Способ дифференциации географических рас туляремийного микроба

)5 С 120 ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН ВИДЕТЕЛЬСТВУ АВТОРСКО Б,Н,Мишанькин, в, Г,И.Данилевская мкг, нкуГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(56) Олсуфьев Н,Г.Таксономия, микробиология и лабораторная диагностика возбудителя туляремии. М Медицина, 1975, с,.143,(54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ ГЕОГРАФИЧЕСКИХ РАС ТУЛЯРЕМИЙНОГОМИКРОБА Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано при экспресс-анализе циркулирующих в природе штаммов туляремийных микробов во время эпизоотологического или эпидемического обследований,Цель изобретения - ускорение и упрощение способа.П р и м е р 1. В пробирке с 1 мл дистиллированной воды готовят (1 - 10 млрд./мл) суспензию штамма ЕгапсзеНа магепзз Ясо (неарктическая раса), добавляют фенолфталеинфосфат (500 мкг) и инкубируют при 37 С 10 - 15 мин. Затем в реакционную смесь добавляют 1 н. раствор щелочи, например йаОН (не менее 1 капли). Смесь окрашивается в малиновый цвет, Контрольные пробирки (с кипяченой в течение 10 мин(57) Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано при экспресс-анализе циркулирующих в природе штаммов туляремийных микробов во время эпизоотологического или эпидемического обследований. Цель изобретения - ускорение и упрощение способа, Из исследуемой культуры готовят суспенэию в дистиллированной воде с концентрацией микр.клеток 1 - 10 млрд,/мл. К суспенэии добавляют фенолфталеинфосфат иэ расчета 500 - 1500 мкгlмл суспензии, инкубируют 10 - 15 мин. Затем в смесь вводят щелочь и при появлении малинового окрашивания дифференцируют штаммы американской (неарктической) и среднеазиатской рас, а при отсутствии окрашивания - штаммы голарктической разновидности. взвесью Елоагепз 1 з ИСЬКА ) остаются бесцветными.П р и м е р 2, Способ выполняют аналогично примеру 1, но используют штамм Елиагепзз 543 (среднеазиатская раса) и концентрацию субстрата 1000 мкг. В пробирке через.10 - 15 мин также появляется малиновое окрашивание.П р и м е р 3, Способ выполняют аналогично примерам 1 и 2, но используют концентрацию фенолфталеинфосфата 1500 Малиновая окраска появляется после и бации при 37"С,П р и м е р 4. Выполняют способ аналогично примеру 1, но используют штамм Е, св 1 агепз 1 з 503 (голарктическая раса) и концентрацию фенолфталеинфосфата 1000 мкг. После 10 - 15 мин инкубации и добавления1655989 Формула изобретения Составитель Г. СмирноваРедактор Т, Лазоренко Техред М,Моргентал Корректор Т. Палий Заказ 2030 Тираж 372 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101 щелочи окраска в пробирке не пеявляется и смесь остается бесцветной, как и в контрольной пробирке.Таким образом, способ позволяет быстро (10 - 15 мин) и просто дифференцировать европейскую расу.от американской и среднеазиатской, Способ ускоряет получение результатов (в 40 - 80 раз), упрощает процедуру определения разновидности Р,вагепзз (не требует сложного нингидринового реактива, не зависит от качества и точности его приготовления, не требует кипячения реакционной взвеси).Предлагаемый способ может быть использован при работе с большим набором штаммов.возбудителя, а также при работе в полевых условиях, при необходимости срочной характеристики выделенных культур Г.тцагепзз иэ объектов внешней среды, В летнее время необходимость инкубации при 37 С отпадает, так как ракция может протекать и при комнатной температуре,Способ дифференциации географических рас туляремийного микроба, включаю щий приготовление суспенэии исследуемойкультуры, инкубирование в присутствии субстрата, обработку реактивом с последующей дифференциацией штаммов американской и среднеазиатской рас от штаммов 10 голарктической разновидности по появлению малинового окрашивания реакционной смеси,отл ича ю щи йс ятем,что, с целью ускорения и упрощения способа, исследуемую культуру суспензируют в дистиллиро ванной воде, в качестве субстратаиспользуют фенолфталеинфосфат в количестве 500 - 1500 мкг на 1 мл суспензии с концентрацией 1 - 10 млрд,микр.клеток, инкубирование проводят в течение 10 - 20 15 мин, а в,качестве реактива используют щелочь.