Способ диагностики гломерулонефрита у детей

, 125 2 9) 1) 4 С 01 И 33/6 фбл ПИ ЗОБРЕТЕНИ ЕЛЬСТ ВТОРСНОМУ С ДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТ(71) Московский ордена ТрудовогоКрасного Знамени научно-исследовательский институт педиатрии и детской хирургии Министерства здравоохранения РСФСР и Институт сердечно-сосудистой хирургии им. А.Н. Бакулева(56) Вестник Академии медицинскихнаук СССР, 1972, с. 50-55.(54 ) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ГЛОМЕРУЛОНЕФРИТА У ДЕТЕЙ(57) Изобретение относится к нефрологии. Цель изобретения - повьппение точности диагностики путемопределения в моче холинэстеразы. Расчет активности холинэстераэы мочи проводят на ммоль креатининаданной порции мочи. Определениекреатинина в моче проводят на приборе ФЭК при 500-510 нм следующимобразом; в три кюветы добавляют по0,5 мл цветного реактива . В 1-ю кювету добавляют 1,0 мл дистиллированной воды, во 2-ю - 1,0 мл стандартного раствора, в 3-ю - 1,0 мл исследуемой мочи. Пробы перемешивают,инкубируют. Измеряют адсорбциюкреатинина мочи по отношению к контрольной и стандартной кюветам.При нефротической форме гломерулонефрита (ГН) активность холинэстеразы мочи 0,6-9,0 Е/ммоль креатинина.При смешанной форме ГН значение этого показателя колеблется от 15,0до 49.0 Е/ммоль креатинина.1252728 При нефротической Форме ГН понреждение гломерулярной мембраны минимально и активность ХЭ мочи 0,6- 9,0 Е/ммоль креатинина, при смешанной форме Н отмечается выраженное нарушение проницаемости клубочконой мембраны, активность ХЭ мочи колеблется от 15,0 до 49,0 Еlммоль креатинина. Иэобрет ние относится к медицине,точнее к не ролл гии,Пель изобретения - повышение точности при дифференциальной диагностике нефротической и смешанной Формгломерулонефрита (ГН) с помощьюоценки степени нарушения проницаемости гломерулярных мембран за счетопределения активности в моче холин 51 О эс"еразы.Способ осуществляют следующимобразом. П р и м е р 1. Больной К.,1974 года рождения. Клинический диагноз: ГН, смешанная Форма, непрерывно рецидинирующее течение, А 111,ПН, а.Болен 4 года. Заболевание началось остро, через 7 дней после перенесенной ангины в ниде общих отекон, гипертенэии (АЛ до 180/140),смешанного мочевого синдрома в видепротеинурии, микрогематурии и лейкоцитурии. Заболевание носило прогрессирующий характер. При поступлении состояние тяжелое, выражен общий отечный синдром, гипертензия.В крови ныявлена гипопротеинемия,диспротеинемия в виде гипер-а,-глобулинемии и гиперлинидемии, отмечалось повышение азота мочевины до28 ммоль/л и снижение клиренса эндогенного креатинина до 0,65 мл/с.Суточная потеря белка в моче колебалась от 3,3 до 33 г. Селектинностьпротеинурии проводилось электрофоретическим методом на бумаге. У ребенка протеинурия этим методом определена как селективная. Параллельнопроводят исследование активностифХЭ мочи оптимизированным кинетическим методом, Для исследования используют разовую порцию мочи, собраннуюс 8 до 9 ч утра. В течение 5 минмочу подвергают центрифугированиюпри 3000 об/мин. В течение 2 ч 2 мл мочи подвергают диализу с помощью диализных мешочков протин физиологического растнора. Затем к 1,0 мл 50 мМ фосфатного буфера, содержащего 0,24 мл 5,5-дитио-бис-(2-нитробензойная к-та), рН 7,2 добавляют 0,05 мл диализированной мочи, размешивают, подогревают до 37 С, Послео этого добавляют 0,1 мл субстрата бутирилтиохолиниодид (готонят из расчета 24,4 мг на 1 мл дистиллированной воды), размешивают и проводят ,измерение при 405 нм на приборе ЛКБ. Параллельно проводят определениекреатинина в данной порции мочи. Дпя 45 50 55 Для исследования используют разовую порцию мочи, которую подвергают предварительному пентрифугированию (5 мин, 3000 об/мин) и цнухчасоному диализу с помощью диализных.