Способ получения 2-галоген-никэрголинов

/ апиш ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ ПИСАНИЕПАТЕНТУ(71) Рихтер Гедеон Ведьесети Дьяр,РТ (Н 11)(57) Изобретение касается замещенныхгетероциклических веществ, в частности получения 10 с.-метокси-хлор (или бром)-1,6-диметил-эрголин- метанол-бромникотинатов - полупродуктов для производства сложных эфиров 5-бромникотиновой кислоты Цель - упрощение процесса и расширение ассортимента веществ указанного класса. Их синтез ведут в присутствии пиридина из 1-метил-бром (или хлор)-люмилизергола и активированного сложного эфира 5-бромникотиновой кислоты, который получают при комнатной температуре из И-оксисукци нимида и 5-бромникотиновой кислоты. Новые 2-хлор (или бром)-никэрголины обладают антигипоксической активно" стью при дозе 2,5 - 10 мг/кг в сравнении с контролем до 1507., а также влияют на способность к обучению при дозе 5 мг/кг (131-1823). Кроме того, новые вещества оказывают связывающее с Ы, -1- и -2-рецепторами и синапто 1 сомальное действие в 13 раз выше, чем у никэрголина. Указанные условия синтеза обеспечивают лучший (до 95%) выход без образования побочных продуктов и структурных изомеров. 2 таблИзобретение относится к улучшенному способу получения отчасти известных 2-галогец-никэрголинов общей формулы 5 осн,-о-сВг 10 ом кисл г хлор, б ют в сл вой кисл ные эфирьты. превра нико ти изобрет процесс про- о- с 3 я - создание лучения 2-галрасширенным нно ген-н эрголиннтом цел вых продуктов. 2-Хлор-люмил тим ример е ол. 2,0 г (0,007 моль)2-хлор-лизергола растворяют в 200 мл приготовлен ной в соотношении 40:75 смеси метанола с серной кислотой. Реакционную смесь облучают при 25-30 С с помощью ртутной лампы (ТЕЕИСЯКАМ, 250 ЕЕ). За реакцией следят с помощью тонкослойной хроматографии (силикагель 60 Р хлороформ и метанол 80:20). По окончании реакции раствор осветляют с помощью 0,2 г активного угля, отфильтровывают, выливают в 300 мл ледяной50 воды и устанавливают рН = 8 с помощь.э аммиака. Смесь трижды экстрагируют по 70 мл хлороформом. Объединенные . органические фазы сушат над сульфатом натрия, фильтруют и выпаривают в вакууме, Остаток после выпаривания перекристаллизуют из ацетона. Получают 2,0 г (907) названного соединеция с т.пл. 227 С,315 где Х - хлор, бром, а именно 10 о -метокси"2-галоген,6-диметил-эрголиц-метанол-бромникотинатах,Соединения получают тем, что но, вые 1-метил-галогенлюмилиэерголы20 (10 Ы-метокси-.2-галоген,б-диметилэрголин-метанолы) общей формулы-СН -ОН); 7, 13-,24 (мультиплет, ЗН,ароматич. водород),ИК-спектр (КВг): 2910(-ОСН ),780 (аром. галоген), см.П р и м е р 2. 1-Метил-хлор-люмилизергол.Смесь из 1,54 г тонкоизмельченного гидроксида калия с 12,7 мл диметилсульфоксида перемепявают 10 минпри комнатной температуре, При 1520 С к смеси добавляют 2,0 г 2-хлорлюмилизергола. Затем реакционнуюсмесь 35 мин перемешивают при комнатной температуре, смешивают с0,6 г метилиодида, перемешивают еще10 мин и выливают в 400 мп ледянойводы. Выпавший осадок отфильтровы-,вают, Фильтрат выпаривают в вакуумеи остаток перекристаллизуют из ацетона. Получают 1,77 г (857) названцого соединения с т. пл. 252 С.Н-ЯМР (ВМСОсЕ+ ТФА) м.д.: 2,50-СН ОН); 3, 73 (дублет, ЗН, индолЕЕ-СЙ 1); 7,13-7,44 (мультиплет, ЗН,аром, водород);ИК-спектр (КВг): 29 10 (ОСН);2820 (индол -СН); 730 (аром. галоген), смП р и м е р 3, 1-Метил-бромлюмилизергол.В качестве исходного вещества применяют 1,0 г (0,0027 моль) 2-бромлюмилизергола и аналогично примеру2 получают 0,78 г (757) названногосоединения с т. пл. 240-242 С.Н-ЯМР (ПМСОсЕ ): 2,49 (дублет,ЗН, ЕВСЕЕ ); 2,97 (дублет, ЗН, ОСН );3,55 (мультиплет, 2 Н, СНОН); 3,75(дублет, ЗН, индол-Б-СН 9); 7, 177,4 1 (мультиплет, ЗН, аром. водород) .