Способ выявления хроматина в клетках

Номер патента: 1648385

Авторы: Бутусова, Жукоцкий, Ряузова, Эренпрейса

ZIP архив

Текст

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 1648385 А 1 9) 5 П 5 А 61 В- е --- . -ге еее(певиеЦ пп "Л:.ВВИл .".-и .е: пА ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(57)медино к тельскии нической ский инны А.В, жуРодоп(2 -4" С),Примют еще РНгетерохромПримреагируеттиповых бл лиза - реагируяркая реакция е р 1. 30 с гидроК, недостаточноатина.ер 2 ЗминН яркая реакцоков,гидролиза неия гетерохромаГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИПРИ ГКНТ СССР(54 СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯКЛЕТКАХ Изобретение относится к биологии, медицине и сельскому хозяйству и может бытьиспользовано для выявления формы органиэации генетического материала - хроматина и последующего анализа ядерногоизображения.Цель изобретения - повышение точности и информативности анализа,Цель достигается минимизацией кислотного гидролиза и использованием в качестве красителя азура-. Гидролиз проводят5 Н НО в течение 3 - 5 мин при 2-4 С.Способ осуществляют следующим образом.Клеточный материал наносят на предметные стекла в виде мазков, отпечатковили давленых препаратов.Фиксируют препараты 96" зтанол/ацетон (1:1) или 96 зтанол/эфир (1:1) в течение10 мин и высушивают на воздухе. Фиксацияможет быть продлена до нескольких часовили, наоборот, опущена - если исследуемыйматериал может быть окрашен не позднее2 ч после приготовления мазка,Изобретение относится к биологии, цине и сельскому хозяйству, а именцитологии, Цель изобретения улучшение контрастности и разрешения мелких деталей хроматинового рисунка в клетках, повышение точности и информативности количественного анализа ядерного изображения, Клеточный материал в виде мазков, отпечатков или давленых препаратов (нативных или фиксированных) подвергают гидролизу 5 Н НС в течение 3- 5 мин и окрашивают азур- в течение 5 мин,Далее проводят гидролиз 5 Н НС при 2-4 С (в холодильнике) в течение 3-5 мин. тщательно прополаскивают стекла в дистиллированной воде (по 1 мин 5 раз).Окрашивают созревшим 0,1 -ным раствором азура, забуференным передупот-, фреблением на 1/4 цитратным буферомЧакильвейна (рН 4) в течение 5 мин. фИзбыток красителя отмывают в дистил- гж лированной воде (5-10 с),Для приготовления длительно сохраняемого материала проводят обезвоживание в третичном бутиловом спирте, проводку через ксилол и заключение в одну из постоянных сред.Отпечатки сы, Температу о холодиль аЗаказ 1861 Тираж 453 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 П р и м е р 3. 3 - 5 мин гидролиза - оптимальная реакция,П р и м е р, 4, Интервал 6-10 мин и более (до 3 ч) - постепенно нарастает раздробление блоков гетерохроматина и появляется мелкозернистая фоновая реакция эухроматина. Комнатная температура,П ри ме р 5, К 2 - 3 мин гидролиэа экстрагирована РНК.П р и м е р 6, 3 - 3,5 мин гидролиза - оптимальная реакция гетерохроматиновых блоков, однако по сравнению с температурой холодильника она менее яркая. П р и м е р 7., Начиная с 4 мин гидролиза стремительно нарастает разрушение гетерохроматиновых блоков и появляется мелкозернистый фон.5 Формула изобретенияСпособ выявления хроматина в клетках,включающий проведение кислотного гидролиэа и окраску основным красителем, о тличающийся тем,что,сцелью 10 повышения точности и информативности анализа, проводят гидролиз 5 Н соляной кислотой в течение 3-5 мин при 2 - 4 С, при этом в качестве красителя используют азур-П.

Смотреть

Заявка

4697089, 04.04.1989

ЛАТВИЙСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ И КЛИНИЧЕСКОЙ МЕДИЦИНЫ, НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКОЙ МЕДИЦИНЫ

ЭРЕНПРЕЙСА ЕКАТЕРИНА АРОНОВНА, РЯУЗОВА ЛЮДМИЛА ЮРЬЕВНА, ЖУКОЦКИЙ АЛЕКСАНДР ВАСИЛЬЕВИЧ, БУТУСОВА НАТАЛЬЯ НИКОЛАЕВНА

МПК / Метки

МПК: A61B 10/00

Метки: выявления, клетках, хроматина

Опубликовано: 15.05.1991

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-1648385-sposob-vyyavleniya-khromatina-v-kletkakh.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ выявления хроматина в клетках</a>

Похожие патенты