мешочков (1 мл мочи на 20 мл физиологического раствора). Определениеактивности холинэстераэы (ХЭ) мочипроводят известным оптимизированным кинетическим методом. Для проведения одного исследования берут1,0 мл 50 мМ фосфатного буфера, содержащего О, 24 мл 5,5-дитио-бисв(2-нитробензойная к-та), рН 7,2и добавляют 0,05 мл предваритель- ,но подготовленной мочи, размешивают,оподогревают до 37 С. После этогодобавляют 0,1 мл субстрата бутирилтиохолиниодид (готовят из расчета24,4 мг на 1 мл дистиллированнойноды), размешивают и производят измерение или оптимизированным кинетическим методом на аппарате ЛКБ,или на приборе Спектроникпри,4 )5 нм, Расчет активности ХЭ мочийроводят на 1 ммоль креатинина данной порции мочи и выражают в Е/ммолькреатинина, Определение креатининав моче проводят на приборе ФЭК при500-510 нм. Определение проводятследующим образом: в 3 кюветы добавляют по 0,5 мл цветного реактива(9 ч. пикриновой кислоты и 1 ч гидроксида натрия), затем в первую кювету добавляют 1,0 мл дистиллированной воды (контрольная проба), вовторую - 1,0 мл стандартного раствора (10 ммоль/л, стандартная проба), в третью - 1,0 мл исследуемоймочи, предварительно разведенной в500 раэ дистиллированной водой; пробы перемешивают, инкубируют 20 минпри комнатной температуре, Измеряютабсорбцию креатинина мочи по отношению к контрольной и стандартнойкюветам,15 го г 5 30 35 403 1252728 4 этого в 3 кюветы добавляют по 0,5 мл селективная. Исследование активности цветного реактива (9 частей пикрино- ХЭ мочи, проведекное предлагаемым вой кислоты и 1 часть гидроксида методом, выянило умеренно выраженное натрия), затем в первую кювету добав- нарушение проницаемости гломерулярляют 1,0 мл дистиллированной воды 5 ного фильтра - 15 Е/ммоль креатинина во вторую - 1,0 мл стандартного (корма 0,1 + 0,01 Е/ммоль креатинираствора и в третью - 1,О мл исследу- на), Морфологическое исследование емой недиализированной мочи, предва- почечной ткани показало что у ребеналов рителько разведенной в 500 раэ дис- ка имеет место мембрако-пролифератиллированной водой. Пробы перемеши тинный ГН с фокальным гломеруловают, инкубируют 20 мин при комнат- склерозом и бту улеинтерстициальным ной температуре. После этого изме- компокектом. Таким образом выявленряют абсорбцию креатиника мочи по ное умеренное нарушое умеренное нарушение проницаемосотношению к контрольной и стандарт- ти гломерулярного фильтра предланой кюветам на приборе фЭК при 500- 5 гаемым способом более адекватно от нм. Расч те активности ХЭ мочи ражает морфологические изменения в проводят у ребенка на ммоль креати- почечной ткани по сравнению с иэнина данной порции мочи. Активность весткым.достигает 48 Е/ммоль креатинина(норма 0,1 1 0,01 Е/ммоль креатинина), 20 1969 года рождения. Клинический диаг. Таким образом у ребенка выявлено ноз: ГН, нефротическая форма, А 111 резкое нарушение проницаемости гло- . ПН,а.