Способ определения фибринолитической активности
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Номер патента: 1255641
Авторы: Гайда, Даныш, Магеровский, Монастырский
Текст
(19) 111 2 Я 9/68 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ д ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ(54)(57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФИБРЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ путем инкуции субстрата с исследуемым растром, остановки реакции и фильтро пектрофото л и ч а ю щ ью повьппени ощения спо т при рН 1 тра л ван последующеиильтрата, о етриеи и й с я я чувствем, что, с целельности и упубацию проводякачестве субин, модифицироульфокислотойрупп формулы оба,8-8,5ьзуют елиа фиб- нзол 0-307 та испоный и-ди настырский,Даныш азобе содержание О ИНОба- во- вания осущес остановку реак вором едкого н яют растИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ1255641 Составитель М. ПознякТехред Л.Олейник Редактор Н. Гунько Корректор И, Эрдейи Заказ 4787/29 Тираж 490 ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Подписное Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Изобретение относится к медицине,в частности к энэимологии,Целью изобретения является повышение чувствительности и упрощениеспособа за счет проведения определений при рН 1,8-8,5, остановки реакции раствором щелочи и применения вкачестве субстрата измельченногофибрина.Способ осуществляют следующимобразом.К суспенэии фибрина (субстрата),модифицированного и-диаэобенэолсульфокислотой, с содержанием 0-307групп Формулы в буферном растворе с рН 1,8-8,5 прибавляют аликвоту исследуемого ферментсодержащего раствора, инкубиоруют смесь при 37 С в течение 20- 120 мин (в зависимости от интенсивности развивающейся окраски), останавливают реакцию, добавляют раствор 0,1 М едкого натра, фильтруют через бумажный или ватный фильтр и определяют оптическую плотность Фильтрата при 440 нм, Контролем служит суспензия субстрата, к которой сначала добавляют раствор едкого натра, а затем аликвоту исследуемого раствора. За единицу фибринолитической активности принимают то количество фермента (для плазмы - объем плазмы), которое в условиях определения эа 1 ч дает прирост оптической плотности, равный 1.П р и м е р 1. К суспензии 5 мг субстрата в 1 мл 0,05 М Ыа-фосфатного буфера, рН 7,4, содержащего 0,15 М ХаС 1, добавляют 0,2 мл раствора очищенного плаэминогена,лктивированного стрептокинаэой(10000 ед./мг плазмино 1 ена),жащего 10 - 250 мкг фермента. Смесьинкубируют 1 ч при 37 С, затем доОбавляют 3 мл О,1 М раствора 11 аОН ифильтруют через бумажный фильтрУдельная активность 3,0 ед./мг.10 П р и м е р 2. К суспенэии 5 мгсубстрата в 1 мл 0,05 М трис-НС 1буфера, рН 8,5, содержащего 0,15 МИаС 1, прибавляют 0,2 мл раствораочищенной протеиназы из ТЬегпюасСУ 15 пошусез чп)аг 1 з, содержащего 0,55 мкг фермента. Смесь инкубируют20 мин при 37 С, затем добавляют3 мп 0,1 М раствора БаОН и фильтруют через бумажный фильтр, Удельная20 активность 1200 едю/мга П р и м е р 3. К суспензии 5 мгсубстрата в 1 мл О,1 М соляной кислоты, рН 1,8, содержащей 0,15 М 25 НаС 3, прибавляют 0,2 мп растворапепсина, содержащего 0,01 - 0,05 мкгФермента, Смесь инкубируют 30 мин при37 С, затем добавляют 3 мл 0,1 Мраствора ИаОН и Фильтруют через буЗо мажный фильтр, Удельная активность10600 ед./мг.Предлагаемый способ позволяетопределять фибринолитическую активность как очищенных ферментов,так и сложных биологических смесейв широком диапазоне значений рН -от рН 1,8, где активны кислые протеиназы, до рН 8,5, где активныщелочные протеиназы, обладает высокой чувствительностью, так какпозволяет определять до 0,005 мкгфермента и по крайней мере вдвоепревосходит известный способ по чув.твительности.