ИК-спектр (КВг): 2910 (ОСН ),2920 (ицдол-ЕЕСЕЕ), см.П р и м е р 4. И-Окси-скуцинимид 5-бром-никотинат (активный сложныйэфир) .1 г М-окси-скуцинимида и 5,2 г5-бром-никотината при 50 С растворяют в 100 мл абсолютного этилацетатаи к раствору добавляют 1,77 г М, ЕЕцициклогексилкарбодиимида. Реакцион-.ную смесь 4 ч перемешивают при комнатной температуре и охлаждают доз 14 лого цвета отфильтровывают. Фильтрат выпаривают в вакууме и остаток после выпаривания перекристаллизуют из этанола.П р и м е р 5. 2-Хлор-никэрголин.1 г 1-метил-хлор-люмилизергола растворяют в 100 мл безводного пиридина и раствор смешивают с 0,96 г полученного согласно примеру 4 активного сложного эфира. Реакционную смесь 4 ч перемешивают при комнатной температуре, причем за течением реакции следят с помощью тонкослойной хроматографии. По окончании реакции этерификации реакционную смесь выпаривают при пониженном давлении, выливают в 200 мл 107-ного раствора карбоната натрия и трижды экстрагируют.по 30 мл хлороформом. Объединенные органические фазы промывают водой, сушат над сульфатом магния и после фильтрации выпаривают при пониженном давлении. Остаток перекристаллизуют из эфира и в случае необходимости дополнительно очищают с помощью хроматографии, Получают 1,47 г (957.) названного соединения.1 Ц-ЯМР (СПС 1 ): 2,48 (дублет, ЗН, Б-СН ); 2,53 (дублет, ЗН, О-СН );3,74 (дублет, ЗН, индол-И-СН );70-7,28 (мультиплет, ЗН, аром. водород, индол); 8,45 (триплет, 1 Н аром. Н); 8,9 (дублет, 1 Н, аром. Н); 9,2 (дублет, 1 Н, аром, Н), м,ц.П р и м е р 6. 2-Бром- никэрголин.Берут 1 г 1-метил-бром-люмилизергола и готовят аналогично примеру 5 2-бром-никэрголин. Получают 1,4 г (957) названного соединения с т.пл.142-144 С.Найдено, что получаемые согласно изобретению и содержащие в качестве Х новые соединения общей формулы 1 обладают ценными фармакологическими действиями. В особенности они улучшают когнитивную функцию головного мозга и активны антигипоксически, а также Ы -адренергически - блокирующе и Са - антагонистически.Антигипоксическое действие и улучшающее когнитивные функции действие подтверждаются следующими фармакологическими испытаниями.Исследования осуществляли на самцах БНВ.-крыс весом 160- 180 г, а также весом 18-21 г СРЬР-мышах (ЬАТ 1) обоего пола. Исследуемые соединения вводили крысам в объеме 4555745 мл/кг, мышам - в объеме 1 0 мл/кг за60 мин до начала опытов. Никэрголинрастворяли в 0,47-ной винной кислоте,исследуемое вещество растворяли в57-ном растворе ТВИНа 80 и растворзатем разбавляли до желательной кон-.центрации физиологическим растворомхлорида натрия. Результаты указаны10 в процентах,Антигипоксическое действие..15 различными дозами веществ и спустя60 мин измеряют при гипобаргипоксических условиях (170 торр) длительность переживания. В табл. 1 указановремя переживания в процентах к конт 20 РолюВлияние на способность к обучению.(Еззтапп Ы.В., А 1 регп Н.: Рзуспо 1.Кер.,41, 731 (1964). Иьппей обрабатывают исследуемыми веществами в дозе25. 5 мг/кг и с помощью однократного Елея(одностороннего) -метода пассивной за: щиты подвергают процессу обучения.Жи. вотных помещают в "тамбур" бокса для исследования и после того, как они по 30 пали в темный бокс, они получают удартоком (1,5 мА, 0,3 с)Спустя неделюживотных контролируют; из латентноговремени защиты (время вплоть до входав бокс) берут среднее и выражают впроцентах от контроля.Влияние на гипоксическое АЕпв 1- г 1 оп-подавление.Крыс (и:4) ежедневно обрабатываютразличными дозами испытуемых веществ40 и затем в автоматизированном, двигающемся взад и вперед боксе (7 К 1, ежедневно 50 циклов, межсигнальное время 15 с, световое возбуждение 15 с,10 с освещение и электрическое разд 45 ражение 0,8 мА) в течение 3-х днейпри нормобаргипоксических условияхподвергают процессу обучения(67 О). Число обусловленных реак ций на 3-й день сравнивают с таковым50,контрольной группы, отклонениеРвыражают в процентах, (САВ. 7.)