Способ количественного определения дротаверина гидрохлорида

Союз Советских Соцнвлнстнческнх РеспубликОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СИИ ЕТЕЛЬСТВУ 11789713(51)М. Кл, 0 01 й 21/78 Государственный комитет СССР по девам изобретений н открытий(54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДРОТАВЕРИНА ГИДРОХЛОРИДА Изобретение относится к аналитической химии, а именно, к способам определения дротаверина гидрохлорида и может быть использовано в лабораториях аптечных управлений и био .химических лабораториях при исследовании фармакокинетики данного препарата.Известен способ спектрофотометрического количественного определения 10 дротаверина гидрохлорида, основанный на измерении адсорбции при различных длинах волн в ультрафиолетовой области (360, 305 и 275 нм) 11 .Недостаток способа состоит в его невысокой чувствительностии неселективности.Цель изобретения - повышение чувствительности и селективности способа, 2 а указанная цель достигается описываемым способом количественного определения дротаверина гидрохлорида, заключающимся в обработке анали зируемой пробы раствором перманганата калия в присутствии концентрированной серной кислоты и перекиси водорода с последующим измерением флуоресценции полученного раствора, 3( Максимум возбуждения флуоресценции соединения, полученного в результате взаимодействия дротаверина гидрохлорида с перманганатом калия в кислой среде в области от 320 до 420 нм, а максимум флуоресценции при 471 нм в области от 400 до 550 нм.Линейная зависимость интенсивности флуоресценции от концентрации дратаверина гидрохлорида лежит в области от 0,01 до 20 мкг/мп (табл. 1).При содержании 2 мкг/мл в моче и крови открывается полностью (100) т.е. компоненты крови и мочи не влияют на интенсивность флуоресценции.В лекарственных формах, в сос" тав которых входит дротаверин гидрохлорида, сопутствующие ингредиенты (наполнители) также не влияют на интенсивность флуоресценции.П р и м е р 1. Определение 2-ного раствора дротаверина гидрохлорида в лекарственной форме.0,5 мл 2-ного раствора исследуемого вещества. переносят в мерную колбу на 100 мл доводят дистиллированной водой до метки и тщательно перемешивают. К 0,5 мл данного раствора прибавляют 8,5 мп дистиллированной воды, 1 мл концентрированнойсерной кислоты, 2 капли 3-ного раствора перманганата калия, энергично встряхивают и через 1 мин до-бавляют 1 каплю 3-ного раствораперекиси водорода, перемешиваюти измеряют интенсивность флуоресценции полученного раствора. Содержание дротанерина гидрохлорида определяют по калибровочномуграфику, для чего в ряд пробирок отмеряют 0,1, 0,3, 0,5, 0,7 и 0,8 млстандартного водного раствора дротаверина гидрохлорида с содержанием10 мкг/мл, доводят все растворы до9 мл дистиллированной водой, прибавляют 1 мл концентрированной сернойкислоты, 2 капли 3-ного раствораперманганата калия, энергично встряхивают, через 1 мин добавляют 1 каплю 3-ного раствора перекиси водорода и флуориметрируют.одновременно с растворами исследуемых образцов. По результатам этих измеренийстроят калибровочный график.Результаты количественного определения дротаверина гидрохлоридапредставлены в табл. 2. На каждое,определение взято 0,5 мл 2-ного раствора дротаверина гидрохлорида.П р и м е р 2. Определение дротаверина гидрохлорида в таблетках по0,04 г.Точную навеску (0,05 г) мелкоизмельченной таблетки помещают вмерную колбу емкостью 200 мл, прибанляют 50 мл дистиллированнойводы и энергично встряхинают 23 мин, доводят объвм колбы водой дометки. Тщательно перемешивают.К 0,5 мл данного раствора прибавляют 8,5 мл дистиллированной воды,1 мл концентрированной серной кислоты, 2 капли 3-ного раствора перманганата калия, энергично встряхивают и через 1 мин прибавляют 2 капли 3-ного раствора перекиси водорода, измеряют интенсивность флуоресценции,Содержание дротаверина гидрохлорида рассчитывают по калибровочному графику, для чего в ряд пробирок отмеряют 0,1, 0,3, 0,5, 0,7и 0,8 мл стандартного водногораствора дротаверина гидрохлорида ссодержанием 10 мкг/мл, доводят нсерастворы до 9 мл дистиллированнойводой, прибавляют 1 мл концентриронаннрй серной кислоты, 2 капли3-ного раствора перманганата ка"лия, энергично встряхивают, через1 мин добавляют 1 каплю 3-ногораствора перекиси водорода и флуо-.риметрируют одновременно с растворами исследуемых образцов. По результатам этих измерений строятКалибровочный график. 3 10 13 26 25 30 35 40 45 Зо 55 60 65 Результаты количественного определения дротаверина гидрохлорида в таблетках по 0,04 г представлены в табл. 3.П р и м е р 3, Определение дротанерина гидрохлорида в таблеткахв никошпане (0,078 г дротанеринагидрохлорида и 0,022 г никотиновойкислоты).Точную нанеску (0,05 г) мелкоизмельченной таблетки помещают вмерную колбу емкостью 200 мп, прибавляют 50 мл дистиллированной воды и энергично встряхивают 2-3 мин,объем колбы доводят водой до метки.