Способ получения сложных эфиров -аминопенициллинов или их кислотно-аддитивных солей

1153830 17,09,70. при К 5 - метил и Л - ами- при К - С - С 1. - алкил и Л - аминоэ ногруппа или аэидогруппа; 20,11.70. группа,ФИзобретение относится к способу получения новых антибиотиков пенициллинового ряда, а именно сложных эфиров М -аминопенициллинов или их. кислотно-аддитивных солей, которые могут найти применение в медицине в качестве лекарственных веществ.Известен способ получения биологически активных А-аминопенициллинов или их кислотно-аддитивных солей ацилированием 6-аминопенициллановой кислоты реакционноспособным производным соответствующей К -амино-,-замещенной амино- или М -азидокарбоновой кислоты в среде инертного органического растворителя при температуре от -50 до 40 С с последующим, в случае необходимости, снятием заместителя ссС -аминогруппы или в случае использования в качестве ацилирующего агента Об -азидопроизводкого переводом М -аэидогруппы в Ж -аминогруппу и выделением целевого продукта в свободном виде или в виде кислотно-аддитивной соли Я .Известные сС -аминопенициллины обладают широким спектром антибактериального действия 121 , однако остается желательным повышение всасываемости пенициллиновых антибиотиков при оральном .введении, распределения в тканях организма, метаболических свойств и скорости удаления.Цель изобретения - получение новых О -аминопенициллинов, которые обладают улучшенными свойствами.Цель достигается основанным на известной реакции И-ацилирования 6-аминопенициллиновых кислот способом получения сложных эфиров К -аминопенициллинов общей Формулы8 сн 3 Я 1- И- СОЯ снХН 2 Ог и СООИ 2 где К - Фенил, окгифенил, Фторфенил, фурил или тиенил;группа формулы- СН-О- СО- ВСН или -СН-О-СОО сн, где К, - С-С 4-алкил, или их кислотно-аддитивных солей, который заключается в том, что сложный эфир 6-аминопенициллановой кислоты формулы с 3 снЗ Соов, где Кимеет указанные значения, 2 О подвергают взаимодействию с производным кислоты формулы й,-сн-соз -,А 25 где .К имеет указанные значения; А - аминогруппа, азидогруппаили группа формулы -мн- с= сн-с-оснз1СН 3 352 и У - атом галогена нли группа формулыр 9 4 о Овб или О МН(сеи 11)у в. среде этилацетата, диметилформамида или хлороформа в качестве растворителя при температуре от -15"С до 45 комнатной с последующим в случаеЭ необходимости, снятием заместителя с К -аминогруппы или в .случае, когда А-аэидогруппа, превращением ее в аминогруппу и выделением целевого пролукта н свободном виде или в виде кислотно-аддитивной соли.Соединения общей формулы (1) хорошо всасываются лри оральном применении и дают более высокую концентрацию в крови. Сложные эфиры подвергаются гидролизу в водной среде, но такой гидролиз происходит интенсивнее при подвергании их влиянию гидролитических ферментов, например, при Осутствующих в сыворотке крови илидругих жидкостях организма человека,Это свойство сложных эфиров имееточень большое значение, посколькуоно приводит к быстрому освобождению 15противобактерийных аминопенициллиновиз сложных эфиров при всасывании изкишечного тракта или вводимых другимобразом в поток крови или в тканевыежидкости, 20Соединения Формулы (1) хорошо переносятся организмом и предпочтительно применяются перорально либо в свободном виде, либо в виде их со-. лей, их можно смешивать с твердыми 25 носителями или с вспомогательными веществами, или с обоими типами