Штамм гриба oospora lастis, гидролизующий жиры и жиросодержащие вещества

)5 С ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯПРИ ГКНТ СССР У СА ИЗО СКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ АВ речными перегородками на дрожжевидные клетки-оидии, которые сначала имеют резко обрезанные концы, затем они округляются. Оидии размером (7-20) (6-9) мкм располагаются цепочками, которые легко распадаются. Иногда они образуют внутри нити мицелия. Встречаются крупные клетки раз- мером (10-28) (12 - 18) мкм, составляющие 12 , а также 15 ф карликовые клетки размером (1,5-4) (1,2-3,5) мкм, Молоко гриб пептонизирует, желатин разжижает,Изобретение относитсяк биотехнологии и касается штаммов, гидролизующих липиды.Известны штаммы 6 отгсЬцй) сапббцп), ЯЫорцз и)сгозрогцз, Оозрога тга 9 гапз. Оеосгс)цп) гпатаепзе и другие, способность разрушать жиры и жироподобные вещества.Наиболее близким к изобретению является микроскопический гриб Оозрога асдз штамм.узЛМ Известный штамм обладает недостаточно высокой липолитической активностью.Цельк изобретения является получение более аффективного штамма с повышенной липолитической активностью и сокращенной продолжительностью культивирования,Полученный штамм Оозрога астз ВКПМ Римеет следующие морфологокультуральные и Физиолого-биохимические характеристики: культура образует хорошо развитый мицелий величиной 4-10 мкм в поперечнике с редкими перегородками. Отдельные ветки мицелия расчленяются попеВ качестве источников углерода культура усваивае глюкозу, сахарозу, лактозу,мальтозу, галактозу, ксилозу, арабинозу,крахмал, яблочную, лимонную, уксуснуюкислоты, а также оливковое, хлопковое, подсолнечное, кукурузное масла, говяжий и бараний жиры,В качестве источников азота используютаммонийные соли: МН 4 И 2 РО 4, (МИ 4)НРО 4.(ЙН 4)зРО 4, ЙН 4 С, ЙН 4 ЙОз, (МНфЯО 4,Несколько хуже растет на средах с ниратными солями: ЙгйОЗ, КМОз, Са(ЙОЗ)2:(21) 4797351/13(57) Использование: биотехнология, пище- (22) 27.02.90вая промышленность. Сущность изобрете- (46) 23.08,92. Бюл. М 31 .:ния: возможность использования штамма (71) Среднеазиатский научно-исследова- длягидролизажиров, Штамм Оозрогаастз тельский и проектно-конструкторский инс-ВКПМ Рполучен обработкой УФ-лучами титут пищевой промышленности . штамма УзЛМ, Колонии белые, бархати- (72) Р.Э. Фрейман, С.К.-А, Нурматова и стые, плоские с выпуклой серединой. Края Х.Т. Саломов состоят из прямых мицелиевидных нитей. (56) Авторское свидетельство СССРПолученная культуральная жидкость имеет М 534489, кл. С 12 Й 1/14, 1975. высокую липазную активность с сокращен- (54) ШТАММ ГРИБА ООЗРОВА АСТ 3, нойпродолжительностьюкультивирования, ГИДРОЛИЗУОЩИЙ ЖИРЫ И ЖИРОСО- Максимальная активность липазы до 5,9- ДЕРЖАЩИЕ ВЕЩЕСТВА 6,1 10 ед/мл наблюдается при рН 4,9.1756348 Температурные точки роста: минимум 3-4 С, максимум 37"г, оптимум 18 - 28 С, При низких температурах рост идет медленно. Отношение к рН питательной среды: растет при 4,5-8,0, оптимум 6,2-6,4. При крайних значениях рН рост кулыуры сильно замедляется. Штамм хранится при 4 ОС, на среде сусло-.агар 7 Блг в течение 6 мес. Штамм получен ультрафиолетовым облучением по известному способу бактерицидной лампой БУВ-ЗО, длина волны 2537 Ао. Водную суспензию гриба подвергали воздействию УФ-лучей в течение 5, 10, 20, 30, 45, 60 и 120 с, В результате отбора гриба с выживаемостью 3 - 80 оь получен штамм ВКПМ Г, имеющий высокую липолитическую активность. Предварительный отбор, проведенный качественным методом липаэной активности, выявил культуры, образующее зоны гидролиза жира, превышающий размер колонии на 6-11 мм по сравнению с известным способом 5 - 10 мм.