меруляркого Фильтра, что соответ- Больна 2 г да, 3 бгода, а олевание раэвиствовало клинико-лабораторной кар- налось постепенно с появления отека тине заболевания. Очень высокие и протеинурии протеинурии после переохлаждения. цифры активности ХЭ указывали на При поступлери поступлении состояние тяжелое, неблагоприятное течение заболевания выражен отечныи синдром. В крови что подтвердилось в дальнейшем гипопротеинемия, диспротеинемия н прогрессирующим течением заболена- виде гипер-а -глобулиулинемии, гиперния, которое закончилось летальным 30 холестеринемиимии, отмечалось повышение исходомазота мочевины до 21,4 ммоль/л иПредлагаемый способ диагностики снижение клире склиренса эндогенного креати. по сравнению с известным характе- о , мл с. уточная потерянина до 0 87 / . Сбелка до 15,6 г, протеинурия селекризуется большей точностью.П р и м е р 2. БольнойР ол кой А у 5 тивного характера. Исследование ак года о ения. Клинид Р жд Я. Клинический ди- тивности ХЭ, проведенное предлагаеагноз: ГН смешанная фо ма волноФмым способом, выявило умеренное наобраэное течение. А 11 ПН а.ф рушение проницаемости гломерулярБолен 13 лет. Заболевание нача- ного фильтра, Активность ХЭ не прелось остро через 2 недели после пе вышала 9,0 Е/ммоль креатинина.Диагренесенной пневмонии в виде мочево- ностируют нефротическую Форму ГН.го синдрома, который с самого нача- П р и м е р 4. Больной В., ла носил смешанный характер, отме года рождения. Клинический чался выраженный отечный синдром и диагноз; ГН, нефротическая Форма, гипертензия (АД до 180/120). Заболе А 111 ПН,а. ванне носило прогрессирующий характер. При поступлении в кликику сос- Б олен чч года, Начало постепенное таяние тяжелое, выражен отечный с появления отеков, протеинурии. синдром, гипертекзия, В крови выяви- П ри поступлении состояние средней лись гипопротеинемия, диспротеинемия 50 тяжести, выражен отечный синдром. н виде гепер-а,-глобулинемии, ги- В крови гипопротеинемия, диспротеиперхолестерикемии, отмечалось повы- немия в виде гипер-а,-глобулинемии шение азота мочевины и снижение кли 2 ",гиперхолестеринемии отмечалось лоренса эндогекного креатинина до вьппение азота моченины до5,4 ммоль/л 0,72 мл/с. Суточная потеря белка 55 и снижении снижение клиренса экдогенного с мочой колебалась от 3,8 до 14 г. креатинина до 1, 05 мл/с, Суточная Определена селектинность протеину- потеря белка ч, ч, 9 г, протеин ия рии электрофоретическим методом -поте б ч, чУРопределена электрофоретическим ме1252728 Морфологическое исследование почечной ткани показало, что у ребенка имеет место пролиферативный меэангиальный и миннмаЛьный гломерулонефрит. Составитель М. ПознякРедактор О. Бугир Техред В.Кадар Корректор Е. Сирохман Заказ 4618/46 Тираж 778 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д . 4 /5Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная,4 5тодом - селективная. Исследование активности ХЭ предлагаемым способом показало, что у ребенка имеет место незначительное нарушение проницаемости гломерулярного фильтра, несмотря на высокую активность нефротического процесса: 0,6 Е/ммоль креатинина (норма 0,1 1 0,01). формула изобретения.Способ диагностики гломерулонефрита у детей путем определения активности ферментов в моче, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с цельюповышения точности при дифференциальной диагностике нефротическойи смешанной форм гломерулонефрита,определяют активность холинэстераэы 1 О и при значении этого показателя 0,69,0 Е/ммоль креатинина диагностируютнефротическую форму гломерулонефрита,а при значении 15,0-49,0 Е/ммоль креатинина-смешанную форму.