СмотретьЗаявка
3809318, 05.11.1984
ЛЬВОВСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ГЕМАТОЛОГИИ И ПЕРЕЛИВАНИЯ КРОВИ
ГАЙДА АНАТОЛИЙ ВЛАДИМИРОВИЧ, МОНАСТЫРСКИЙ ВЛАДИМИР АНАТОЛЬЕВИЧ, МАГЕРОВСКИЙ ЮРИЙ ВАСИЛЬЕВИЧ, ДАНЫШ ТАРАС ВАСИЛЬЕВИЧ
МПК / Метки
МПК: C12N 9/68
Метки: активности, фибринолитической
Опубликовано: 07.09.1986
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-1255641-sposob-opredeleniya-fibrinoliticheskojj-aktivnosti.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения фибринолитической активности</a>
Способ конструирования рекомбинантной плазмидной днк pps 20, кодирующей изопенициллин-n-синтетазу, способ получения штамма сернаlоsроriuм асrемоniuм, обладающего активностью изопенициллин-n-синтетазы
Номер патента: 1780542
Опубликовано: 07.12.1992
Авторы: Поль, Стефен, Сьюллен, Томас
МПК: C12N 15/52, C12N 15/80
Метки: активностью, асrемоniuм, днк, изопенициллин-n-синтетазу, изопенициллин-n-синтетазы, кодирующей, конструирования, обладающего, плазмидной, рекомбинантной, сернаlоsроriuм, штамма
...3,7 ХааРестрикцибуфера и 85 мкл Н 20. Около 5 мкл (50 еди онного фрагмента получают и суспендир ютниц) рестрикционного фермента Н 1 пб - И 1 в 10 мкл Н 20.добавляют к раствору ДНК и полученный В, Окончательное конструированиераствор инкубируют при 37 С в течение 2 ч. плэзмид РРЯ 30 и РРЯ 30,1.Н 1 пб- расщепленную плазмиднуюРРЯ 21 А ДНК помещают на 1 агарозный 40 . Около 1 мкг плэз ДНКг плэзмиднои Д растворягель и проводят электрофорез до тех пор, ют в 2 мкл 10 Х Хмкл аа рестрикционного буфеН 1 пб - И 1пока. 3,45 кв, 3,16 кв, 1,2 кви 69 кв ра и 6 мкл Н О. 0 2и - рестрикционные фрагменты не ста- рестрикционного фермента Хаа 1 добавляновятся четко выделенными на геле. Выде- ют к раствор " ДЙКляют Н 1 пб - И 1ляют и - рестрикционный...
Способ определения пестицидов и лекарственных веществ антихолинэстеразного действия
Номер патента: 1745769
Опубликовано: 07.07.1992
Авторы: Кузнецова, Никольская, Прокопов, Святковский
МПК: C12Q 1/46
Метки: антихолинэстеразного, веществ, действия, лекарственных, пестицидов
...до 10 мин.П р и м е р 3, Проводят определение параоксона аналогично примеру 1, получая после растворения твердого раствора 0,02- 0,20 -ные растворы аммониевой соли И- фталилхитозана. П р и м е р 4. В условиях примера 1,используя 0,10 -ные растворы полимера ине проводя инкубацию ферментас ингибитором, определяют атропин, метацин, й-метил-пиперидинилбензилат и скопаламин,взятые в концентрациях 110; 110 б; 5 хх 10 ; 1 10 соответственно,П р и м е р 5. Проводят определениедиизоп ропилфторфосфата аналогично примеру 1,П р и м е р 6. Проводят опреуелениез5 хлорофоса в концентрациях 0; 1 10; 1 10аналогично примеру 1.П р и м е р 7. Проводят определениехлорофоса аналогично примеру 1. Растворыпредварительно активируют при 70 С и рН 10 9,0 в...