Тщательно перемешивают. К 0,5 млданного раствора прибанляют 8,5 млдистиллированной воды, 1 мл концентрированной серной кислоты, 2 капли3-ного раствора перманганата калия, энергично встряхивают и через1 мин измеряют интенсивность Флуоресценции, предварительно разбавивполученный раствор до 20 мл и взявна анализ 10 мл,Содержание дротаверина гидрохлорида рассчитывают по калибровочномуграфику, для чего в ряд пробирок отмеряют 0,1, 0,2, 0,3, 0,5, 0,7 и0,8 мл стандартного раствора (водного) дротаверина гидрохлорида ссодержанием 10 мкг/мл, доводят всерастворы до 9 мл дистиллированнойводой, прибавляют 1 мл концентрированной серной кислоты, 2 капли3-ного раствора перманганата калия,энергично встряхивают и через 1 миндобавляют 1 каплю 3-ного раствораперекиси водорода и Флуориметрируютодновременно с растворами исследуемых образцов.По результатам этих измеренийстроят калибровочный график. Результаты количественного определениядротаверина гидрохлорида в,таблетках никошпан представлены н табл.4.П р и м е р 4. Определение дротаверина гидрохлорида в моче.К 5 мл мочи прибавляют 5 млфосфатного буферного раствора(рН 10),затем прибавляют 5 мл хлороформаи энергично встряхивают в течение5 мин. После расслаивания хлороформный слой слинают в выпарительнуючашку. Экстракцию повторяют. 5 млхлороформа сливают в выпарительную чашку и выпаривают на водянойбане. К осадку прибавляют 9 млдистиллированной воды, через 1 минприбавляют 1 мл концентрированнойсерной кислоты, перемешивают, прибавляют 5 капель 3-ного раствораперманганата калия и перемешивают.Через 1 мин прибавляют 1-2 капли3-ного раствора перекиси водородаи флуориметрируют одновременно состандартным раствором.Содержание дротаверина гидрохлорида определяют по калибровоч789713 ному графику, для чего в ряд пробирок отмеряют 0,1, 0,3, 0,5, 0,7 и 0,8 мп стандартного раствора (водно-, го) дротаверина гидрохлорида с содержанием 10 мкг/мл, доводят все растворы до 9 мл дистиллированной водой, прибавляют 1 мл концентрированной серной кислоты, 5 капель 3-ного раствора перманганата калия, энергично встряхивают и через 1 мин добавляют 1 каплю 30-ного раствора перекиси водорода и флуориметрируют одновременно с раствором исследуемых образцов.По результатам этих измерений строят калибровочный график.результаты количественного определения дротаверина гидрохлорида представлены в табл. 5.П р и м е р 5. Определение дрота- верина гидрохлорида в крови.К 1 мл плазмы крови прибавляют 5 мл фосфатного буфера (рН 8-8,5), 5 мл изоамилового спирта и встряхивают 10 мин.Слой изоамилового спирта после. расслоения сливают в выпарительную О Таблица 1 10 19- 28 37 47 56 65 76 85 94 Таблица 2 Х=О, 01928 49 0,0196 0,0200 0,0192 0,0184 0,0208 0,0204 50 Ь =+0,00121 г 46 52 Е 09 =+0,00918 г0,01 0,02 0,03, 0,04 0,05 0,06 0,07 0,08 0,09.0,11 0,1 2 0,2 4 0,3 6 0,4 8 0,5 10 0,6 12 0,7 14 0,8 16 0,9 18 1,0 20 чашку. Экстракцию повторяют, 5 ькизоамилозого спирта сливают в выпарительную чашку и выпаривают на водяной бане, К осадку прибавЛяют 9 млдистиллированной воды, 1 мл концент"рированной серной кислоты, перемешивают и приливают 4 капли 3-ногораствора перманганата калия и перемешивают. Через 1 мин прибавляют 1каплю 30-ного раствора перекиси водорода, перемешивают и измеряют интенсивность флуоресценции полученного раствора. Содержание дротаверина гидрохлорида определяют по стандартному раствору, содержащему 1, 3, 5 или.10 мкг/мп. Для этого к 9 мл стандартного раствора прибавляют,1 мл концентрированной серной кислоты, 4 капли 3-ного раствора перманганата калия и перемешивают. Через 1 мин прибавляют 1 каплю 30-ного раствора перекиси водорода, перемешивают и флуориметрируют одновременно с растворами исследуемых образцов. 10 10 21 2129 3038 3947 49 57 . 58 66. 68 76 79 85 88 96 98=0,03933+0,00184 г Го =+ 0,000860 Истинное эначени определяемой величины:789713 10 Таблица 5 Содержание дротаверина гидрохлорида в мг через 3 ч 6 ч 9 ч 12 ч 15 ч 18 ч 21 ч 24 ч Всего зас тки 3,7 2,6 2,5 2,1 1,8 1,6 15,8 0,4 Формула изобретения Составитель С. ХованскаяРедактор Е. Шишкин Техред С.Мигунова Корректор И. Муска Заказ 9023/36 Тираж 1019 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035 Москва, ЖРаушская наб. д. 4 5 филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4,Способ количественного определения дротаверина гидрохлорида, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения чувствительности ,и селЕктивности способа, пробу анализиргемого вещества обрабатывают перманганатом калия в присутствии концентрированной серной кислоты и перекиси вОдорода с последующим измерением флуоресценции полученного при этом раствора.ИСточники информации,принятые во внимание при экспертизе1. 5 гаЬо 1 в . А Опаге 1 п саЫ ест.а Ьафосвуа 9 йегса 1 вапаЕ аедйа 1 агоазо Асйа СЬагщасепйса Нцпцагса 1976, 46, 183-188 прототип)