C12N 15/75 — для Bacillus

Вектор рва 48, предназначенный для клонирования фрагментов днк в бациллах

Загрузка...

Номер патента: 1615180

Опубликовано: 23.12.1990

Авторы: Йомантас, Козлов, Народицкая, Стойнова, Уланова

МПК: C12N 15/75

Метки: бациллах, вектор, днк, клонирования, предназначенный, рва, фрагментов

...В, яиЬТ 111 я 83112 позволяют выявить плазмиду рВА 4,5 мкг ДНК рВА 4 обрабатывают рестриктазой ЕсоКв следующих ус"ловиях: 100 мМ тряс-НС 1, рН 7,5,10 мМ ИяС 1 р, 6 мМ 2-8-меркаптаэтанола, 50 мМ ИаС 1 р 0,5 ед, активности ЕсоК 1. Объем инкубационной5 16 смеси 40 мкл, Инкубацию проводят при 3 С в течение 20 мин, Реакцию останавливают добавлением 100 мкл 96%- ного этанола. Затем ДНК перерастворяют в 20 мкл буфера ТЕ (10 мМ трис-НС 1, рН 8,0, 0,1 мМ ЭДТА), вносят смесь дезокситрифосфатов до конечной концентрации 0,25 мМ каждого. Объем доводят до 30 мкл буфером ТЕ и вносят 2 ед, активности кленовского фрагмента ДНК-полимеразы Е.со 1 д, Реакцию достройки липких концов проводят при комнатной температуре 30 мин и останавливают добавлением...

Рекомбинантная плазмидная днк рва1418, кодирующая альфа амилазу bacillus amyloliquefaciens и штамм-бактерий bacillus amyloliquefaciens продуцент альфа-амилазы bacillus amyloliquefaciens

Загрузка...

Номер патента: 2003689

Опубликовано: 30.11.1993

Авторы: Азизбекян, Дебабов, Йомантас, Козлов, Попов, Стеркин

МПК: C12N 15/32, C12N 15/56, C12N 15/75, C12N 9/28 ...

Метки: amyloliquefaciens, bacillus, альфа, альфа-амилазы, амилазу, днк, кодирующая, плазмидная, продуцент, рва1418, рекомбинантная, штамм-бактерий

...содержит 10 мл 1%- ного растворимого. крахмала, растворенного в 15 мМ йа-К-фосфатном буфере, рН 6,0, и 5 мл исследуемого образца (разведенного в 2 мМ ацетатном буфере, рН 6,0, 03, мМ СаС 2, 100 мМ МаС), Контроль вместо исследуемого образца содержит 5 мл буфера для разведения фермента, Пробы инкубируют при 30 С 10 мин. Реакцию останавливают добавлением к 1 мл реакционной смеси 10 мл 0,1 М раствора НС. Из полученной смеси отбирают 1 мл и переносят в 10 мл раствора йода, содержащего 0,0025% Л и 0,025% КЛ, Реакционную смесь выдерживают при 20 С.20 мин и измеряют оптическую плотность раствора при длине волны 656 нм, Контрольный раствор имеет синюю окраску, а опытные образцы приобретают фиолетовый цвет, Контрольный раствором при...