Способ получения производных 6, 6-оксазинбензтиазиндиоксида
Номер патента: 1195910
Опубликовано: 30.11.1985
Автор: Хосе
МПК: A61K 31/5365, A61K 31/5415, A61P 29/00, C07D 213/02, C07D 239/24, C07D 261/06, C07D 498/04, C07D 513/04
Метки: 6-оксазинбензтиазиндиоксида, производных
...1 о х 100; 50 17,0 55 Процен мо пропор ной дозы. 5Используют самцов крыс. видаКргадпе-Пач 3 еу НС-СЕУ весом 90-110 г.СоеДинения вводят через рот в виде5%-ной суспензии в гуммиарабике,используя пищеводный зонд, за 1 чдо этого осуществляют субподошвеннуюинъекцию в правую лапку животногоО, 1 мл 1%-ной суспензии коррагенинав физиологической сыворотке (НаСГ0,9%). Подопытные животные получают 105%-ный гуммиарабик, при этом общийиспользованный объем во всех случаяхсоставляет 10 мл/кг. Измеряют объем каждой лапки непосредственно перед осуществлением инъекции коррагенина, затем через 3 или 5 ч после инъекции с помощью ртутного плетизмографа,Рассчитывают для каждого животного показатель воспаления по истечении 3 ч (1 ) и 5 ч (1) после введения...
Рекомбинантная плазмидная днк psth 2191, кодирующая синтез соматотропина человека, и штамм escherichia coli продуцент соматотропина человека
Номер патента: 1387414
Опубликовано: 30.12.1994
Авторы: Баев, Рубцов, Свердлова, Скрябин, Чернов, Чупеева, Шляпников
МПК: A61K 35/55, C12N 15/18
Метки: 2191, escherichia, днк, кодирующая, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, синтез, соматотропина, человека, штамм
1. Рекомбинантная плазмидная ДНК pSTH 2191, кодирующая синтез соматотропина человека, размером 6,0 т.п.о., состоящая из: плазмидной ДНК вектора pBR 322 размером 4,14 т.п.о.; фрагмента ДНК, содержащего trp-промотор E.coli, размером 1,17 т.п.о., EcoRI-Hind III-фрагмента реконструированной к ДНК соматотропина человека размером 713 п.о., 1 участка расщепления рестриктазы EcoRI; 1 участка расщепления рестриктазы Hind III, расположенного на расстоянии 713 п.о. по часовой стрелке от EcoRI-сайта, 1 участка расщепления рестриктазы BamHI, расположенного на расстоянии 1059 п.о. по часовой стрелке от EcoRI-сайта, 1 участка расщепления рестриктазы SalGl, расположенного на расстоянии 1334 п.о. по часовой стрелке от EcoRI-сайта, 2 участков расщепления...
Способ получения окрашенного субстрата для определения целлюлазной активности
Номер патента: 1056055
Опубликовано: 23.11.1983
Авторы: Авиженис, Герасимас, Денис, Кюдулас, Лауцюс, Мачюлайтите, Савицкене, Степонавичюс
МПК: G01N 33/52
Метки: активности, окрашенного, субстрата, целлюлазной
...подчиняется экспоненциальнойфункции. Для расчета необходимогоколичества воды для диализа пользуются следующей формулой:ч:-а,вьч, еп сс,где Ч - необходимый объем воды длядиализа окрашенного растнора карбоксиметилцеллюлозы 1Ч - исходный объем окрашенногоораствора карбоксиметилцеллюлозы после первоначального концентрирования;С " оптическАя плотность фильт"рата после диафильтрацииСо - оптическая плотность (0490)исходного раствора окрашенной карбоксиметилцеллюлоэы.Пользуясь формулой (1), заранее определяют необходимый для диализа объем воды (при достижении н конечном диафипьтрате .1)490 не более 0,8) .1056055 Способ получения субстрата Растворимость субстрата, мин Выход субстрата,Интервал прямолинейной зависимости...
Предыдущий патент: Способ выделения ферредоксина
Следующий патент: Способ получения раствора полисахарида из бактериальной суспензии
Случайный патент: Передвижная комнатная печь