Способ получения 5 3 -(2 2, 2, 2-трифторэтил гуанидино)-пиразол1ил -валерамида или его малеината

СВОЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИРЕСПУБЛИК И 9) (11) 4 С 07 С 127/1 ГОСУДАРСТВЕННЫ ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕ ОМИТЕТ СНИЙ И ОТКРЬ ВСЮИОЗН 11 М=Х3 СН 2-СОМ ата,щ и й стилцианарамидомссы в ки или его о т л и 2,2,2-т ют взаим зол-ил реакцио мале тем, ч ю мид подверга-аминопирари кипении ифтор одейс )-вал лои среде, массу обра"щ растворомеский слойевой проиде, либо в кислотой,нои кционн после чего реа батывают воднь и этилацетатом ело чнь рганич(71) Империал Кемикал Индастриз ПЛС(72) Тобиас Орегон Еллино 18)и ДэвидДжон Гилман (СВ)-ИЛ-ВАЛЕРЬМИДА ИЛИ ЕГО ИАЛЕИНАТА е отделяют и выделяют ц дукт либо в свободном виде соли с малеиновоЦель изобретения - изыскание нового гуанидинового производного,проявляющего улучшенные свойствакак антагонист гистамина Ни ингибирующего секрецию кислоты желудочного сока.П р и м е р 1. 5-3-(2-(2,2,2-Трифторэтил-гуанидино)-пиразол-ил 1-валеронитрил (13 г) добавляют в течение 10 мин к концентрированной серной кислоте (65 мм)при одновременном перемешивании.Полученный раствор поддерживаютпри 20 С в течение 18 ч и затеморазбавляют льдом (300 мл) и подщелачивают посредством 10,8 н. гидратаокиси натрия до достижения величины рН 9. Смесь экстрагируют этилацетатом (Зх 200 мл) и экстракт высуши"вают (над сульфатом магния) и выпаривают в вакууме до получения в остатке масла, которое кристаллизуется.Сырой продукт перекристаллизовываютиз ЕСОАс, в результате чего получается 5- 13-(2-(2,2,2-трифторэтил-гуанидино)-пиразол-ил-валерамид ст.пл. 130 С. Соль малеиновой кислотыополучают путем растворения продуктав ацетоне. Т,пл. получаемой соли183-184 С,20 Исходный материал может быть получен следующим образом. 45Гидрид натрия.в виде пастообразной массы (6,16 г 61%-ной (вес/вес) суспензии в жидком парафине) вводят отдельными порциями в течение 30 мин в раствор 3-нитропиразола (17,4 г) 50 в обезвоженном диметилформамиде (Н 1 Ф) (150 мл) с внешним охлаядением льдом с целью поддержания температуры раствора 20-80 С, Смесь перемешиовают в течение 45 мин и к почти про зрачному раствору добавляют 5-бромвалеронитрил (25 г) в течение 30 минопри 25-30 С. Смесь перемешивают в те 1 194Изобретенйе относится к синтезу гуанидиновых производных, являющихся антагонистами гистамина Ни ингибирующими секрецию кислоты желудочного сока, а именно к синтезу 5- 13- (2-2,2,2-трифторэтил-гуанидино)-пиразол-ил-валерамида фор- мулы 271 2чение 4 ч, Добавляют воду (45 мл) и ЕСОАс (4,0 мл) и верхний слой отделяют, высушивают (над МАМБО,1) и выпаривают в вакууме до получения в остатке масла, которое представ.ляет собой смесь 5-(3-нитропиразол- -ил)-валеронитрила и 5-(5-нитропиразол-ил)-валеронитрила. Это масло разделяют на две (по 15 г) порции, которые фракционируют, пропуская их через колонку с силикагелем (диаметр 3,5 см, длина 100 см); элюирование осуществляют при давлении 2 атм смесью этилацетат - петролейный эфир (т.кип. 60-80 С), взятой в соотношеонии (об/об) 3:7. Сначала элюируется 3:5 изомер, а затем 1:3 изомер. Получаемый 5-(4-нитропиразол-ил)- о -валеронитрил имеет т.пл. 32-33 С.К раствору 5-(3-нитропиразол- -ил)-валеронитрила (9,16 г) в обезвоженном тетрагидрофуране (200 мл) добавляют палладий (5% вес/вес) на угле (1,8 г). Смесь перемешивают при 20 С в атмосфере водорода. В течениео4 ч абсорбируется 3,2 л водорода. Катализатор отфильтровывают и фильтрат выпаривают в вакууме, в результате чего получается 5-(3-аминопиразол-ил)-валеронитрил в виде масла.