C12N 9/76 — трипсин; химотрипсин

Номер патента: 639866

Опубликовано: 30.12.1978

Авторы: Арен, Кукуранс, Сполите

МПК: C07K 1/22, C12N 9/76

Метки: трипсина

...связь лиганда с нерастворимой матрицей.П р и м е р 1. В хроматографическую колонку (9 К 15 см),помещают 3 г афинного матричного материала (1 ч-сукциноил-аминобензамидин, присоединенный к силохрому, обработанному м-аминопропилтриэтоксисиланом) с содержанием 1 Ч-сукциноил-аминобензамидина 72 мкм/г силохрома и уравновешивают пропусканием трисбуферного раствора (0,05 М; рН 8,0), содержащего 0,5 моль хлористого калия. После уравновешивания через колонку пропускают 10 мл раствора смеси 62 мг коммерческих препаратов трипсина и химотрипсина, содержащего 20 мг химотрипсина и 42 мг трцпсина в буферном растворе, использованном для уравновешивания колонки, После пропускания ферментных растворов, колонку отмывают от несорбированных белков тем...

Номер патента: 707924

Опубликовано: 05.01.1980

Авторы: Антонов, Бессмертная, Козлов, Комиссарова, Крылова, Молчанова, Раскина, Фельдштейн, Якубович

МПК: A61K 38/46, C12N 9/76

Метки: препаратов, протеолитических, ферментов

...способ получения водорастворимых препаратов модифицированных кислыми полисахаридами протеолитических ферментов, в котором в качестве кислого полисахарида используют альгиновую кислоту, водныйраствор соли которой подкисляют додостижения рН 1,0 - 1,5, а образовавшийся осадок растворяют в буферном растворе фермента.Предпочтительно процесс проводятследующим образом:к 0,5 раствору альгината натриядобавляют концентрированную солянуюкислоту до достижения рН 1,0. Осадокотделяют центрифугированием либоФильтрованием, промывают водой дорН 3,0 и лиофильно высушивают. Однувесовую часть ангидридизованной альгиновой кислоты растворяют при перемешивании в охлажденном до 4 ОС 0,2 Мрастворе фосфатного буфера, рН 7,5,содержащем одну...

Номер патента: 863638

Опубликовано: 15.09.1981

Авторы: Березов, Будякова, Левин, Сорокина

МПК: C12N 9/76

Метки: иммобилизованного, препарат, трипсина

...в больших дозах, содержащих балластные белки. и Т.Н худякова1, " вЙ". .,",; .;тД Знамени мйййЦийФКИй машкб иса Лумумбы863638 Активность препарара - содержание исходного Фермента всухом препарате,мг/г Способ иммобилизации Препараты Носитель 1,9 ЭритРоциты Ковалентное связываниес помощью глутаровогодиальдегида Известный 56,7 То же Предлагаемый Тромбоциты 938,4-943,3 56,7-61,6ТрипсинТромбоциты Составитель А,БражниковаТехредМ. Рейвес Корректор Е.Рошко Редактор М.Петрова Заказ 7701/39 Тираж 531 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 жащем 0,15 М раствора хлористого натрия и инкубируют 1-6 ч при кача" нии на...

Номер патента: 994556

Опубликовано: 07.02.1983

Авторы: Пономарева, Шмелева, Яковлев, Янкевич

МПК: C12N 9/76

Метки: иммобилизованного, трипсина

...величины рН 4,0 с последующей коагуляцией золя в гидрогель в течение 2 ч и промывкой50 полученного носителя дистиллированной водой до отсутствия хлор-ионов в промывных водах. 6 4Получение ферментного препаратаосуществляется при контакте раствораэнзима и гидрогеля в течение 14-16 чв присутствии ионов кальция с последующим высушиванием полученногопрепарата до влажности 12-154.П р и м е р 1. 25 г гранулированного гидрогеля силикагеля заливают25 мл раствора трипсина концентрацией 5 10 г/мл в фосфатном буфере0,05 м рН 7,6,содержащем 10М раствор хлорида кальция. Фиксирование осуществляется при 1.С в течение 14 чпри легком перемешивании. Далее контактный раствор сливают, препаратденатрируют при 37 ОС в течение 6 чпри вентиляции до остаточной...