В качестве стандартного вещества используют никэрголин.Результаты испытаний представлены в табл. 1, где средняя продолжительность переживания контрольныхживотных (Х + ЯА) : 3,3 + 0,19 мин;латентное время защиты контроля(перорально),мг/кг хлор никэрголин 103 1,0 Антигипоксинноедействие (времяпереживания),процент к контролюВлияние на способность к обучению (латентноевремя защины),процент к контролюВлияние на ги 276 109 182 131рб.поксическое подавление ЯСАК (%) 150150 2,510,0 Из табл. видно, что при гипобаргипоксических условиях доза 2,5 мг/кг никэрголина не влияет на среднее время переживания, в то время как 2- хлор-никэрголин значительно повышает толерантность животных уже в дозе 1,0 мг/кг. Плохая трудоспособность35 подвергнутых процессу обучения при нормобаргипоксических условиях животных нормализуется с помощью 2,5 мг/кг 2-хлор-никэрголина в то время как7 40 стандартного вещества требуется 4- кратная доза. Улучшение способности к обучению в случае 2-хлор-никэрголина (предполагаются одинаковые дозы) значительно лучше, чем таковая никэрг еголина,В биохимическом отношении соеди" нения исследовали на блокирующие ю-, ю- и Р- рецептор свойства, а также на синалтосомальное действие,Связывание сей -1-рецепторами.Крыс (Наппоче Ч 1 зСаг) декалитиру-, ют, кору головного мозга препарируют и гомогенизируют в 20-кратном объеме бу фера (50 ммоль трис-НС 1,рН = 8,0) .Мембраны отделяют путем центрифугирования дважды в течение 15 мин при ускорении 45000 я и затем суспендируют на 1 г 5 14455 лина и 77,0 + 16,4 с для 2-хлор-никэрголина; САК животных, содержащихся в нормокснческих условиях; 92,0 + + 1,2%; САК содержащихся в гипоксических условиях животных: 22,0+5,0%.Таблица 1. в 30 мл буфера (концентрация белка 1,7-1,8 мг/мл) .Для исследования связывания с Ы,-1-рецепторами применяют мембранные препараты, лиганд (0,5 нмоль Н- празозина) и исследуемое соединение, общим объемом 1. мл. Пробы инкубируоют 30 мин при 23 С, отфильтровывают через Ватман-СЕ/В-Фильтр и промывают еще 4 раза 4 мл буфера. Для определения неспецифического связывания используют 10 мкмоль Фентоламина.Связывание со 1 -2-рецепторами.Крыс (Наппочег ИхзСаг) декапитируют, кору головного мозга препарируют и гомогенизируют в 30-кратном объеме буфера (30 ммоль трис-НС 1, рН = 7,4), Мембраны отделяют путем центрифугирования дважды в течение 15 мин с ускорением 45000 я и затем суспендируют на 1 г в 50 мл буфера (концентрация белка 0,9-1, 1 мг/мл) .1Для исследования связывания сЫ;2-рецепторами применяют мембранныепрепараты лиганд (1,0 нмольН К кх 781094=Н-дазоксан) и исследуемыесоединения, общим объемом 1 мл. Про-бы инкубируют 20 мин при 23 С, затемнаносят на Ватман-СР/В-фильтр и промывают дважды 4 мл холодного буфера.Для определения неспецифического связывания используют 10 мкмоль фентол-Намина.Связывание с П"рецепторами.Крыс (Наппочег ИзСаг) декапитируют, извлекают из их головного мозга3полосатые препараты (ЯСгхаСргарагаСе),Полосы гомогенизируют в 10-кратномобъеме холодного буфера (50 ммольтряс-НС 1, 120 ммоль ЫаС 1, 2 ммольКС 1, 1 ммоль МИС 1, 5 ммоль СаС 2 ирН =- 7,4) и центрифугируют 15 минлри ускорении 40000 я. Полученныйседимент суспензируют на 1 г в100 мл буфера (концентрация белка0,7-0,8 мг/мл).