В раствор 5-(3-аминопиразол- -ил)-валеронитрила (7,0 г) в апетонитриле (25 мл) вводят 2,2,2-трифторэтилизотиоцианат (6,02 г). Спустя 15 мин растворитель выпаривают в вакууме, в результате чего получается 5-3-3-(2,2,2-трифторэтил)-тиоуроидо 1-пиразол-ил-валеронитрил в виде белого кристаллического твердого вещества, с т.пл. 96-98 С.Указанную тиомочевину (12,5 г) растворяют в 8-молярном растворе аммиака в ЕСОН (120 мл), К раство- . ру добавляют окись ртути (12,8 г) и смесь перемешивают при 20 С в тео чение 30 мин. Полученную смесь фильтруют и фильтрат выпаривают в вакууме, в результате чего получается 5" 3-(2-(2,2,2-трифторэтил 1-гуанидино)-пиразолил-валеронитрил в виде масла. Образец этого масла растворяют в ацетоне и добавляют 5- молярные эквиваленты малеиновой кислоты. К образующемуся прозрачному раствору .добавляют диэтиловый эфир, в результате чего получается кристаллический малеат с т,пл. 123- 125 С.20 3 1194Кроме этого, 5-3-(2-(2,2,2-трифторэтил 1-гуанидино)-пиразол-илвалеронитрил может быть получен врезультате реакции 3-аминопиразолас 2,2,2-трифторэтилизотиоцианатомреакции полученной тиомочевины саммиаком в присутствии окиси ртутили алкилирования у азота в 1-положении З-Ц 2,2,2-трифторэтил -гуанидино-пиразола с 5-бромвалеронитрилом. ОП р и м е р 2. В раствор 2,2,2-трифторэтилцианамида (О,б 5 г) и5-.(З-аминопиразол-ил)-валФрамида (0,87, г) в ЕСОН (10 мл) вводятконцентрированную соляную кислоту 15(5 капель), Полученную смесь нагревают с обратным холодильником втечение 5 ч. В течение этого периода периодически добавляют концентрированную соляную кислоту в видекапель с целью поддержания величинырН 4. Летучий материал выпаривают ввакууме, и остаток после выпаривания взбалтывают вместе с 2 н, воднымраствором гидрата окиси натрия 25(10 мл) и ЕСОАс (35 мл). Органический слой отделяют, и водную фазуснова экстрагируют этилацетатом-валерамида с т.пл. 180-182 С,Альтернативно объединенные экстракты можно выпарить и остаток перекристаллизовать из этилацетата, получая при этом продукт в виде свободного основания. Т.пл. 130 С,о402,2,2-Трифторэтилацианамид, используемый в качестве исходного материала, может быть получен следующим образом.Цианогенбромид (1,0 б г) раство 45ряют в холодном диэтиловом эфире(5 мл) и добавляют к раствору 2,2,2-трифторэтиламина (1,98 г) в холодномдиэтиловом эфире (5 мл), Смесь нагре -овают до 20 С в течение 30 мин, затем 50фильтруют, Осадок на фильтре промывают диэтиловым эфиром и соединенныефильтраты выпаривают в вакууме прио20 С, в результате чего получается2,2,2-трифторэтилцианамид в виде текучего масла, которое отверждается .опри выдержке при -15 С. Инфракрасныйэрспектр показывает полосу при 228 см 271 4(которая соответствует -СИ,1. Спектр ядерного магнитного резонанса (Я 1 р 1 Р) в 1)-метаноле с тетраметилсиланом, служащим в качестве внутреннего стандарта (Я=О) показывает резонанс (8) 3,65 (квартет).Активность антагонистов гистамина Нбыла испытана посредством стандартных испытаний, например, по способности соединения формулы 1 ингибировать вызванную гистамином положительную хронотропную ответную реакцию при спонтанном биении правого предсердия морских свинок, или по, способности этого соединения ингибировать вызванное гистамином поглощение аминопирина в кислотное пространство париетальных клеток (т,е, обкладочных клеток желез желудка).