указанных веществ. В таких препаратах соотношение между лекарственным веществом и носителями или вспомогательны- З 0ми веществами можно варьировать от 1 до 957. Препараты могут быть превра- цены, например, в таблетки, пилюли или драже, они могут быть заключены в емкости, например в капсулы, а при З наличии смесей налиты в бутыли. Можно применять фармацевтически приемлемые органические или неорганические, твердые или жидкие носители, подходящие дляперорального, парентерального или местного применения для приготовления препаратов. Походящими для приготовления препаратов из соединений согласно изобретению являются желатин, лактоза, крахмал, сте-арат магния, тальк, жиры и масла растительного или животного происхождения, натуральный каучук и полиэтиленгликоль. Предпочтительной солью сложных эфиров является гидрохлорид, 0 но можно применять также соли с другими неограническими или органическими кислотами, Кроме того, препара" ты могут содержать другие фармакологически активные компоненты, подходяшие для применения вместе с указанными сложными эфирами при лечении йнфекционных заболеваний, например с другими подходящими антибиотиками,Для лечения бактериальных инфекционных заболеваний у людей соединения согласно изобретению -назначают,например, в количестве, соответствующем 5-200 мг/кг/день, предпочтительно в интервалах 10 - 100 мг/кгтельно в интервалах 10 - 100 мг/кг/деньпри разделенных дозах, например два,три или четыре раза в день. Их назначают в дозах, содержащих, например, 175, 350, 500 и 1000 мг соединения.П р и м е р 1, 1 -Ацетоксиэтил 16-(П-и-азидофенилацетамидо)пеницилланат.1а) 1 -Ацетоксиэтил-(Р--азидофенилацетамидо)пеницилланат (58 Х,2,8 г), растворенный в этилацетате(40 мл), обрабатывают 0,2 Ммононатрийфосфатом (ч 0 мл), подкисляют до рН 2,22 И раствором соляной кислоты и гидрируют над палладием на угле (катализатор)при условиях окружающей среды в течение2 ч, Катализатор удаляют Фильтрованием и промывают этилацетатом и буфером. Органическую фазу соединенных фильтратов отделяют и экстрагируют водой при рН 2,1. Соединенныекислые водные фазы промывают эфиром,отделяют слой этилацетата и нейтрализуют добавлением 2 н,растворовгидроокиси натрия при перемешивании.Водную фазу отделяют и снова экстрагируют этилацетатом. Соединенныеэтилацетатные водные растворы промывают рассолом и водой и экстрагируют дважды водой при рН 2,5 добавлением 2 М раствора соляной кислотыСоединенные кислый водные экстрактыпромывают эфиром и концентрируютпод вакуумом при 25 С, что приводитк образованию маслянистого остатка,который растворяют в изопропанолеи упаривают под вакуумом. Получаютхлоргидрат-ацетоксиэтил-(О-Ы -аминофенилацетамидо)пеницилланата(1,1 г) в виде слегка окрашенногопорошка чистотой 1007 (гидроксиламиновая проба),Продукт задерживает рост микроорганизмов вида СарЬу 1 ососсцз ацгецз,Оксфорд, при концентрации 0,32 мг/мл,а ЕзсЬегдМа во 1 и Ргогеов шдгаЬ 1 дз - при 50 мг/мл.б) Азидопроизводное сложного эфираусловиях окружающей среды над катализатором, содержащим палладий (5%) на угле (25 г). Катализатор удаляют Фильтрованием и промывают этилацетатом. Соединенные фильтраты экстраги руют водой при рН 2,5 в присутствии соляной кислоты, После лиофилизации водной Фазы получают хлоргидрат 1 ацетоксиэтил-(П-о -аминофенилацетамидо)пецицилланата (110 г). Т.пл. 160-(0 164 С (с Рази,), ов +1 ф 4 С (С = 1, СНС 1,); +179,9 (С = 1, 50% рзопропацол).