Способ получения 9-2-оксиэтоксиметил-гуанинфосфатов

ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК ПАТЕНТУ Союз Советских Социалистических Республик(51)м, к,з С 07 Г 9/09 А 61 К 31/66 Государствеккый комитет СССР ко делам иаобретекий и открытий(53) УДК 5 47. 26 118.07 (088,8) Дата опубликования описания 0709.81 1) Заявител2-ОКСИЭТОКСИМЕТИЛ 1 -ирного ра пит - иде выход ем присмесильдом.фосфатеской к области оединений,. ия новых анинфосфато6 Н 00 Н 20 Н 0-Р-ОЕ о где Ч,2 - одинаковые или разные и представляют собой водород или фарма цевтически приемлемый катион, которые обладают противовирусной активностью и могут быть использованы для лечения вирусных заболеваний у млекопитающих. ЮСпособ получения 9- (2-оксиэтоксиметил)-гуанинфосфатов Формулы (Т) в литературе не описан.Йзвестен способ получения Ф тов, например 2-цианэтилфосфат 5 тем взаимодеиствия хлорокиси ра с нитрилом гидракриловой ки Реакцию проводят в среде эфира в присутствии пириднна при охлаждении. иромеауточно обр азующийс я продукт раз -30 осфаа, пу фосфосло ты Изобретение относитс мии фосфорорганических именно к способу получе 9-(2-оксиэтоксиметил)-г общей формулы (1) лагают пут бавления его эф раствора к водного раство ридина со Целевой продух 12-цианэтил выделяют в в крнсталлич бариевой соли 60) Г 1.7Известен способ получения гуанозин-фосфата путем фосфорилирования гуанозина хлорокисью фосфора в сред пиридина прн температуре от (-.40) до(-10)оС 21.Однако 9- (2-оксиэ токсиметил ) -гуанинфосфаты Формулы (1) указанными сп собами получены не были.Целью изобретения является разработка способа получения новых 9- (2- -оксиэтоксиметил)-гуанинфосфатов.Поставленная цель достигается опи "ываемым способом получения 9-(2-оксиэтоксйметил)-гуанинфосфатов формулы (1), заключакщимся в том, что 2- -оксиэтокснметилгуанин подвергают взаимодействию с хлорокисью фосфора в среде триаякилфосфата при температуре от (-) 30 до. (+) 25 ОС с последующим гидролизом полученного эфирохлорангидркда фосфорной кислоты и выделением целевого продукта в виде кислоты или ее соли.фармацевтически приемлемые соли 9-(2-окснэтоксиметил)-гуанинфосфата получают нейтрализацией 9- (2-оксиэтоксиметил)-гуанинфосфата эквимольным количеством основания, например гидроокиси, бикарбоната или кар" боната, содержащего катион натрия, калия, аммония, кальция, лития, магния или алюминия. Вышеуказанные сали можно также получать обменными реакциями, в которых соль 9-(2-.оксиэтоксиметил)-гуанинфосфата обрабатывают водным раствором соли, содержащей необходимый катион.ПРедлагаемый способ позволяет получать 9-(2-оксиэтоксиметил)-гуанинФосфата .с выходом до 65, 15П р и м е .р 1. Получение 9- (2-окси-этоксиметил)-гуанинфосфата.0,76 мл хлорокиси фосфора добавляют к перемешиваемой смеси 6,225 г 9-(2-оксиэтоксиметил)-гуанина и 5 мл 20 триэтилфосфата, охлажденной до (-) 1 КС. Температуру реакционной смеси поднимают до ОС в течение 30 мин и поддерживают в течение 2 ч. Затем полученную смесь выпивают в смесь воды и льда и рН среды доводят до 7 2 н. водным раствором гидроокиси калия. Полученный раствор дважды экстрагируют хлороформом и один раз эфиром, рН оставшегося водного раствора доводят до 7,1 2 нводным раствором гидро- окиси калия, затем фильтруют. Полученное белое твердое вещество растворяют в 7 мл воды и добавляют 7 мл метанола для осаждения неорганических солей, которые затем отделяют фильтрова35 нием. К Фильтрату добавляют 70 мл ацетона, при этом выпадает в осадок белая смола. Ее растворяют в 7 мл воды, добавляют 7 мп этанопа и смесь фильтруют. К фильтрату добавляют большой 40 избыток ацетона до 70 мл, и снова смола выпадает в осадок. Эту смолу растворяют в 20 мл этанола, растворитель .отгоняют и.получают 2,6 г белого порошка, представлякщего собой 45 смесь неорганических солей и целевого продукта. Твердый осадок растворяют в 10 мл воды, обрабатывают на колонке с био-. гелем Р(200-4 ОО меш, 2,7 х 90 см) и элюируют водой, Данные . 5 р тонкослойной хроматографии на целлюлозе "Истмен Хромаграмф в смеси пропанола и воды (70.:30 о объему)ЮГ=0,26 для 9- (2-оксиэтоКсиметил)- -гуанинфосфата и йУО 11 для 9- (2 У55 -оксяэтоксиметкл)-гуанинкалийфосфата. Элюат фильтруют и получают 0,28 г твердого вещества в котором по данным УФ-спектроскопии содержится 0,2 г целевого продукта. Выход 65, продукт начинает разлагаться прй 210 С.. Элементарный анализ:Найдено,С 31,23; Н, 3,85) .