Испытания на морских свинках осуществляют следующим образом. Правое предсердие морской свинки подвеши вают с натяжением 1 г (изометрическое натяжение) в тканевой ванне с термостатическим регулированием (80 С, емкость 25 мм), содержащей насыщенный кислородом (957 О, 5 Е СО ) буфер КгеЬз Непзе 1 еС (рН 7,4). Ткань стабилизируется в течение 1 ч и в течение этого времени она промывается 2-4 раза; Отдельные сокращения регистрируются посредством датчика силового смещения с использованием измерителя деформации, а мгновенные частоты сокращения регистрируются посредством кардиотахометра, Получают значение контрольной ответной реакции на 1 мкмоль гистамина, после чего ткань промывают три раза и снова приводят в равновесное состояние до основного показателя частоты. После установления равновесия, длящегося 15 мин, вводят испытываемое соединение до желаемой конечной концентрации. Через О мин после введения соединения снова вводят гистамин (1 ммоль), и ответную реакцию на гистамин в присутствии антагониста сравнивают с контрольной ответной реакцией на гистамнн, Результат выражен в процентах от контрольной ре-. акции на гистамин. После этого стандартными методами определяют кажу- .щуюся константу диссоциации антагониста гистамина Н,Испытание с аминопирином осуществляют следующим образом, Удаляют слизистую оболочку желудка изЗаказ 330/62 Тираж 383 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 мышцы дна желудка и промывают ее в буфере 1 (содержащем на 1 л раствора, г: ИаС 1 8,007; КС 1 0,201; Ма НРО 0,113; КН РО 0,204; СаС 1 2 Н О 0,132; М С 1 0,101 и глюкозза 1, с регулированием величины рН до 7,4 посредством ИаОН). Ткань тонко измельчают, суспендируют в .буфере 1.и промывают три раза буфером 1. Затем ткань суспензируют в диспергирующей среде: коллагеназа (Бцша Спеш 1 са 1 Со Тип У; 100 мг) и альбумин коровьей сыворотки (М 1 ев ЬаЬогМогхев ЬМ, фракции У; 100 мг в буфере 1 (100 мл); 50 мл на 10 г чистого веса ткани и термостатируоЭют при 30 С и величине рН 7,4 (поддерживаемой путем непрерывного регулирования) при перемешивании в атмосфере кислорода, По прошествии 0 мин ткани дают возможность осесть и поверхностный жидкостный слой удаляют, Вводят свежую порцию диспергирующей среды и продолжают термостатирование с использованием ткани, которая в большей своей части диспергируется в железы и целые клет-; ки по прошествии 40-60 мин. Любые оставшиеся большие кусочки ткани удаляют путем фильтрации через нейлоновую сетку. Смесь желез и клеток извлекают путем центрифугирования при 200 х г, и суспензируют в буфере 1, содержащем 1 альбумина коровьей сыворотки (Мх 1 ез ЬаЪога 1 огхез ЬЛЙ, фракция У).,И, наконец, железы и клетки промывают три раза буфером 1, и суспензируют в буфере 2 (содержащем Ьад 1 ез МЕМ (500 мл), Апротин (Бдша СЬеЫса 1 Со 10 мг), и НЕРЕБ (т.е. 2-1,4-(2-оксиэтил) -пиперазин-ил 3-зтаноульфокислоты) 150 ммоль; 20 мл), при поддержаниивеличины рН 7,4 посредством ЦаОН;150 мл на 10 г чистого веса ткани.Эту тканевую суспензию перемешивают 5 6в атмосфере кислорода при 32 С втечение по меньшей мере 1 ч, послечего ее можно использовать. Тканевую суспензию термостатируют вместе с испытываемым соединением и амиИнопирином (10 мкмоль), меченым Св диметиламиновой группе (0,1 мк ххдюйм /мл), в течение 20 мин. ЗатемЧпоглощение аминопирина стимулируютпутем добавления гистамина и ингибитора фосфодизстеразы 1 С 1 63197до конечных концентраций 10 мольи 5 х 10 моль соответственно. Попрошествии 18 мин клетки (железы)извлекают из термостатированной среды путем фильтрации суспензии черезстеклянный микрофибрильный фильтр,Клетки (железы) быстро (в течениеменее чем 1 О с) промывают три раза 25 охлажденным льдом буфером 1. АминоФпирин, меченый С , удерживаемый тканью, измеряют с помощью сцинтилляционного счетчика и степень ингибирования поглощения испытываемым соединением рассчитывают путем сопоставления с контрольным образцом.Затем с помощью графиков, полученныхв ряде испытаний, проводимых приразличных концентрациях, рассчитывают концентрацию испытываемого соединения, дающую ингибирование на 50 ,Соединение формулыи его соли бо.ли активными в опыте в концентрации0,0036 мкмоль.Активность известного вещества3-(2-гуанидинотиазол-илметилтио)