Способ получения несимметричных 6, 7-пептидил-протогеминов 1х

Своз Советскик Социалистических РеспубликС 07 С 103/52 Государственный комитет СССР по дедам изобретений н открытий(72) Авторы изобретения Московский ордена Трудового Красногб Знамени институттонкой химической технологии им. м. В. Ломоносова(54) СПОСОБ НОЛУЧЕИИЯ ЯЕСИММЕТРИЧНЬЖ 6,7-ПЕПТИЦИЛ",способу получения несиммет)вчйыХ,6,7-пеитидил-протогеминов Ц, соединений, обладающих биологичеСКОЙ активностью, которыемогут найти йри"мененне в медицине,В литературе описаны способы 66. лучеиия соединений, близких по структуре к заявляемым, - несимметричныхпроизводных мезогемина 1 Х 1) и (2,,путем конденсации активированных производных меэогемина 1 Х с аминокислотами; Конденсацию проводят или с "использованием сульфангидридов мезогемина 1 Х 1, или карбодиимиднымметодом.Основным недостатком обоих мето"дов является неприменимостьих кпр)сродным желеэопорфиринам - прото атее 20гемину 1 Х из-эа наличия в молекулепоследних реакционноспособных винильных групп. В обоих способах отсутствует строгая направленность процесса,что приводит.к образованию большогоколичества балластных соединеиий изатрудняет очистку целевого продукта.Кроме того, выход целевого продукта,полученного по одному из этих методов, невысок и составляет 38. Известен способ получения несимметричных 6,7-пептидил-протогемииов1 Х 3), а нменног 6(7) -бенэиловогоэфира (Е -лейцилгистидилаланил-Б --бенэилоксикарбонилливилглицил-бензилцистеинил)-7(6)-беизоксигемина, заключающийся в том, что 6(7)-бензоксипротогемин ГХ подвергаютвзаимодействию с этилхлорформиатом,полученный смешанныйангидрид в среде диметилформамида при температуреот -10 оС до ОС вводят во взаимодействие с И -свободным гексапептидом, После хроматографической очист-.ки получают целевой продукт с выходом 26,4,К недостатку, данного способа следует отнести низкий выход .целевого продукта. Целью данного изобретения явля-ется увеличение выхода целевого продукта и получение новых проиэводнйх несимметричных 6(7)-пептидил-протогеминов 1 Х,Поставленная цель достигается описываемым способом получения несим.Яз 1 31Вг - ОСнгСенг- ьец-н 3-1,чг - Оие "):-.заключающимся в том, что б(7)-бензоксипротогемин 1 Х формулыС яаеК, ОСНгСеиз) К 11-ОН, или В 1-биу я еиг ОСнгСЬН 5 )1подвергают взаимодействию с этил хлорфбрмиатом, полученный при этом смешанный ангидрид подвергают взаимодействию с пентафторфенолом и затем полученный активированный пентафторфениловый эфир протогемина 1 Х конденсруют с Я - свободным гексапепЮьтидож .в 2,5-3 молярном растворе мочевины в диметилформамиде при 4045 Св присутствии основания.Данный способ позволяет получить несимметричные производнйе протоге-мина 1 Х с двумя различными функционалъными группами с высоким выходом ( . 60),Отличительным признаком способа является применение в качестве прометричных 6,7-пептидилпротогеминов межуточного,активированного агента Ж общей формулы пентафторфенилового эфира монозамеаьСнг Снг щенного протогемина 1 Х. Это производное, не применявшееся ранее в 11 ЗС С описываемом классе соединений, ак тивно и термодинамически устойчиводлительное время, достаточное дляЭ прохождения реакции, ПентафторфениМ 1 г ловый эфир протогемина 1 Х получают НС Се, методом смешанных ангидридов, Кроме зтого, для дос тиже ния полноты реак-.