Для определения связывания с 0-2 рецепторами применяют мембранныесуспензии, лиганд (0,5 нмольНспироперидола) и исследуемое соединение в заданной концентрации, общимобъемом 2 мл. Пробы инкубируют 15 минлри 37 С, наносят на Ватман-СГ /Вфильтр и промывают дважды 5 мл буфера, Для определения неспицифического связывания используют 1 мкмоль1445557 Во всех трех описанных способахсвязывания рецепторов на находящейся в кювете фильтровальной бумагеполучается сциптилляционный "коки5теиль, а на следующий день измеряют изотопную активность.4,Са в поглощен на синаптосомах,Синаптосомные препараты готовятиз коры головного мозга крыс по методу Иц и др. (Р.Н. Иц, Л. И. РМ 111 з, П.1. ТМеггу:.1. Бецгосйеш,39, 700 (1982), Содержание белка составляет 20 мг/мп,15 Та блица 2 2-хлор икэр 45никэр- голикголин Соединение Формула изобретения 1 С, нмоль: о - 1 Ы -2 РЫ -1 к0-2- 1Со (моль)Са+ 7,0 26 Для исследования используют буофер с установленным при 37 С с помощью Карбогена рН, равным 7 (112 ммоль,НаС 1, 5 ммоль КС 1, 1,3 ммоль МдС 1,1,2 ммоль ИаНРО 4, 1,2 ммоль СаС 1,10 ммоль глюкозы, 20 мысль Трис). В,целом имеющую объем 1 мл смесь (буфер, исследуемое вещество, 1 мг синап-,отосом) инкубируют при 37 С в течение 2520 мин и затем измеряют индуцированное с помощью К (45 ммоль) 4 Сапоглощение, используя в качестве контроля индуцированное с помощью НаФ(132 ммоль ИаС 1, 5 ммоль КС 1, 1,3 ммоль35МдС 1, 1,2 ммоль СаС 1, 20 ммоль Трис,грН = 7,4). Оставшуюся на фильтре радиоактивность измеряют в 10 мл сцинтилляционного "коктейля".Результаты измерений представленыв табл, 2,Из данных табл. 2 видно, что о адренорецепторная активность обоих соединений по величине практически одинаковая; 1 С -значения низкие т.е, оба соединения очень активны, Одновременнос-рецепторная активность 2-хлор-никэрголина в 13 раз выше,.чем таковая никэрголина. Эта ярко выраженная адренорецепторная селективность 2-хлор-никэрголина видна из соотношения селективностей Э/с.Важное биохимическое действие 2-хлор-никэрголина состоит в том, что он по сравнению с никэрголином имеет в 4 раза большую активностьпри подавленииСа -поглощения синаптосомалями.Из фармакологических и биохимических результатов можно установить, что 2 - галогенированные производные никэрголина в применении к тем же областям, что и никэрголин, являются клинически активными, однако. их действие намного сильнее и селективнее. Результаты биохимических исследований хорошо коррелируют с обнаруживаемыми наосновании фармакологических исследований сильными антигипоксическими и улучшающими когнитивные Функции головного мозга действиями.При разработке предложенного способа установлено, что введение атома галогена в начале синтеза (получение 2-галогенилизергола) дает такие преимущества: в дальнейшей части синтеза реакции протекает в течение более короткого времени, проще и с лучшим выходом, образуется меньше побочных продуктов и структурных изомеров; чем это имеет место в случае не содержаших в 2-положении никакого атома галогена промежуточных продуктов. 1, Способ получения 2-галогенникэрголинов общей Формулы 11445557 Составитель И, федосееваТехред М.Ходанич Корректор Л.ПатейРедактор М. Келемеш Тираж 370 . ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035Москва, Ж 35, Раушская наб., д. 4(5МюПроизводственно"полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Заказ 6517/59 9где Х -атом хлора нлн брома, этерификацией производного люмилиэергола с помощью производного 5- бромникотиновой кислоты в присутствии пиридина, о т л и ч а ю щ и й 5 с я тем, что, с целью упрощения процесса и расширения ассортимента це левых продуктов, в качестве производного люмкпизергола используют 1-метил-галоген-люмилизергол общей формулы 11 где Х " имеет вьппеуказанные значения,а в качестве производного 5"бромникотиновой кислоты используют активированный сложный эфир, полученныйиз Я-оксисукцинимида и 5-бромникотиновой кислоты, и процесс проводят прикомнатной температуре.