Патенты с меткой «эндонуклеаз-рестриктаз»

Номер патента: 740824

Опубликовано: 15.06.1980

Авторы: Вайткявичюс, Янулайтис

МПК: C12D 13/10

Метки: активности, количественного, специфических, эндонуклеаз-рестриктаз

...предложенным способом не требуется специальных помещений и служб, необходимых при работе с радиоактивнымису бстратами,П р и м е р 1. Определение активности эндонуклеаз-рестриктаэ Есо К 1и ЕСО Н 11 в очищенных препаратах.1 г субстрата - иммобилизованнойна целлюлозе дезоксирибонуклеиновойкислоты - суспендируют в 30 мл буФерной смеси 1 (0,1 М трис-НС 1-буфер,РН 7,5 р 0,05 М ИаС 1 у 0,01 М МдЯО 4),разливают по 1 мл в шесть центрифужных пробирок и добавляот по 3 млохлажденной до 4 С буферной смеси 1,содержащей дополнительно 0,05 тритонаХ. Суспензию осторожно перемещивают при помощи стеклянной палочки и центрифугируют при 4 фС 2 мин при500 об/мин. После окончания центрифугирования насадочную жидкость сливают. Центрифужные пробирки с...

Номер патента: 1458388

Опубликовано: 15.02.1989

Авторы: Битинайте, Буткус, Горбачев, Грубер, Кюдулене, Лазарявичюте, Лаучис, Манялене, Поляченко, Янулайтис

МПК: C12N 9/22

Метки: catg-3, gpucgpyc-3, нуклеотидов, обладающих, последовательности, расщеплять, способностью, узнавать, эндонуклеаз-рестриктаз

...буфером В, содержащим 0,1 М ИаС 1. Колонку промывают 150 мл того же буфераи элюируют линейным градиентом ИаС 1 от 0,1 до 1,0 М в 500 мл буфера В. Отдельно собирают фракции, элюируемые при 0,25-0,36 М НаС 1, содержащиеосновную часть активности рестриктазы Нхп 1 1, и фракции, элюируемыепри 0,58-0,7 М, содержащие активностьрестриктазы Н 1.п 1 11. Далее очисткурестриктаз Нп 1 1 и Нп 1 11 провоАктивность рестриктаз тестируют методом гидролиза ДНК фага лямбда с последующим . разделением полученных фрагментов электрофорезом в агарозном геле. Реакционная смесь для гидролиза ДНК фага лямбда рестриктазой Ндп 1 1 содержит 10 мМ трис-НС 1 рН 8,5, 25 мМ НаС 1, 5 мМ МяС 1 100 мкг/мл альбумина бычьей сыворотки, 2 мкг ДНК фага лямбда в 40 мкл...