Нг)г Бг)г ции и увеличения скорости процесса СОВ, СОЯ г используют повышение температуры ре акции до 40-45 С, а в реакционнуюо Вв 1 Ь массу добавляют мочевину (3 М раствор), которая уменьшает стерические ,затруднения в пептиде и увеличивает доступность реагирующей аминогруппы, Выход 6(7)-бензилового эфира (И -лейцилгистидилаланил-Б -бензилаоксикарбоннллизилглицил-Я-бенэилцисЗь 1 20 теинил)-7(6)-бензоксигемина по это -А 1 а-ьец-А 1 а-р 11 е-А 1 а- Сч-Озв 1 му методу составляет 60,4П р и м е р 1, К раствору 0,97 г3 2 а 1 6 (7) -бензилового эфира протогемина или Б -ьги-н 1-А 1 а-ыгч-Сдг-Озв 1 1 х в 10 мл хлористого метилена до бавляют О,б млтриэтиламина и 0,15 мл этилхлорформиата, перемешивают 10 мин при 20 С и вносят 0,355 г пентафторфенола. Реакционную массу Перемешнвают 1 ч при 20 ОС, Растворитель уда- . ЗО ляют в вакууме. Остаток добавляют к . раствору 1,70 г трифторацетата бензилзового эфира лейцилгистидйлаланил" . -И -бЕнэилоКСИкарбониллизилглицил- -Я-бензилцистеина в 10 мл диметилформ-Ег % жида, содержащего 0,42 мл триэтилСн=СНг . амйна и 1,8 г мочевины. Перемешивают8 ч при 40 С, Растворитель удаляют - Мв вакууме, Остатбк чистят на колонке . е СГ сс окисью алюминия П степени активнос ти,.элюируя смесью хлороформ;метанол(92 г 0,8). Выхбд 1,3 Г (60,44) Вк 0,54 (хроматогоайия в тонком слое (ий (й сремниевой кислоты в системехлоро-м Сов, айаг форм - метанол 9:1), 1,пл, 136-139 С. Ъминокислотный анализ гидролизата: А 1 а 1,05 (1) у 3,ец,0,90 (1) г Х,уз 1,00 (1) р НЗ.з 1,04 (1) р 61 у 1,015 (1),П р и м е р 2, К раствору 0,223, г 6(7)-метилового эфира 1 И -лейцил-Б -бензилгистидил-Ж-бензилоксикарбониллизил)-протогемина 1 Х в б мл хлористого метилена при -10 С и перемешивании добавляют 0,11 мл триэтиламина и О 04 мл этилхлорформиата. Переомешивают 20 мин при 10 С, 10 мин 55 при 0 С и вносят 0,143 г ПентафторФенола, Реакционнуо массу перемЕшивают 1,5 при 10 фС. Растворитель удаляют в вакууме. Остаток добавляют к раствору. О, 107 г трифторацетата метилОвого эфира аланиллейцилаланидфенйл- аланилаланил-Ятбензилцистеина в 4 мл диметилформамида, содержащему 0 018 мл триэтиламина и 0,94 г моче-, иовины, Перемешивают 18 ч при 20 С, б ч при 40 С и 24 ч при 20 С, Осадок,а-СвеРЕ Я 1: Неве Яц 1 Ецт1 Ьев 1 в апйвц 1 Юцг 1 с апйуд 1970 , 9,2. Иагве Р. Е, и г 1 с апЬуйгЫев, 1. Я Яеас 11 опв ог вевоИев гЫв,В 1 осЬев 1 вФ.гу 3- 1599-1606. Ьеи-Н- Оввс; А 1 а -Яе+ О Синтезпентамина.72. 3. Молокоедов А. и свойства гистидиыс координационных комп ЮХ, 1977в, 5, с и др. одержащйх ексов ге 1165-11.це - ОМ Составитель В. Волковаедактор С. Лазарева Техред Й.Петко Корректор Г. Решетни Подписноетета СССРкрытийнаб., д. Тираж 495ИПИ Государственного копо делам изобретений иМосква, Ж, Раушска аз 9751/28ЦН Филиал ППППатент, г, Ужгород, ул. Проектн отделяют. Фильтрат выпивают в 50 мл воды и экстрагируют хлороформом (2 х 20 мл) . Экстракт сушат безводным сульфатом натрияРастворитель удаляют в вакууме. Остаток очищают на ,колонке с окисью алюминия Й степеФвни активности, элюируя;смесью хлороФорм-метанол (15:1), и затем на ко. донке с силикагелем, элюируя смесью хлороформ-метанол (10:1), Выход 0,160 г (63,1 Ъ). ВЕ 0,7 (тонкослойная хроматография на силуфоле в системе хлороформ-метанол 8:2), 0,62 (тонкослойная хроматография на алуфоле в системе хлороФорм-метанол 501),,С,ре Н.ье Бе Оиру ГеС 1 1,5 НОэНайдено, Ъ: С 32,58; Н 6,87,Н 11,68, Ре 2,91,Вычислено, %: С 62,57, Н 6,48 уИ 11,33, Ре 2,82."йминокислотный анализ гидролизатагМа 2,80 (3); 1,ец 2,36 (2); Рпе 0,84(1);1,ув 0,92 (1),Формула изобретенияСйособ получения несимметричнЫХ6,7-пептидил-протогеминов 1 Х общейформулы Путем взаимодействия 6 (7) -бензоксипротогемина 3 Д формулы,с этилхлорформиатом с образованием2 О смешанного ангидрида и применениеэреакции конденсации с Ж-свободн;гексапептидом в среде диметилформами а в присутствии основания, о т я йа ю щ и й с я тем что, с целью,повышения выхода целевого продукта ирасширения ассортимента целевыхпродуктов, смешанный ангидрид подвергают взаимодействию с пентафторфенолом и полученный пентафторфенилоО вый эфир монозамещеного протогемина1 Х конденсируют с И -свободным гексапептидом в 2,5-3 молярном растворемочевины при 40-45 С.источники информации,принятые во внимание .при экспертизе35Ф,1. Сапу С. Е., Тгау 1 ог Т. С;,Ие 1 дпЬог 1 пд Огоцр ЕГЕесТ 1 п НевеССагЬоп МопохЫе ВопЖпя , . Авег.Ьев. Яос. 1973 95, с: 8475" 8477,