Найдено, %; С 50, 78; Н 5,49; И 8,76; О 20,22; Б 6,58; С 1 7,39. (5Вычислено, %: С 50,90; Н 5,55;Яэ 901 0 20 э 341 Б 6 э 791 С 2 7151Продукт имеет сильное ИК-поглощение при 1780-1744 см , что показы вает на цапичие (3 -лактама и карбоцильцых групп сложного эфира. Найдено, что продукт задерживает рост ЫарЬу 1 ососсцв ацгеив, Оксфорд, при концентрации 0,25 мгмл,25П р и м е р 2. 1 -Ацетоксиэтил 6 в(В-о( -аминофенилацетамидо)пеницилланат.Суспензияо(,-(о-нитрофенилсульфенил)-амицофенилацетата дициклогексил-зО аммоция (4,9 г 0,01 моль) и хлоргидрата 1 -ацетоксиэтил-аминопеницилланата (3,4 г, 0,01 моль) в хлороформе (60 мл) перемешивают в течение ночи при комнатной температуре, Добавляют дициклогексилкарбодиимид (2,2 г 0,01 моль) и перемешивание продолжают еще 6 ч. Реакционную смесь фильтруют и промывают водой, разбавленной серной кислотой,1 н.раствором бикарбоната натрия и водой, высушивают и упаривают досуха под вакуумом. Желтый остаток обрабатывают этилацетатом, Фильтруют и снова упаривают с образованием остатка, 45 который перекристаллизовывают из смеси этилацетата и петролейного эфира. Получают 1 -ацетоксиэтил-(П-М -(о- нитрофенилсульфенил)аминофенилацетамидо)пецицилланата ( 1,5 г) . Т.пл. 122-5 О 5 С.Продукт имеет сильное ИК-поглоще-(ние при 1780-750 см , что показывает на присутствие / -лактама и карбонильцых групп сложных эфиров. 55о-Нитрофенилсульфениламинопроизводцое сложного эфира (1,2 г, 0,02 моль) растворяют в 75% диоксана и доводят рН до 3 добавлением 2 ц.раствор соляной кислоты, Добавляют йодистый натрий (1,2 г, 0,008 моль), смесь перемешивают и доводят рН смеси до 3 добавлением кислоты, Через 20 мин образующийся йод уменьшают добавлением 2 н.раствора тиосульфата натрия, смесь нейтрализуют и экстрагируют этилацетатом после добавления воды. Соединенные органические экстракты промывают водой и экстрагируют водой при добавлении 2 н.раствора соляной кислоты до рН 2, Водную фазу промывают этилацетатом и лиофилизирувт с получением хлоргидрата 1 -ацетоксиэтил-(О-М -аминофенилацетамидо) пеницилланата (О, 15 г). Продукт идентифицируют по методике идентификации продукта, полученного в примере 1 б, с помощью ИК-спектра.1П р и м е р 3. 1 -Этоксикарбонилоксиэтил-(П- к -аминофенилацетамидо)пеницилланата.1 -Этоксикарбонилоксиэтиловый эфир 6-(Р-, -азидофенилацетамидо)- пенициллановой кислоты (2,5 г), растворенный в этилацетате (40 мл), и 0,4 моль мононатрийфосфата подкисляют до рН 2,2 2 М раствором соляной кислотой кислоты (40 мл), добавляют применяемьш в качестве катализатора 10%-ный палладий на угле (4 г) и проводят гидрирование при атмосферном давлении в течение 30 мин. Катализатор отделяют фильтрованием и промывают этилацетатом.и буферным раствором. фильтрат отделяют и органическую фазу экстрагируют водой при рН 2, 1. Соединенные подкисленные водные фазы промывают эфиром; добавляют этилацетат и проь,дят нейтрализацию при перемешивании с использованием 2 моль едкого натра, фазы разделяют и водный раствор снова экстрагируют этилацетатом. Два этилацетатцых экстракта соединяют, промывают рассолом и водой и экстрагируют водой при рН 2,5 при добавлении 2 моль хлористоводородной киспоты. Соединенные подкисленные водные экстракты промывают эфиром и концентрируют под вакуумом при 25"С. Полутвердый остаток растворяют н изопропаноле, снова концентрируют ц еще раз повторяют эту методику, Остаток перемешивают с эфиро;(г(о( учаютхлоргидрат 1 - этоксикд рбонилокспэтилового эФира 6-(Р-аминофенилацетамидо)пеницилланоной кислоты (О,Я г) в виде желто-белого порошка с содержанием 86,47. (гидроксиламиновая проба).