Для сравнения штаммов УзЛМи г"- 412, их выращивание производилась на среде следующего состава, : настой хлопкового шрота 2; (йН 42304 0,3; СаСОз 0,1; масло хлопковое 1,В качестве посевного материала использована водная суспензия 2-суточной культуры, выращенной на сусло-агаре, Суспензия вносилась в количестве 1, в колбу емкостью 750 мл, содержащую 100 мл питательной среды.Липолитические свойства полученного мутанта изучали по сравнению с известным способом в адекватных условиях,Количественный анализ отобранных вариантов показал, что у штамма ВКПМ Гнаиболее высокой липолитической эктивноРазмеры, Характер роста (пленка, кольцо, осадок, мкм помутнение, рост по стенке пробирки) Й"10 Рыбный гидролизат, 2-суточный, 1,9-826 С Чапека (с агаром) 4-10 оСреда, Т,возраст, условия роста Сусло"агар 2-суточная, 26 С Ьдкое сусло (7 Блг) 2-суюточная, 26 С стью обладает культуральная жидкость, полученная в результате культивирования при 18 С и рН 4,9.Интенсивное размножение клеток при 5 культивировании штамма ВКПМ Гнаступает через 12 ч, а у прототипа через 15 ч и соответственно продолжительность культивирования сокращается на 3 - 4 ч. При этом максимальное накопление липэзы у 10 штамма ВКПМ Гнаступает через 18-19ч при культивировании на круговой качалке со скоростью вращения 150 - 200 об/мин, активностью 4,9 - 5,9 10 ед/мл, у прототипа2через 24 ч. Максимальная активность липа эы до 5,9-6,1 10 ед/мл наблюдается при рН4,9, которая является оптимальным условием для проведения технологического процесса при гидролизе жира.Штамм ВКПМ Рпоказал себя ста бильным при культивировании как продуцирующий активную липэзу и его можно рекомендовать для гидролиза жира.П р и м е р. Выращивание штамма проводили на среде следующего состава, О: 25 настой хлопкового шрота 2; (МН 4)2304 0,3;СаСОз 0,1,.масло хлопковое 1, на круговой качалке 200 об/мин, в колбах емкостью 750 мл, содержащих 100 мл питательной среды, в которую внесена в количстве 1% суспен зия 2-суточной культуры. Культивированиепроводилось в течение 18 ч при 28 С. Полученная культуральная жидкость используется для разложения киросодержащих продуктов.35 Формула изобретения Штамм гриба Оозрогэ эс 1 з В КПМ Г, гидролиэующий жиры и жиросодержащие вещества,Колонии в одно-двухсутоцнсй. культуре белые бархатистые, плоские с выпуклым центром и мицелевидным краем диаметром 6-11 см, Воздушный мицелий хорошо снимается, субстратный врастает в агар На среде с рыбным гидролизатом в центреколонии исчезает белый бархаристый пушоки появляется матовый кремоваты налет,который со временем занимает всю колонию. Колонии в одно-двухсуточной культуребелые бархатистые, ио менее пушистые,мицеленидиым краем диаметром 5-10 см.Рост медленнее, цем на сусло-агаре. Через двое суток культура образуеттонкую ляемку иа поверхности среды,которая сс 1 аремеием превращается этолстую бархатистую, белую пленку. В1756348 Продолжение таблицы тт ее ттт ттее е т те те тт среде помутнение и осадок отсутств уе т.Пигмент не образует. ИЯБ (мясо-пептонный бульон), 4-102-суточная, 26 С Чапека (жидкая), 2-суточная, 4102 б С Составитель С.НурматоваТехреХ М.Моргентал Корректор Н.Гунько Редактор Н,Рогулич Заказ 3062 Тираж Похписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., Ч 5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ук.Гагарина, 101 оСреда, Т, воз раст, условия роста Размеры, мкм Характер роста.,пленка, кольцо, осад.к,помутнение, рост по стенке пробирки) Образует пленку также.,как в жидкомРсусле, появляется чуть-чуть осадок.Пигмент не образует. Образуется тонкая пленка, менее пушистая, белого цвета