М 2300 Р 10,09Жйчислено, %: С 31,49; Н 3,96; й 22,95; Р 10,15., 65 П р и м е р 2. Получение 9- (2-оксиэтоксиметил)-гуанинажонийфосфата.0,28 г 9- (2-оксизтоксиметил)-гуанинфосфата растворяют в 30 мл воды и рН раствора доводят до 6 с помощью б г водного раствора соляной кислоты. Продукт сорбируют 14 мл уплотненного угля (Фишер 5-690 В, 50- 00 меш, пропитый кислотой и дезактивированный толуолом) . Уголь промывают водой и элюируют 70 мл 50-ного водного этанола, содержащего 2 концентрированиого раствора гидроокиси аммония, Растворитель отгоняют при пониженном давлении и получают 0,048 г 9- (2-оксиэтоксиметил)-гуанинаммонийфосфата, В=О,ЗО на целлюлозе Истмена в смеси пропанола и воды (70:30 по объему), выход 15; продукт начинает разлагаться при 210 С.П р и м е р 3. Получают таблетки следующего состава, мг:9- (2-Оксиметоксиметил)- -гуаниннатрийфосфат 100Лактоза 200Крахмал 50Поливинилпирролидон ,5Стеарат магния 4П р и м е р 4. Готовят офтальмологический раствор следующего. состава;9- (2-Оксиэтоксиметил)- гуаниннатрийфосфат 1,0 гХлористый натрий(аналитический) 0,9 гТимеросал 0,001 гДистиллированная вода До 100 мпрН 5,5-7,5П р и м е р 5. Готовят раствор для инъекций следующего состава.9-(2-оксиэтоксиметил)- -гуаниннатрийфосфат 0,775 гСтерильный, не содержащий пирогенов, фосФатный буфер с,рН 7 До 25 млП р и м е р б, Получение 9- (2-оксиэтоксиметил)-гуаниндинатрийфосфата.54 мл хлорокиси Фосфора добавляют в течение 3 ч к. перемешиваемой охлажденной от (-30)С до (-20)" С смеси 25 г 9- (2-оксиэтоксиметил)-гуанина и 250 мл триэтилфосфата. Температуру реакционной смеси поднимают до ОС в течение 45 мин и смесь поддерживают при этой температуре еще 45 мин, затем рН смеси доводят до 1 2 н, водным раствбром гидроокиси натрия. Полученнйй раствор экстрагируют один , раз хлороформом и один раз эфиром. рН оставшегося водного раствора доводят до 6,8 2 н. водным растворомгидроокиси натрия, затем - до 7,3 .10 н, водным раствором гидроокиси натрия. Конечный объем смеси 2,5 л . Нейтрализованный раствор вносят в колонку с 2000 г Довекс 1 х 8, уравновешенной 50 ммсль КНСОЗ. Элюирование ведут при линейном градиенте862828 формула изобретения Ок щ-Юв ое,бн,о-г-ог УФ-спектр;Среда Лиане 35Е А мин " и Составитель М. КрасновскаяТехред С. МигуноваКорректор М. Коста Редактор Н.Потапова Заказ 6659/57 Тираж 397 ВНИИПИ Государственного коьктета СССР по делам изббретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5Подписное Филиап ППП "Патентф, Г, Ужгород,. ул. Проектная, 4 30 л 50-500 ммоль КНСО 5 с последующей промывкой 30 л 500 ммоль КНСОЗ.Фракции, содержащие целевой продукт, объединяют, большую часть КНСОэ удаляют добавлением Доввкс 50-Нф и удалением СО в вакууме. Объем уменьша.ют до 2 л в вакууме и продукт высаживают при 4 фС добавлением 10 л ацетона. Высушенный осадок в количестве 55 г вносят в колонку био-гель Р10 х 110 см и элюируют водой, Получают 22 г твердого вещества. Вещество перекристаллизовывают при 4 фС в виде кислой ссди кз раствора с рН 3. Большую часть вещества получают из маточного раствора кристаллизацией из 20-ного этанола при рН 3, Кислую соль. растворяют в минимальном объеме воды с рН 8,5 (за счет добавления гидроокиси натрия) н осаждают 2 объемамиэтанола при 4 С, Полученный осадок растворяют в 100 мл воды, 20 осаждают 9 объемами этанола при 4 С и получают 15,1 г дигидрата 9- (2-оксиэтоксиметил)-гуаниндинатрийфосфата.Чистоту продукта подтверждают эле ментарным анализом, жидкостной хроматографией под давлением и ультрафиолетовым спектром.Найдено Ъ: С 25,20; Н 3,63;И 18,10 Р 7,89. 30СЗН К 50,Р 2 йа1 НО.Вычислено, %: С 24,949; Н 3,66;.й 1819 Р 804. 0,1 М НС 1 254 129.70 225 272 рН 7 209 14060 219 266 0,1 М ИаОН 255-264 11760 22840 По жидкостной хроматографии под давлением чистота 99 . Отношение основания к фосфату 1,00:1,01. Выход35%, размягчение продукта наблюдаютвблизи 175 оС с постепенным разложением к потемнением прк температуревыше 250 С. Способ получения 9- (2-оксиэтокскметил)-гуанинфосфатов общей форму- лы где Я и 2 - одинаковыв илк разныеи представляют собой водород илифармацевтическк приемлемый катион,заключающийся втом,что 2-оксиэтоксиметилгуанин подвергают взаимодействию с хлорокисью фосфора в среде триалкилфосфата прк температуе от (-) 30 до (+) 25 С споследующим гидролизом полученногоэфирохлорангидрида фосфорной кислотыи выделением целевого продукта в виде кислоты или ее соли.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Пурдела Д., Вылчану Р. Химияорганических соединений фосфора."Химия"р М., 1972, с407.2. Мснеакоп А.МТодд ЬР. Мопопцсеосдев дег 1 чед Югоа Адепови,Оцапозпе, Суйдпе бпд Огдпе .СЬее 5 ос. 1949, 2476-286,