Продукт задерживает рост 8 арЬу 1 ососсцв ацгецв, Оксфорд, при концентрации 0,13 г/мл Езсгегд 1 да со 11 при концентрации 125 мг/мл (раствор испытывался на агаре) и дает сильное поглощение ИК-спектра при 1750 см- что показывает присутствие /3 -лактамного кольца и функциональной группы сложного эфира.15Азидопроизводное сложного эфира (3,2 г) получают обработкой хлоргидрата 1 -этоксикарбонилоксиэтил- аминопеницилланата (3,3 г 0,01 моль) в сухом диметилформамиде (50 мл) хлорангидридом М, -азидофенилуксусной кислоты (2 г, 0,01 моль) в присутствии триэтиламина (2 г, 0,01 моль). После разбавления реакционной смеси водой выделяют сложный эфир экстрагированием зтилацетатом.11 р и м е р 4. 1 -Этоксикарбонилоксиэтил-(П-Ю -аминофенилацетамидо)пеницилланат.а) К суспензиихлоргидрата хлоргид рина Ж -аминофенилуксусной кислоты (2,6 г, 0,0125 моль),. перемешиваемой в сухом хлороформе (50 мл) в токе сухого азота при охлаждении льдом добавляют бикарбонат натрия (1,1 г, 0,0125 моль) и хлоргидрат 1 -этокси-. карбонилоксиэтил-аминопеницилланата (3,3 г, 0,01 моль). После перемешивания в течение 90 мин смесь Фильтруют и к фильтрату добавляют изопропа нол (15 мл). После упаривания под вакуумом при комнатной температуре получают маслянистый остаток, который при разбавлении петролеиным эфиром образует остаток хлоргидрата 45 1 в .этоксикарбонилоксиэтил-(В. - аминофенилацетамидо)пеницилланата (1,5 г), Продукт очищают. осаждением из смеси ацетона и петролейного эфира. 50Идентичность продукта устанавливают по его ИК-спектру.б) И-(1-Метоксикарбонилпропан- ил)- -амипофенилацетат натрия (2,5 г, 0,0092 моль) и И-метилморфо лин (0,05 мл) в сухом этилацетате (40 мл) перемешивают и обрабатывают при -5"С иэобутилхлороформиатом(1,4 г, 0,01 моль), Через 6 мин поЭкаплям добавляют 1 -этоксикарбонцлокспэтил-аминопенццилланатл (0,.01 моль) в этилацетгте (20 мл) при продолжающемся перемешиваниц и температуре -15 С, Через 1 О мин после прекращения добавления охлаждающую баню удаляют и перемешцвание продолжают еще 45 мин. Реакционную смесь промывают водой, 0,5 моль бикарбоната натрия и снова водой, высуцшвают и концентрируют под вакуумом до образоваиия маслянистого остатка, который обрабатывают тетрагидрофураном (20 мл) и водой (20 мл). Смесь подкисляют до рП 2,5 добавлением 2 и, раствора соляной кислоты. Через 30 мин большую часть тетрагидрофурана уцаляют под вакуумом и подкисленную водную фазу промывают этилацетатом и упаривают. 1 олучают хлоргидрдт 1 -этоксикарбонилоксиэтил-Ф-ив аминофенилацетамидо)пеницилланат (0,35 г) в виде аморфного твердого вещества, идентифицируемого по его ИК-спектру.П р и м е р 5. 1 -АцетоксиэтилЬ-(О-М -амино-и-Фторфенилацетамидо)- пеницилланат.Хлоргидрат 1 -ацетоксиэтил-аминопеницилланата (3,4 г, 0,01 моль) в сухом димстилформамиде (50 мл) перемешивают на ледяной бане и .обрабатывают Я,И-диметиланилином (2,4 г, 0,002 моль), а затем раствором хлорангидрида К -азидо-м-фторфенилуксусной кислоты (2, 1 г, 0,01 моль) в сухом эфире (5 мл). После перемешивания в течение -1 ч добавляют воду (100 мл), доводят рН смеси до 6,5 и экстрагируют трижды этилацетатом. Соединенные органические экстракты промывают водой и рассолом, высушивают и упаривают под вакуумом. Получают 1 -ацетоксиэтил-0- сб -азидо-м-фторфенилацетамидо)пеницилланат (1,5 г) в виде маслянистого остатка. Этот продукт дает сильное ИК-поглощение при 2110 и 1780-1750 см , указывающее на присутствие азидогруппы, /3 -лактамного кольца и карбонильных групп сложных эфиров.