Способ определения аминокислот, модифицированных высшими жирными кислотами

щ 1 п, 1 Н 30/9 Ям бирателацилирреаген ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМПО ИЗОИ ЕТЕНИЯМ И ОтнПРИ ГКНТ СССР(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АМИНОКИСЛОТ,МОДИФИЦИРОВАННЫХ ВЫСШИМИ ЖИРНЫМИКИСЛОТАМИ Изобретение относится к аналити-.ческой химии, а именно к определению ацилированных жирными кислотамиаминокислот во флотореагенте ААК,и может быть использовано в горнодобывающей промьппленности, химической промьпчпенности и других областяхпроизводства при определении ацилированных аминокислот методом тонкослойной хроматографии,Цель изобретения - повынение изьности и точности определенияованных аминокислот во флототе ААК.(57) Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано в горнодобывающей, химическойпромьппленности и других областяхпроизводства при онределении ацилированных аминокислот методом тонкослойной хроматографии, 1 ель изобретения - повышение избирательности иточности определения ацилированныхаминокислот во флотореагенте ААК.11 робу вещества наносят на пластину ссиликагелем при соотношении вещества и сорбента 1.(1 00-150). ХроматограАичеакре разделение проводят последовательно сначала в "стеме гексан - диэтиловый эфир (1,5 - ".);1, язатем в системе гексан - диэтиловьпэфир - ацетон 1:1:(0,6-0,8). Обнаружение осуществляют в УФ-свете.2 табл. уществляется следуюши Способ ос м образом.,Пробу вещества наносят на пластину с силикагелем при соотношении вещество:сорбиент 1:(100-150), Рядом с анализируемой пробой наносят в виде пятна стандарт - ацилированную жирными кислотами аминокислоту.Хроматографическое разделение проводят последовательно сначала в системе гексан - диэтиловьп эфир при соот ношении компонентов (1,5-2):1, а затем в системе гексан - диэтиловый эфир - ацетон при соотнощении компо1642373 50 нентов 1:1:(0,6-0,8). Обнаружениеосуществляют в Уф-свете.П р,и м е р 1. Навесху флотореагента (0,3020 г) взвешивают на аналитических весах. Смесь ограническихкомпонентов, входящих в состав реагента ААК, выделяют экстракциейхлороформом из подкисленного водногораствора пробы реагента и далее анализируют методом препаративной тонкослойнойхроматографии (ТСХ) насиликагепе,Пробу вещества наносят на пластину с силикагелем ЛЛ 4, при соотношении вещество:сорбент 1 ф 150. Рядом санализируемой пробой наносят в видепятна стандарт " ацилированную жирными кислотами аминокислоту.Хроматографическое разделение 20проводят последовательно сначала всистеме гексан - диэтиловый эфир(1,5:1), а затем в системе гексан -диэтиловый эфир - ацетон (1:1:О,б).Положение ацилированных аминокислот 25на пластинке обнаруживают в Уф-свете,сравнивая с положением стандарта,Силикагель с отмеченной полосы количественно снимают, ацилированныеаминокислоты элюируют с сорбента30хлороформом со спиртом (1:1), растворитель удаляют, остаток сушат ивзвешивают (0,0215 г). Содержание целевого продукта в пробе реагента 14%,П р и м е р 2, 0,4015 г реагентаААК обрабатывают, как в примере 1.Смесь органических компонентов, выделенных из реагента, разделяют спомощью ТСХ на силикагеле ЛСЛ присоотношении вещество:сорбит 1130сначала в системе гексан - диэтиловый эфир (1,7;1), затем в системегексан - диэтиловый эфир " ацетон(1:1:0,7). Выделяют 0,0558 г ацилированных аминокислот, Содержание 45целевого продукта в пробе реагента13,9%; П р и м е р 3. 0,5010 г реагента ААК обрабатывают, как в примере 1. Смесь органических компонетов, выделенных из АКК, разделяют с помощью ТСХ на силикагеле ЛЛ 4 при соотношении вещество:србент 1:100 сначала в системе гексан - диэтиловый эфир (2:1) затем в системе гексан - диэтиловый эфир - ацетон (1: 1: 0,8) . Выделяют О, 0706 г ацилированных аминокислот. Содержание целевого продукта в пробе реагента14, 1%.Ацилированная высшими жирными кислотами 6-аминогексановая кислота,Найдено, %: С 72,44; Н 11,24;И 3,01.Вычислено (для И-олеоиламиногексановой кислоты), %: С 72,86,Н 11,46; 3,54.ИК-спектр, см ф 1470 (ср .,-СН-)1530 (срИН,амидная полоса ТТ); 1665(=СН-СН"СН=,м)3 3,28 (СО Н-СН в ,м.)5,34 (-СН=СН-,м,).К 0,58 (силикагель КСК, гексанэфир - ацетон 1 ф 1:0,8).К стандарта в тех же условиях0,58,Точность и воспроизводимость предложенного хроматографического способа определения ацилированных жирнымякислотами аминокислот проверены настандартных смесях, для составлениякоторых была специально синтезированаи очищена натриевая соль ацилированной жирными кислотами 6-аминогексано"вой кислоты. Результаты приведеныв табл,1,Результаты разделения с помощьюТСХ при различных условиях хроматографирования приведены в табл.2,Разработанный способ определенияацилированных жирными кислотами аминокислот во Флотореагенте АКК отличается точностью, хорошей воспроизводимостью, простотой исполнения,Продолжительность анализа 3,5 - 4 ч. Формула изобретения Способ определения аминокислот, модифицированных высшими жирными кислотами, включающий нанесение пробы вещества на пластинку с сорбентомдвукратное хроматографирование в различных системах с последующим обнаружением в УФ-свете, элюирование разделенных компонентов с сорбента, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения избирательности и точности определения ацилированных51642373 6 аминокислот во флотореагенте ААК, в системе гексан - диэтиловый эфир разделение проводят на силикагеле 1,5-2):1), а затем в системе гексанпри соотношении вещество:сорбент диэтиловый эфир - ацетон (1:1:( 0,6- 1(100-150) последовательно сначала . О 8,5 1Таблица 1 Относительная Содержание ацилированных амино- кислот погрешностьЛхы.100Юа Задано, Х а Найдено, Хх+ х 1 44,1 + 0,25 28,8 + 0,43 20,4 + 0,43 9, 2 +О, 50 43,5 28,4 21,6 9,4 0,6 1,5 2,0 5,3 Таблица 2 Анализируемая проба Условия хроматографического разделения Прототип Стандартная смесь Разделение азотсодержащих компонентов непроисходит Разделение азотсодержащих компонентов не происходит Система гексан:эфир(1,5 1)Вещество,сорбент .1: 100Система гексан:эфир:ацетон (1: 1:0,6) Четкое разделениеотсутствует, наблндается наложение полос отЧеткое разделение отсутствует дельных компонентовНаблюдается частичноеналожение полос Наблюдается частичноеналожение полос Двукратное . элюирование:а/гексан".эфир (2:1) б/гексаи:эфирацетон(1 й 1 й 0,6)Веществофсорбент 1:100 Четкое отделение ацилированных аминокислот отдругих компонентов Четкое отделение ацилированных аминоксилот от других компонентов Составитель В.ТолстыхРедактор М.1 иткина Техред М,Дидык Корректор Н.Король Заказ 1144 Тираж 399 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открьггиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб д, 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул. Гагарина, 101