых кислот путем инкубации рибонуклеиновой кислоты с основным пептидом в качестве основного пептида используют пептид (Ееи - Аг 9)з - 61 у (й), ковалентно связанный с 5-концом олигонуклеотида или его1производного, комплементарного участку(54) СПОСОБ РАСЩЕЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ(57) Использование: для изучения функций РНК, создания противовирусных препаратов, Сущность изобретения: гидролиз РНКс помощью пептида - (Ееа - Аг 9)з - (3 у (Й), ковалентно связанного с олигонуклеотидом, комплементарным участку РНК, прилежащему к сайту расщепления В = -ЙН 2 или -ОАП(,разщепляемой рибонуклеиновой кислоты,прилежащему к месту разрыва, прйчем В --КН 2 или -ОА 11.П р и м е р 1, В качестве РНК используют меченный радиоактивным фосфоромгептацекарибонуклеотид (10-7 М) формулы5 - 32 Р - рОАООАСОАААСААСААС-З,в качестЬе расщепляющегореагента берутпептид, ковалентно связанный с гептадезоксирибонуклеотидам, комйлементарным5 -концу РН К (подчеркнуто):13 - с 3 СТССТО СрКец - Аг 9)з - 61 у(В),где Я - -ИН 2, -ОАВ,Реагент взят в концентрации 10 М, егоинкубацию с РН К осуществляют в течение 21сут при комнатной температуре в 10 мклраствора, содержащего 50 мМ трис-НО, 100мМ йаО и 1 мМ ЭДТА, рН 7.9. Реакциюостанавливают осаждением реакционнойсмеси 2%-ным перхлоратом лития в ацетоне. После отделения остаток растворяют в 5мкл 10 М мочевины и 1 мкл смеси ксиленцианола и бромфенола в формамиде (1: 10) инаносят на 200 ь-ный полиакриламидныйгель. Проводят гель-электрофореэ (при1000 - 1200 В, 2 ч) и экспонируют гель дляполучения радиоавтографа (для конт(дроля

Смотреть

Заявка

4827531, 23.05.1990

НОВОСИБИРСКИЙ ИНСТИТУТ БИООРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ СО АН СССР

ЗАРЫТОВА ВАЛЕНТИНА ФИЛИППОВНА, ИВАНОВА ЕВГЕНИЯ МИХАЙЛОВНА, ВЕНЬЯМИНОВА АЛИЯ ГУСЕЙНОВНА, РЕПКОВА МАРИНА НИКОЛАЕВНА

МПК / Метки

МПК: C07H 21/04, C12Q 1/68

Метки: кислот, расщепления, рибонуклеиновых

Опубликовано: 07.08.1992

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-1752773-sposob-rasshhepleniya-ribonukleinovykh-kislot.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ расщепления рибонуклеиновых кислот</a>

Похожие патенты