Азидозамещенное сложного эфира (0,7 г) растворяют в 607.-ном этаноле (7 мл) и добавляют к предварительно гидрированному каталитическому никелю Ренея (0,7 г) в 803-ном этаноле (5 мл). Гидрирование про 1153830исходит в течение 30 мин в условиях окружающей среды. Катализатор удаляют Фильтрованием и промывают этанолом. Соединенные фильтраты концентрируют под вакуумом при 35 С до 5 маслянистого остатка которь 1 й растворяют в этйлацетате. Добавляют воду (20 мл) и доводят рН до 1,6 добавлением 2 н.раствора соляной кислоты к перемешиваемой смеси. Водную Фазу отделяют и упаривают под вакуумом при 35 С. Получают хлоргидрат 1 -ацетоксиэтил-(О-Ж -амино-мФторфенилацетамидо)пеницилланат (0,4 г) в виде кристаллического15 остатка,Продукт задерживает рост БсарЬу 1 ососсцз ацгецз, Оксфорд, при концентрации 0,25 г/мл и дает сильное ИК-поглощение при 1760 см, свой ственное Д -лактаму.П р и м е р 6. 1 -Ацетоксиэтил-(0- -амино-п-оксифенилацетамидо)- пеницилланат.(-) И-(1-Метоксикарбонилпропен-ил)- -амино-п-оксифенилацетат натрия (2,9 г, 0,01 моль) в сухом этилацетате (40 мл) перемешивают и обрабатывают при температуре от - 15 до -20 С М-метилморфолином ЭО (несколько капель), а затем изобутилхлорформиатом (1,4 г, 0,01 моль). Через 5 мин быстро добавляют раствор 1 -ацетоксиэтил-аминопеницилланата (3 г, 0,01 моль) в этилацетате Э (20 мл), охлажденном до -15 С. После перемешивания в течение 1 ч без наружного охлаждения реакционную смесь промывают водой, 0,5 М раствором бикарбоната калия, высушивают и упари вают под вакуумом при комнатной температуре досуха, Остаток растворяют в смеси (1: 1) тетрагидрофурана и воды (50 мл), перемешивают и выдерживают в течение 30 мин при рН 2,5, 45 добавлением 2 М, раствора соляной кислоты. Тетрагидрофуран упаривают под вакуумом, а остающуюся водную фазу промывают этилацетатом, разбавляют изопропанолом и упаривают под 50 вакуумом при комнатной температуре. Получают хлоргидрат 1 -ацетоксиэтил-(0-6, -амино-и-оксифенилацетамидо)- пеницилланата (2,3 г) в виде белых кристаллов, Продукт дает сильное 55- ИК-поглощение при 1760 см , свойственное,Э -лактаму и карбонильным группам сложных эфиров. Он, как было найдено, ингибирует рост ВйарЬу 1 ососсцз ацгецз, Оксфорд, при концентрации 0,25 мг/мл.Применяемый раствор-ацетоксиатил-б-(О-а -аминофенилацетамидо)- пеницнлланата получают нейтрализацией водного раствора его хлоргидрата и экстрагированием этилацетатом.П р и м е р 7, 1 -Этоксикарбонилоксиэтил-(П- М -амико-и-оксифенилацетамидо)пеницилланат.Согласно методике примера б получают 1 -этоксикарбонилоксиэтил-(0- о -амино-и-оксифенилацегамидо)пенцилланата, выделяемый в виде его хлоргидрата (1,4 г) из (-) И-(1-метоксикарбонилпропен-ил)- оамико-л-оксифенилацетата натрия (2,8 г, 0,01 моль) и 1 -этоксикарбонилоксиэтил-аминопеницилланата (0,01 моль).Продукт дает сильное ИК-поглощение при 1760 см , показывающее. на присутствие,9-лактама и карбонильных групп сложных эфиров, Было найдено, что он задерживает рост микроорганизмов вида ЯСарЬу 1 ососсцз ацгецз, Оксфорд, при концентрации 0,25 мг/мл. П р и м е р 8. 