Способ определения сульфгидрильных групп в гемсодержащих белках
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Номер патента: 1147981
Авторы: Опарин, Островский, Степуро
Текст
СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 4(51 С 01 Н 33/48 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ Г .:.:. л ф 7 :" 1,.",1" Г ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ 13К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ ЕВеэцсчВ Ъж еда- -;- тл- е - Г-т юС г(71) Отдел регуляции обмена веществАН БССР(56) 1. Виггег юоггЬ Р.Н.И Вацв Н.,Роггег Л.У. АгсЬ. ВдосЬеа апд В 1 орЬуг. 1967, 118, р. 716,(54) (57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СУЛЬФГИДРИЛЬНЫХ ГРУПП В ГЕМСОДЕРЖАЩИХ БЕЛКАХ путем инкубации белка с реагентом и последующего спектрофотометрирования, о т л и ч а ю щ и й с ятем, что, с целью повьппения чувствительности и упрощения способа,в качестве реагента используют перхлорат 3,3-диметил-1-диметиламинофенилфталилия, а инкубацию ведутпри рН 5,0-5,51147981 ВЯИИБИ Заказ 1569/37 Тираж 897 Подписное Филиал ППП "Патаитф, г,Уагород, ул.Проектная, 4 Изобретение относится к биохимиии ка-.ается количественного определения сульфгидрильных групп в гемопротеидах и может быть .использованодля быстрого количественного определения сульфгидрильных групп, например, в гемоглобине при проведениибиохимических анализов, в лабораторной медицинской практике, в генетике .при определении мутантных форм гемо Оглобина.Известен способ определения сульфгидрильных групп в гемсодержащихбелках путем ийкубации белка с реагентом и последующего спектрофотометрирования, основанный на спектрофотометрической регистрации продуктов взаимодействия сульфгидрильныхгрупп с 5,5 -дитиобис(2-нитробензойной)кислотой (реактив Эллмана), 20Согласно известному способу послеинкубирования белка с реагентом отделяют белок от избытка реагента, вос-станавливают смешанный дисульфид, отделяют белок и затем спектрофотометрируют надосадочную жидкосгь 2 .Однако этот способ характеризу ется недостаточной чувствительностью и является трудоемким,Цель изобретения - повышение 30чувствительности способа и упрощениепроцесса определения,Поставленная цель достигаетсятем, что согласно способу определения сульфгидрильньгх групп в гемсодержащих белках путем инкубации белка с реагентом и последующего спектрофотометрирования в качестве реагента используют перхлорат 3,3,диметил-П-диметиламинофенил 40фталилия, а инкубацию ведут прирй 5,0-5,5.П р и м е р 1. Готовят исходныерастворы ПДАФ (1,8 мг в 25 мл Сп 11==2 10 ) и гемоглобина лошади (34 мг 45в 25 мл Сгбм =2 10 ) в фосфатномКН,РОф -Ма, НРО,1) буфере с рН 5,0.Затем к 1 мл гемоглобина добавляют1 мл реагента и относительно полученного раствора спектрофотометрируютпри 470 нм разбавленный в 2 раза буфером с рН 5,0 исходный раствор ПДАФ,Находят в 2=0,21 и по формуле рассчитывают количество сульфгидрильныхгрупп: и =1,90.5 И пЬВ с 1 1 с(1+ - + - 1- ),6 Ю - 27700 Сгем а+ где 6 В - изменение оптической плотностиСг м - концентрация гемопротеида;Е .-. константа равновесия с участием карбониевых ионов,равная 1,15 10 ;- константа равновесия с учас 2тием аммониевых ионов, равная 3,1910ан - активность ионов водородав растворе,П р и м е р 2, Из 1 мл крови человека центрифугированием осаждаютэритроциты и проводят их гемолиз в50 мл воды известным способом. Затем гемолизат доводят фосфатным бу-.ферным раствором с рН 5,3 до Ч =- 100 .