Способ обнаружения уробилиногена

пц 535914 Союз Советских Социалистических Республик(31) Р 2130559,9 (33) ФРГОпубликовано 15.11.76 БюллетеньГосударственньш комитетСовета Министров СССРпо ледам изобретенийи отхргнтнй 53) УДК 616-074 (088.8 та опубликования описания 15.02,7 Иностранцыитер Бергер, Ханс-Георг Р(ФРГ)остранная фирмагер Манихайм ГмбХЬЬд я,рГ"; СОБ ОБНАРУЖЕНИЯ УРОБИЛИНОГЕНА 54 Изобретение относится,к области медицины.Известен способ определения уробилиногена в моче на оонове цветной реакции с помощью индикаторной пленки, приготовленной обработкой смесью п-диметилбензальдегида, ортофосфорной кислоты, поливинилацетата, органического сульфоната натрия, метанола.Цель изобретения - повышение чувствительности способа и обеспечение возможности определения уробилиногена в присутствии билирубина.Для достижения поставленной цели в качестве индикатора используют бензолдиазониевые соли общей формулы орат, тет- рилсульВ качестую кисбума аю. рас=10+ 0 20 00- окси, ал я группа;К кси-, алки лкиламинн атков Р 1 и ом, метиль алкокнокси-, капто-,один родом,килмеркапто-, низкаяе - окси-, алкокси-, флмеркапто-, фенилмерая группы. При этоК, может быть водной группой. где К,сильна аралко фенила из остгалоген гена еакным сек тлино ной р рмал 5 - 10 в мо АвторыизооретенияВальтер Риттерсдо 2Йв и К, - водород, галоген, окси-, алкоксинокси-, алкилмеркапто-, фепилмеркаптонплалкиламинная группы. 5 Х - хлорид, сульфат, тетрафтор9рахлорцинкат, гексахлорантимонат,фонат, остаток карбоновой кислоты.ве кислоты используют метафосфорлоту.0 П р и м е р 1. Фильтровальную(Шлайхер и Шюлл 23 51.) пропптыввором следующего состава:Фторборат 4-метоксилбензолдиазония, г5 Метафосфорнаякислота, гДодецилбензолсульфокислота (натриеваясоль), гМетанол, млВода, мл ПЗатем ее сушат при 40 С. При погружении в мочу без уроб 25 индикаторная бумага не дает цвет ции, При погружении в мочу с но содержанием уробилиногена через бумага получает розовый цвет, а0,5 повышенным содержанием уро бил иногенавкармино-красный,Такие же цветные реакции дает индикаторная бумага, содержащая 0,3 г следующих диазониевых солей:фторборат 2-метоксибензолдиазония;сульфат 2-оксибензолдиазония;сульфат 4-оксибензолдиазония;фторборат 2,4-диоксибензолдиазония.П р и м е р 2. Фильтровальную бумату(Шлайхер н Шюлл 23 51.) пропитывают раствором следующего состава, г:Фторборат 4-метоксибензолдиам мания 0,3Щавелевая кислота 10,0Затем ее сушат при 40 С,П р и м ер 3. Фильтровальную бумагу(Шлайхер и Шюлл 23 Я 1.) пропитывают раствором следующего состава:4-Этокснанилин, гИзоамилонитрил, млЩавелевая кислота, г1-1 атриевая соль доде- цилбензолсульфокислоты, г 0,4Метанол, мл До 100Затем ее сушат прн 40 С,Эта индикаторная бумага реагирует с мочой, содержащей уробилиноген, с образованием кармино-красного цвета.Фиолетовый оттенок индикаторная бумагаполучает, если 4-этоксианилин заменить равными количествами 2-этокси-, 4-бутокси-, 4 фенокси-, 4-метокси-метил-, 2-метокси-метил-, 2-метилмеркапто-метилмеркапто-хлорметокси-метил-, 5-хлор-окси- или 4-бензилоксианилином.П р и м е р 4, Фильтровальную бумагу(Шлайхер и Шюлл 23 Я 1.) пропитывают раствором следующего состава:1. Фторборат 4-ацетамидобензолдиазония, г 0,3Метафосфат натрия, г 5,0Вода, мл До 10011, Щавелевая кислота, г 10,0Лаурилсульфат натрия, г 0,5Метанол, мл До 100Затем ее сушат.Эта индикаторная бумага реагирует с мочой,содержащей уробилиноген, с образованиемкармнно-красной окраски.Пропитанная аналогичным способом фторборатом 3-метокси-ацетамидобензолдиазония бумага реагирует с красно-фиолетовой окраской.