1-Ацетоксиэтил-(ф 6 -амико-Фурилацетамидо)-пеницилланат.Я-(1-Иетоксикарбонилпропен-ил)- -амино-фурилацетат натрия (2,5 г, 0,0095 моль) и Н-метилморфолин (0,05 мл) в сухом этилацетате (40 мл). перемешивают и обрабатывают при -15 С изобутиловым эфиром хлормуравьиной кислоты (1,4 г, 0,01 моль). Через 5 мин добавляют 1 -ацетоксиэтил-аминопеницилланат в этилацетате (20 мл) при продолжении перемешивания и при -15 С, Через 10 мин после прекращения добавления охлаждающую баню удаляют и перемешивание продолжают еще 45 мин. Реакционную смесь промывают водой, 0,5 моль бикарбоната натрия и снова водой, высушивают и концентрируют под вакуумом до маслянистого остатка, который обрабатывают тетрагидрофураном (20 мл) и водой (20 мл) и доводят рН до 2,5 в течение 30 мин добавлением разбавленной соляной кислоты, Большую часть тетрагидрофурана упаривают под вакуумом и водную фазу промывают этилацетатом и лиофи-" лизируют. Получают хлоргидрат 1 -ацетокси-(М -амино-фурилацетамидо)пеницилланата (1,9 г) в виде белойстекловидной массы,Продукт, как было найдено, задерживает рост микроорганизма видаБСауЬу 1 ососсцз ацгеиз, Оксфорд при 5концентрации 0,63 мг/мл и дает сильное ИК-поглощение при 1760 см , свой-ственное ф -лактамному кольцу игруппам сложных эфиров.П р и м е р 9, 1 -Этоксикарбо 10нилоксиэтил-(М -амино-тиенилацетамидо)пеннцилланат.По методике, описанной в примере 8, получают хлоргидрат 1 -этоксикарбонилоксиэтил-(М -амино-тиенил ацетамидо)пеницилланат из 1 -этоксикарбонилоксиэтил-аминопеницилланата и И-(1-метоксикарбонилпропенил)-с -амико-тиенилацетата натрия.20Продукт, как было найдено, даетсильное ИК-поглощение при 1760 смчто показывает на присутствие-лактамного кольца и остатков сложныхэфиров.П р и м е р . 10. 1 -Ацетоксиэтил 6-(0- М -амино-тиеиилацетамидо)пеницилланат.Хлоргидрат 1 -ацетоксиэтил- й -амино-тиенилацетамидо)пеницилланага (1,2 г) получают по методикепримера 8 из М-(1-метоксикарбонилпропен-ил)-К -амино-тиенилацетатанатрия (2,8 г, 0,01 моль) и 1 -ацетоксиэтил-аминопеницилланата(0,01 моль).Продукт дает сильное ИК-поглощение, свойственное 3 -лактаму и группе сложного эфира (при 1760 сьй .П р и м е р 11. Свободное основанне 1 -этоксикарбонилоксиэтил(Э-Ф, -аминофенилацетамидо)пеницилланата,Гидрохлорид 1 -Этоксикарбонилоксиэтил-(Р- м -аминофенилацетамидо)пеницилланата (5,4 г, О, 11 моль)растворяют порциями в 100 мл охлаждаемой льдом воды при перемешиваниина ледяной бане. При энергичном перемешивании добавляют 200 мл диэтилового эфира с последующим добавлением 5 г бикарбоната натрия. Смесьподдерживают при энергичном перемешивании в течение 1 мин, когда весьбикарбонат натрия растворяется. Орга ническую фазу отделяют и промывают125 мл ледяной воды, а затем сушатс помощью перемешивания в течение 15 мин на ледяной бане с 2 г безводного сульфата магния и фильтруют,При перемешивании прн О.С добавляют100 мл петролейного эфира по каплямло тех пор, пока не получают мутныйраствор, Последний затем хранятпри -25 С в холодильнике в течениеночи, давая кристаллический осадокиз пластин и длинных игл (5-10 мм).Осадок декантируют и сразу жепомещают под высоким вакуумом надпятиокисью фосфора, получая белыйпродукт из микрокрнсталлических пластинок и иголок 1,5 г (30 ) свободного основания 1-зтоксикарбонилокснэтил-(Р--аминофенилацетамидо)-пеницилланата с точкой плавления 4849 С,Данные йодометрического анализапоказали чистоту 87 н 5,8 пенициллановой кислоты,Кривая ИК-спектра имеет сильнуюполосу при 1780 см для / -лактамаи при 1760 см для группы сложногоэфира карбоновай кислоты.