Способ получения трипсина

) 5 С 1259 7 б ОБ ТЕН ельству СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИК ДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ ТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР)(71) Всесоюзный государственный научно-исследовательский контрольный институт ветеринарных препаратов Госагропрома СССР; Всесоюзный научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности Госагропрома СССР(72) Ночевный В.ТОсидзе ДФГуславский АИ; Башашкина НА; Оочтаренко А.Г. Диварова Г.ВЧериецкий Ю.П Школьников Е.ЭКачалов ВН. (56) Авторское свидетельство СССР й 1067040, кл. С 12 й 9/64, 1984.(34) СВОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТРИХИНА (57) Изобретение относится к биотехнологии, а именно к технологии получения протеолитических ферментов, и может быть использовано в ферментной промышленности а полученный препарат - при производстве купьтуральных вирусных вакцин С помощью повышения выхода и специфической активности трипсина получение фермента производится путем оптимизации процессов сепарирования и высушивания целевого продукта в промышленных обьемак Способ получения трипсина включает экстракцию фермента из тканей поджелудочных желез убойных животных отделение экстракта в попе центробежных сил саморазгружающейся центрифуги для сгущения суспензий с размером . пор фильтрующего элемента 250 - 300 мкм, очистку трипсинсодержащей жидкости и отделение фермента на стадии высаливания при помощи центрифуги для сгущения суспензий с размером пор фипьтрующего элемента 3 - 5 мкм и распыли- тельное высушивание трипсина при температуре теплоносителя 130 - 140 С на входе и 60 - 75 С на выходе. 1 табл.1628526 Изобретение относится к биотехнологии. а именно к технологии получения протеолитических ферментов, и может быть использовано в ферментной промышленности, а полученный препарат- при производ стве культуральных вирусных вакцин.Цель изобретения - повышение выхода и специфической активности трипсина,П р и м е р. Для получения трипсина по предлагаемому способу 91.3 кг поджелудоч ной железы (ПЖ) от убойных животных дважды замораживают и оттаивают при температуре (16-24 С) в течение 12-16 ч, Размороженную ПЖ измельчают на мясорубке с диаметром отверстий в решетке 5-6 15 мм и взвешивают. 90 кг измельченной ПЖ помещают в экстрактор, добавляют 100 л .дистиллированной воды и 1260 мл концентрированной серной кислоты, выдерживают в течение 6 ч при 16-24 С при постоянном" 20 перемешивании, после чего экстракт в объ- . еме 136 л отделяют от жмыха на центрифуге с размером пор фильтрующего элемента 250 мкм. Для второй стадии экстракции в реактор загружают 135 л жмыха, 90 л дистиллирован ной воды и 630 мл концентрированной серной кислоты и выдерживают в течение 2-3 ч при непрерывном перемешивании, Затем экстракт в объеме 124 л отделяют от жмыха на центрифуге с.размером пор фильтрующе го элемента 250 мкм. Экстракты (в объеме 260 л) обьединяют, перемещают в экстрактор и медленно добавляют 59,8 кг сернокислого аммония до полного растворения соли при непрерывном перемешивании с целью осаждения балластных белков, Жидкую фазу высаливания отделяют на центрифуге с размером пор фильтрующего элемента Б мкм, при этом твердую фазу утилизируют, а к трипсинсодержащей жидкости добавляют при непрерывном перемешивании 43,2 кг сернокислого аммония до полного растворения соли, Осадок трипсина отделяют на осадительно-фильтрующей центрифуге. с размером пор Фильтрующего элемента 5 мкм, разводят дистиллированной водой до полного растворения и направляют на сушку. Сухой препарат получают методом распылительного высушивания при температуре теплоносителя 140 С на входе . и 750 С ка выходе и расфасовывают во флаконы.Полученный Фермент представляет собой тонкодисперсный порошок белого или слегка сероватого цвета с характерным.запахом, без посторонних примесей с активностью 475 ЕД и содержанием влаги 2,6. Таким образом предлагаемый способ . повысит качество трипсина.Сравнительная характеристика физико- химических и диспергирующих свойств образцов трипсина, полученных различными способами, приведена в таблице,Показатель и и способе пол чения т ипсина Характеристика известном и е лагаемом Распылительная сушка Тонкодисперсный порошок белого или слегка сероватого цвета, без постороннихпримесей Метод высушивания Внешний видНеустойчив Относительно устойчив 138-180 8,5 Растворимость в 100 мл водыпри 20 С, г . Массовая доля влаги,Активность (е ЕД) по Шоу-Пв-: тикблас Устойчивость 0,25 -ногораствора при 3-кратном замораживании Длительность первого цикмКондуктивная сушка Среднемелкий порошок желтоватого цвета, наличие посторонних примесей1628526Составитель В. ЗотовТехред М,Моргентал Корректор Л. Филь Редактор С. Рекова Заказ 390 Тираж Подписное НПО "Поиск" Роспатента113035, Москва, Ж, Раущская наб 4 Л Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул. Гагарина, 101 Формула изобретенияСПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТРИПСИНА путем гомогенизации поджелудочной железы животного, экстракции, фильтрации, двойного высаливания сернокислым аммонием, повторной фильтрации, высушивания и расфасовки целевого продукта, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода и специфической активности трипсика, 5 высушивание целевого продукта проводятпутем распылительной сушки при температуре теплоносителя 130 - 140 С на входе и 61-75 С на выходе.