Номер патента: 1055771

Опубликовано: 23.11.1983

Авторы: Веремеенко, Карпенко, Семичаевский, Судина

МПК: C12N 9/76

Метки: иммобилизованного, трипсина

...твердыми частицами альбуминовогогеля. Получают не растворимое в воде10 производное трипсина,Конформационная стабильность молекул трипсина, Фиксированных путеммноготочечного закрепления на сетчатой структуре альбуминового геля,15 оказывается выше, чем в растворимыхассоциатах с лабильной конформациейпо.известному способу. Кроме того,при многоточечной Фиксации на сетчатой структуре геля эффективно блокируются центры молекул трипсина, ответственные эа взаимодействие с ингибиторами,В результате остаточная активность иммобилизованного трипсина пос-25 ле действиясоевого ингибитора вконцентрации 0;1 мг/мл составляет60, а после действия сыворотки крови в концентрации 0,4 мл на 1 млсмеси - 97,Используемые по Предлагаемомуспособу в качестве...

Номер патента: 1219645

Опубликовано: 23.03.1986

Авторы: Акулин, Арен, Аюшин, Берзиня-Берзите, Колодзейская, Кудинов, Меленьких, Шпрунке, Эпштейн

МПК: C12N 9/76

Метки: комплекса, протеолитического

...на колонку заполненную овомукоид-сефарозой. Колонку выдерживают в перекрытом состоянии в течение 20-30 мин, затем осуществляют промывку буфером для удаления несорбировавшегося материала и проводят десорбцию целевого продукта 0,001-0,003 М раствором соляной кислоты с последующим быстрым подщелачиванием элюата до рН 7,6-7,8 с помощью фосфатного буфера.П р и м е р 1. На колонку, заполненную 10 мл овомукоид-сефарозы 4 В, наносят 80 мг протеолитического комплекса из пилорических придатков лососевых рыб, растворенного в 4 мл 0,04 М Фосфатного буфера рН 7,8 при 4 С, с удельной активностью - трипсиновой 365 ед./мг белка (субстрат БАМЭ - бензоил-аргинин метиловый эфир), химотрипсиновой - 343 ед./мг белка (субстрат АТМЭ - ацетил-тирозин...

Номер патента: 1273392

Опубликовано: 30.11.1986

Авторы: Акулин, Колодзейская, Кудинов, Мелешевич, Морозова, Пивненко, Федорова, Эпштейн

МПК: A61K 35/39, C12N 9/76

Метки: трипсина

...препарата: 520 ед/мг белка (субстрат ТАМЭ - тозил-аргинин метиловый эфир) - трипсиноподобная активность; 1620 ед/мг белка (субстратБТМЭ - бензоил-тирозин метиловыйэфир) - химотрипсиноподобная активность, 50Промывание колонки проводят0,01 М фосфатным буфером, рН 6,0,Десорбцию целевого продукта осуществляют 28 -ным иэопропиловым спиртом,содержащим 1,0 БаС 1. 55Полученный препарат содержит чистый трипсин, гомогенный при; электроФорезе в полиакриламидном геле,Выход препарата от сорбированного трипсина составляет 88удельная активность - 5200 ед/мг белка (субстрат ТАМЭ), что в 10 раз выше трипсиноподобной активности исходного препарата; химотрипсиноподобная активность отсутствует в конечном продукте.П р и м е р 3. Все операции проводят по...

Номер патента: 1278361

Опубликовано: 23.12.1986

Авторы: Кузнецов, Недоспасов, Незавибатько

МПК: C12N 9/76, C12Q 1/00

Метки: активности, протеиназ

...10 те 1,Готовят следующие рабочие растворы:) 0,1 М трцс - НС 1 буфер, рН 8, 0;2) 2 10М 1-(карбобензоксиаргппил) а 1111 п он афтеееееЕн-сул 1 11 ке кислотыв растезоре 1;3) 1 ееМ борфторида нитрофениндиазонця в 0,9 М уксусной кислоте.К 1 мл термостатированного при25 С раствора 2 добавляют 50 мклраствора исследуемого препарата Фермента в растворе 1, перемешиваю.:встряхиванцем, инкубцруют 20 мин,добавляют 1 мл раствора 3 ц через5 мин определяют оптическую плот-. ность при 520 нм, используя в качестве раствора сравнения инкубировавшуюся, как указано выше, смесь 1 млраствора 2 и 1 мл раствора 3, в ко торую фермент добавлен после приготовления смеси. Активность ферментаопределяют по калибровочной кривойзависимости оцтической плотности...