Н-ЯМР ПМСО 46, 6 млы. долей,ТМС в качестве внутреннего стандарта): 1,22 (т., ЗН, 3 = 7 Гц)1 1,44(д ЗН)1 4,15 (кв., 2 Н, 3 = 7 Гц);6,62 (кв., 1 Н, 1 = 5 Гц) для группысложного эфира карбоновой кислотыи 5,41 (д., 1 Н, 1 = 5 Гц) и 5,51(д., 1 Н, Л = 5 Гц) для /3 -лактамныхпротонов. Кривая ЯМР показала резонанс для сложного эфира в смеси эпимеров сложноэфирной группы в соотношении 65:35 при 3 4,34 и 4,37 (с1 Н) С -протон.К маточной жидкости добавляют дополнительно 50 мл холодного (-20 С)п эфира. Раствор выдерживают в течение ночипри -25 С, получая кристаллический продукт из длинных игл, которые отфильтровывают нахолодном стеклянном фильтРе С и промывают 5 мл холодного петролейногоэфира. Фильтр с кристаллическим продуктом сразу же сушат в холодномэксикаторе, получая кристаллическийпродукт из длинных игл (10-15 мм)весом 0,5:г (10 ) с точкой плавления48-51 С.Данные йодометрического анализапоказали чистоту 877П р и м е р 12. Свободное основание 1 -этоксикарбонилоксиэтил(П- -аминофенилацетамидо)пеницилланата,14 30 КукурузныйкрахмалСтеаратмагния 101 102 10 10 Количество сложных эфиров соответствует 250 мг свободного ампициллина. В качестве контроля применяют имеющиеся в продаже таблетки (доктациллин 0,25 г), содержащие 250 мг свободного ампицнллнна. Таблетки принимают натощак. Берут образцы крови в определенные интервалы времени и подвергают их ануаизу на определение содержания ампицнллина с применением микробиологических проб. В твбл. 1 приведены концентрации антибиотика в сыворотке со средней стандартной ошибкой. Средние кумулятивные выделения с мочой через 8 ч следующие, Х к дозе:Соединение 1 534+2,5 Соединение 11 53,7+4,9 Ампицнллин 34,5+2,8 П р и и е р 14. Гидролиз сложных эфиров аиинопенициллина в соответстеующие аминопеиициллины в буфере и в присутствии сыворотки крови человека. Гидролиз сложных эфиров аминопенициллинов, полученных согласно изобретению, определяют в буферном растворе в присутствии и отсутствии сыворотки крови человека. Сложные эфиры выдерживают в течение 30 мин при 37 С при концентрации 10 г/мл в фосфатном буфере Серенсена (рН 7,4), а в другом опыте - в таком же буфере, содержащем 103 сыворотки крови человека. Испытуемые растворы экстрагируют этипацетатом для удаления негидролизованных сложных эфиров и подвергают микробиологическому анализу на содержание аминопеннциллинов, контрольные величины были получены при растворении сложных эфиров в фосфатном буФере при тех же концентрациях и непосредственно перед зкСтрагированием. Величины в табл.2 скорректированы.Как видно из приведенных данных, новые соединения проявляют высокую скорость их всасывания н гидролиза при повышенном максимальном сывороточном уровне и более коротком времени его достижения. 13 115383,2 г (0,006 моль). гидрохлорида1 -этоксикарбонилоксиэтил-(Р-Маминофенилацетамцдо)пеницилланатарастворяют порциямн в 150 мл холодной воды при + 1 С и промывают трираза .диэтиловым эфиром, ВоднУю фазу освобождают от эфира упариваниемв вакууме и добавляют по каплям к150 мл холодной воды при охлаждениильдом, при этом в это же самое время 10непрерывно из автотитратора добавляют 2,0 н.гидроокись натрия. чтобы рН поддерживать постоянным науровне 9-9,5, что во время реакции 1 зсоставляет до 10 мин, Добавление .2 н.