мл. Готовят раствор реагентарастворением 1,8 мг ПДАФ в 25 мл буфера с рН 5,3. Дальнейшее определение проводят аналогично описанному.аходят й,В Оф 15 ф п 1 ф 98.Предлагаемь 1 й способ повьппает посравнению с известным чувствительность определения в 2 раза за счеттого, что молярный коэффициент поглощения ПДАФ (6=27700 л м см при=13600 л м см при 410 нм),Упрощение определения при осуществлении предлагаемого способа обеспечивается тем, что известный способ предусматривает инкубацию с реагентом, отделение его избытка, восстановление смешанного дисульфида,осаждение белка и спектрофотометрирование надосадочной жидкости, в товремя как предлагаемый способ облегчает определение за счет устраненияряда операций - отделение от избытка реагента,. восстановление смешанного дисульфида, осаждение белка, чтов совокупности позволяет уменьшитьвремя определения до 25-30 мин приисследовании каждой пробы,
СмотретьЗаявка
3634736, 21.06.1983
ОТДЕЛ РЕГУЛЯЦИИ ОБМЕНА ВЕЩЕСТВ АН БССР
СТЕПУРО ИВАН ИВАНОВИЧ, ОПАРИН ДМИТРИЙ АЛЕКСАНДРОВИЧ, ОСТРОВСКИЙ ЮРИЙ МИХАЙЛОВИЧ
МПК / Метки
МПК: G01N 33/48
Метки: белках, гемсодержащих, групп, сульфгидрильных
Опубликовано: 30.03.1985
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-1147981-sposob-opredeleniya-sulfgidrilnykh-grupp-v-gemsoderzhashhikh-belkakh.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения сульфгидрильных групп в гемсодержащих белках</a>
Реагент для приготовления радиофармпрепарата и способ получения реагента
Номер патента: 1787035
Опубликовано: 07.01.1993
Авторы: Братцев, Воздвиженская, Данилова, Корсунский, Кошелева, Миловская
МПК: A61K 49/02
Метки: приготовления, радиофармпрепарата, реагент, реагента
...иминодиуксусной кислоты и 0,05 - 0,5 мг дигидрата двухлористого олова, Флаконы с реагентом заполнены сухим воздухом, гер метично укупорены и стерилизованы. Препарат из реагента назван "Бромезида имТс".Анализ РХЧ получаемого из реагентапрепарата проводили методом электрофо реза в найденных нами условиях; тонкийслой агарозного геля, трис-барбитуратный буфер с рН 8,6; 10 - 15 мин при 500 В с последующей авторадиографией на рентгеновских пленках и радиометрией выделен ных компонентов, При этом, в препаратеобнаруживаются, как правило, три радиоактивных компонента;(1) - главный компонент - анионныйкомплекс Тс 02, содержание которого в 35 зависимости от условий приготовления может колебаться в пределах 80 - 99;(2) - радиохимическая примесь...
Способ получения производных 7-аминоцефалоспорановой кислоты
Номер патента: 640664
Опубликовано: 30.12.1978
Авторы: Бертон, Ловжи, Мейер, Сандор
МПК: A61K 31/545, A61K 31/546, C07D 501/06, C07D 501/22, C07D 501/34
Метки: 7-аминоцефалоспорановой, кислоты, производных
...ацилвцу 10 группу К"СО - обра);)-, к 01 )Яиц: спиртом соединения фор-1,1 1 с после;1",10 щим Быдс.цис)1 продктов Всвооодш м виде и в виде эфцра. и ифор)анниц 1)цц)гыс Бо Б имаццс цри экспертизе 1. Выполненная заявка ФРГ Ло 1951012,кл. 12 р 4 О 1, оцублцк 2;),01.70.(-ахгпноцизшпй алкпл, у которого аминорадикал замещен низшей алкоксикарбопильной группой, а 1(г, 1(г, Л имеют указанные вышс значения,обрабатывают в органическом растворителе прп 0 - 60 С ацилгалогенидом формулы 1(-Х,где Я имеет указанные выше значения; Х - галоид,в присутствии 1 х 1-трнхгетилсилиламида, отщепляют ацильнуго группу К 4 СО - обработкой низшим спиртом соединения формулыЕ40 У.ОС СО 0 г(згЩс последующим выделением продуктов всвободном виде или в виде эфира.Новые...