Номер патента: 1742329

Опубликовано: 23.06.1992

Авторы: Кудинов, Таран, Шевченко, Эпштейн

МПК: C12N 9/76

Метки: трипсина

...в 50 мл воды, концентрированной соляной кислотой рН доводят до значения 4,8 и добавляют к этому раствору 5 г сорбента.К полученной смеси при постоянном перемешивании в течение 10 мин по каплям приливают спиртовый раствор дициклогексилкарбодиимида (С = 0,5 г мл) в количестве 5 г и промывают последовательно: 100 мл спирта, 50 мл спирта + 50 мл воды, 250 мл спирта, 50 мл спирта + 50 чл воды, 50 мл 0,001 н, раствора соляной кислоты, 50 мл воды, 50 мл 0,1 н. ЙаНСОэ и 100 мл воды.После промывки носитель суспендируют в 10 мл 0,05 М фосфатного буфера (рН 7,8).П р и м е р 2. Синтез сорбента е -аминокапроновая кислота,6-диаминогексансферон,Р5 г сферона промывают тщательно водой, отфильтровывают на стеклянном...

Номер патента: 1771478

Опубликовано: 23.10.1992

Авторы: Матуляускене, Недоспасов, Палайма, Янчене

МПК: C07K 5/10, C12N 9/76

Метки: аминонафт, аминонафталин-i-(n-пропил, анса, бензилоксикарбонил-аланил-аланил-пролил-фенилаланил, качестве, субстрата, сукцинил-аланил-аланил-пролил-фенилаланил, сульфамид, химотрипсина

...раствор 3,5 г (7,1 ммоль) соединения (б) и 0,99 мл (7,1 ммоль) триэтиламинав 40 мл абс. ТГФ, Реакционную массу перемешивают при температуре -20 С 1 ч и 1 чпри комнатной температуре. Реакционный 5раствор фильтруют, упаривают досуха, остаток растворяют в этилацетате, промывают последовательно 1 н, раствором НС 1,5%раствором КаНСОз и насыщенным раствором йаС 1, сушат, упарива,от, заливают абс. 10эфиром, Выпавший осадок отфильтровывают, Получают 2,15 г(выход 50 0 ) соединения(а)Ь = -26,18 (1 0 , ДМ Е),Найдено, 70: С 63,2 Н 6,5 35,2 й 8,9.СЗ 2 Н 40 К 4065,Вычислено,; 63,1 6,6 5,3 9,2.Спектр ПМР ( д, м.драстворительДМСО 6): 0.62 (СНз, т, ЗН), 1,16 (СНз, с, и4 СН 2, КН), 1,64 (2 СН 2, 4 Н), 2,68 (СНгй, кв.,2 Н). 3,1 (СН 2 РТ, 2 Н),...

Номер патента: 1628526

Опубликовано: 30.06.1994

Авторы: Башашкина, Гуславский, Диварова, Качалов, Ночевный, Осидзе, Почтаренко, Чернецкий, Школьников

МПК: C12N 9/76

Метки: трипсина

...1260 мл концентрированной серной кислоты, выдерживают в течение 6 ч при 16-24 С при постоянном" 20 перемешивании, после чего экстракт в объ- . еме 136 л отделяют от жмыха на центрифуге с размером пор фильтрующего элемента 250 мкм. Для второй стадии экстракции в реактор загружают 135 л жмыха, 90 л дистиллирован ной воды и 630 мл концентрированной серной кислоты и выдерживают в течение 2-3 ч при непрерывном перемешивании, Затем экстракт в объеме 124 л отделяют от жмыха на центрифуге с.размером пор фильтрующе го элемента 250 мкм. Экстракты (в объеме 260 л) обьединяют, перемещают в экстрактор и медленно добавляют 59,8 кг сернокислого аммония до полного растворения соли при непрерывном перемешивании с целью осаждения балластных белков,...