раствора гидроокиси натрия начинают, когда к реакционному растворудобавлено 103 раствора гидрохлорида.Выпавший в оеадок продукт фидыруют на холодной (-10 С) воронкеБюхнера, промывают 2 х мл холоднойводы (+ОС) и быстро переносят в зксикатор для сушки и вакууме при1 мм рт.ст,у получая 2, 10 г (753) 25свободного основания 1 -зтоксикарбонилоксиэтнл-(В-а -аминофенилацетамидо)пеницилланата.Чистота по данным меркуриметрического анализа (ртутный анализ) состав 30ляет 96,47.Н-ЯИР (0 ИСО Й 6, омлн долей, ТИСв качестве внутреннего стандарта):1,22 (т., ЗН, Л = 7 Гц), 1,44 (д.,ЗН); 4, 15 (кв., 2 Н, Л 7 Гц) 6,62 у(кв 1 Н, 1 = 5) для группы карбонатного сложного эфира и 5,41 (д.,1 Н, Л = 5 Гц) и 5,51 (д., 1 Н, Л =(1) и 1 -ацетоксиэтил-(0- М -аминофенилацетамидо)пеницилланата (11)на опытах с 9 здоровыми добровольцами мужского пола с применением6-(0- -аминофенилацетамидо)пенициллановой кислоты - ампициллин 2,в качестве контроля. Соединениявводят в виде таблеток следующего усостава, мг; 1 11Сложный эфирпенициллина 359 3381153830 16 15 ны товлены препараты по следующей рецептуре; 35 исахаридов 4,0 г рия 0,1 гДо 100 г Табли а 1 Коицвитрации антибиотика в Соединение 4,79 3,47 +0,35 +0,32 5,38 3,88 +0,38 +0,33 5,99+О 31 П р и м е р 15. Токсичность сложных эфиров аминопенициллинов при внутривенном введении мышам.Исследовалась острая токсичность соединений согласно изобретению при 5 внутривенном введении их мьппам. Каждая доза испытывалась на группе из 10 животных и такие соединения как гидрохлориды растворялись в физиоло.гическом растворе и вводились в боковую копчиковую вену мышам, за которыми после введения устанавливалось наблюдение в течение 7 дней. Во всех случаях смерть наступала через 2 ч после введения, Результаты даны в табл. 3.. П р и м е р 16. Лекарственные препараты.Для получения таблеток составлены препараты но следующей рецептуре:а) Хларгидрат 1 -ацетоксиэтил-б-(П-е 6 -аминофенилацетамидо)-пеницилланата 338 мгКрахмал 100 мл ф 5Стеарат магния 10 мгб) Хлоргидрат 1 -этоксикарбонилок сиз тил-Э-Ааминофенилацетамиио) пеницилланата 359 мг 30Крахмал 100 мгСтеарат магния 10 мгв) Хлоргидрат этоксикарбонилоксиметил(О-М - амииофенилацетамидо) пенициллииата350 мгКарбонат кальция 100 матСтеарат магния . 10 мгг) Хлоргидрат 1 -этоксикарбонилоксиметил-(ВМ -амияофенилацетаиидо).- пенициллината 359 мгЛактоза 100 мгСтеарат магния 10 мгд) Хлоргидрат 1 -этокси-. 4карбонилоксиметил-(0-0,5 1 1,5. 2-амино-м-фторфенилацетамидо)пенициллината 370 мг Иикрокристаллическаяцеллюлоза Авицель 100 мг Стеарат магния 10 мг е) Хлоргидрат 1 -ацето(ксиэтил-(Р-к -аминофенилацетамидо)пеницнллината 338 мг Карбонат кальция 100 мг Лактоза 100 мг Стеарат магния 10 мг Для заполнения в капсулы составлеследующие рецептуры:.ж) Хлоргидрат 1 -ацетоксиэтил- (Л- К-аминофенилацетамидо)пенициллинатаСтеарат магнияз) Хлоргидрат 1 -этоксикарбонилоксиэтил-б-(Р-Ы -аминофенилацетамидо)пенициллината 350 мгЛактоза 40 мгСтеарат магния 5 мгДля пероральных суспензий пригои) Хлоргидрат 1 -ацетоксиэтил-(Э- ж-аминофенилацетамидо)пенициллинат 34 мг Ионостеарат алюминия 50 мг "Танин" 1,2 мг Арахисовое масло До 1000 мг к) Хлоргидрат 1 -этоксикарбонилоксиэтил-(О-Ф-аминофенилацетамидо)- пенициллината 36 у.- Вензонат натрия 0,48 г. Хлористый натрий 0,75 г Отдушка 4,7 г "Аэросил" 0,3 г "Антифоам" О, 0375 г Соли щелочного металласульфатов полСахаринат натСорбит сыворотке, г/мм, за время, ч 3 4 6. 8 1,52 0,35 О, 12