П р и м ер 5. Фильтровальную бумагу(Шлайхер и Шюлл 23 81.) пропитывают раствором следующего состава:Толуолсульфат 3-хлор-метоксибензолдиазония, гСульфосалнциловая кислота, г 5,0Додецилбспзолсульфокислота(натриевая соль), г 0,8Метанол, мл До 100 г 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 Эта индикаторная бумага при погружениив мочу, содержащую уробилиноген, дает кармино-красную окраску, При погружении в мочу, содержащую билирубин, через 10 - 20 секполучают сине-зеленую окраску. Моча, содержащая уробилпноген и бплирубин, дает соответственно их содержанию полутона междуэтими двумя окрасками,П р и м е р б. Полиэфирное волокно пропитывают раствором следующего состава:Бснзолднаммопневая соль, г 0,1Сульфосалициловая кислота г 10,0Натриевая соль додецилбензолсульфокислоты, т 0,4Метанол/вода 1: 1, мл До 100Применяют следующие диазониевые соли:2-метокси - 5 - хлорбензолдиазоннйтетрацннкат (прочная красная соль ЯС);4- бензамидо-метил-метоксибензолдиазо -нийтетрахлорцинкат (прочная фиолетоваясоль К);4 -бензамидо,5 -диметоксибензолдиазонийтетрахлорцинкат (прочная синяя соль КК);4-бензамндо - 2,б - диэтоксибензолдиазонийтетрахлорцинкат (прочная синяя соль);4 - метоксифениламинбензолдиазонийхлорид(варнамин, синяя соль В).При реакции сульфата кислого фенпламинобензолдиазонита с мочой, содержащей уробилнноген, получают следующие окраски;красно-синяя;красно-фиолетовая;сине-фиолетовая;сине-фиолетовая;сине-зеленая;сине-зеленая.П р и м е р 7. Фильтровальную бумагу(Шлайхер и Шюлл 23 81.) пропитывают водными растворами, в которых кроме 5 г кислого сульфата натрия содержится до 0,5 г следуюшеи диазониевой соли на 100 мл:фторборат 2,4-диметоксибензолдиазония;фторборат 3,4-диметоксибензолдиазония;фторборат 2,5-диметоксибензолдиазония;фторборат 3,4,5-трпметоксибензолдиазония;фторборат 4-окси,5-дихлорбензолдиазония;фторборат 5-хлор,4-диметоксибензолдиазония.Все эти индикаторные бумаги реагируют смочой, содержащей уробилиноген, с образованием от красной до лилово-красной окраски.Если эти индикаторные бумаги пропитать1%-ным раствором следующих смачивающихвеществ, то получают прочные от красно-фиолетовой до сине-фиолетовой окраски; додецилбензолсульфокислоты (натриевая соль) в метиленхлориде, лауралсульфат натрия в хлороформе - метаноле, додекансульфокислота(Шлайхер и Шюлл 23 81.) пропитывают раствором следующего содержания:535914 Составитель Г, Смирнова Техред А. Камышникова Редактор Э. Шибаева Корректор 3. Тарасова Заказ 450,6 Изд.1861 Тираж 1029 ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Подписное Типография, пр. Сапунова, 2 5-Аминосалициловая кислота, г 0,2 Метафосфорная кислота, т 15,0 Нитрит натрия, г 0,1 Натриевая соль додецилбензолсульфокислоты, г 0,4 Метанол, мл 5 Вода, мл До 100Индикаторная бумага реагирует с мочой, содержащей уробилиноген, с образованием кирпично-красной окраски. Бумага, пропитанная 5-амино-сульфосалициловой кислотой, реагирует с образованием кирпично-красной окраски,Формула изобретения1, Способ обнаружения уробилиногена, например, в моче, на основе цветной реакции при взаимодействии исследуемого образца с носителем, обработанным смесью индикатора, кислоты, поверхностно-активного вещества и стабилизатора, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения чувствительности и обеспечения возможности определения уробилиногена в присутствии билирубина, в качестве индикатора используют бензолдиазониевые соли общей формулы где К, - окси-, алкилмеркапто-, низшие алкоксигруппы;10Яз - окси-, алкокси-, .фенокси-, аралжокси-,алкилмеркапто-, фенилмеркапто-, фенилалкиламиногруппы, замещенные фениламиноили ациламиногруппы; при этом один из остатков К, и Рз могут также быть водородом, галоидом или метильной группой;Кз и К 4 - водород, атом галоида, окси-, алкокси-, фенокси-, алкилмеркапто-, фенилмеркапто-, фенилалкиламино-, замещенные феннламино-, ациламино-, алкил-, сульфо- и карбокоильные группы;Х - хлорид, сульфат, тетрафторборат, тет 9рахлорцианат, гексахлорантимонат, арилсульфонат или остаток карбоновой кислоты.25 2, Способ по п, 1, отличающийся тем,что в качестве кислоты используют метафосфорную кислоту.