Способ получения сульфинильных производных гетероциклических соединений или их фармацевтически приемлемых солей
Номер патента: 1524807
Опубликовано: 23.11.1989
МПК: A61K 31/4184, A61K 31/42, A61K 31/426, A61P 1/04, C07D 235/28, C07D 263/58, C07D 277/76
Метки: гетероциклических, приемлемых, производных, соединений, солей, сульфинильных, фармацевтически
...Н-бенэимидазол-тион (1,9 г) перемешивают с безводным кароонатом калия(70 мл) в течение 3 ч. Реакционнуюсмесь вливают в воду и осажденныйпродукт отделяют фильтрованием, хорошо промывают водой и сушат с получением 4,39 г целевого продукта в видетемно-желтого порошка, т,пл. 202203 С,2-(1 Н-Бензимидаэолилтиометил)-бенэоламнн (с).Продукт Ь (3,87 г) и аниэол(4,83 г) обрабатывают при комнатнойтемпературе метансульфоновой кислотой.(29 мл) при перемешивании, Реакционную смесь, окрашенную в красный цвет,перемешивают в течение 27 ч, медленновливают в избыток водного раствора бикарбоната натрия и экстрагируют этилацетатом, который затем промывают соляным раствором и высушивают. Растворитель выпаривают н остаток элюируютиэ испарительной...
Способ получения 2, 4, 5-тризамещенных оксазолов
Номер патента: 481158
Опубликовано: 15.08.1975
Автор: Джоржо
МПК: C07D 85/44
Метки: 5-тризамещенных, оксазолов
...реакционную смесь выливают в 500 мл, воды. Затем рН смеси доводят до 4,5 путем добавления соляной кислоты, осадок отфильтровывают и промывают водой. Соединение кристаллизуют нз этанола и получают 7,6 г продукта с т. пл. 90 - 92 СП р и м е р 40. 2-Фенил-М, У-бис- (3-ацетоксиэтил) -4,5-оксазолдикарбоксамид.Соединение получают описанным в предыдущем примере способом, но исходят из соединения примера 9, т. пл. 130 - 135 С (из этанола). П р и м е р 41. 2-Феннл,5-оксазолднкарбогндроксамовая кислота.К раствору 4,7 г хлоргндрата гидроксиламина в 60 мл метанола добавляют 8,5 г гнд роокисн натрия, растворенной в 60 мл метанола.После удаления фильтрацией хлористогонатрия оставшийся раствор добавляют к 10 гднэтнлового эфира...
Способ получени -лейцин-13-мотилина
Номер патента: 593659
Опубликовано: 15.02.1978
МПК: A61K 38/22, C07K 14/63, C07K 5/06
Метки: лейцин-13-мотилина, получени
...бен.зипоксикарбонип- Ь. -гпутамип( -трет,-бутиповый эфир)- -гпутамип(;грет,-бутиловый эфир-Я -дерет.бутипоксикарбонил- Ьпизип- Ь -Фпутамип(-трет,-бутиповыйэфир)- Ь аргинил(гидробромид)- Ьаспарагинип- Ы. -йгрет.-бутилоксикарбонип-.Ь -лиаилглилилглугамииа,да(1 = -14,6го(а 1, а диметилфармамидериВыход 14,8 г 84%"от" теоретически расрсчитанного значения).Раствор 12,3 г полученного соединенияв 800 мп метипового спирта при поддержании постоянного эначенйя рН подвергают катапитическому гидрированию обычным образом (рН 5,5, 7 мп 1 н, бромистоводородной ЗЕкислоты), фипьтрат,упаривают в вакууме ипопученный остаток дважды переосаждаютиз этипового спирта и этипового эфира укСусной хлопотыВ реэупьтате в виде желаемого. продуктаконденсации (14-22...
Предыдущий патент: Пьезоэлемент для ультразвуковых преобразователей
Следующий патент: Лизиметр для получения почвенных растворов
Случайный патент: Устройство синхронизации генераторов