Реагент для проявления пятен в тонкослойной хроматографии ароматических аминов

СОНИ СОВЕТСНИХсаииквнисиаРЕСПУБЛИК ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТОЗЬСТВУ 5 ОЙГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОВ ЕЕНИЯМ И СЕВ ЦТИЯМПРИ ГКНТ СССР(56) Кирхнер 10, Тонкослойная хроматография, М.: Мир, 1981, т.1, с,.460 - 463.Ацз. З.СЬетп, 1985, 38(3), 435 - 45. Изобретение относится к применению 5-хлор,6-динитробензофуразана в ка.честве реагента для проявления пятен в тонкослойной хроматографии ароматических аминов,иа,ЪЪ дЦелью изобретения является повышение избирательности реагента и упрощение выполнения анализа за счет(54) РЕАГЕНТ ДЛЯ ПРОЯВЛЕНИЯ ПЛТЕН ВТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ АРОМАТИЧЕСКИХ АМИНОВ(57) Изобретение относится к гетероцнклическим соединениям, в частностик применению 5-Хлор,6-динитробензофуразана в качестве реагента дляпроявления пятен в тонкослойной хроматографии ароматических аминов 5;хлор-.4,б-диннтробензофуразан в ацетонитриле позволяет по окраске проявленных пятен проводить качественнуюидентификацию первичных ароматическихаминов в присутствии вторичных и третичных, а также в ряде случаев обнаруживать изомерные и замешенные соединения 5-Хлор,б-динитробензофуразан получают нитрованием 5-хлорнитробенэофуразана, 1 табл,применения 5-хлор,6-динитробензофуразана, ранее используемого в ка- фучестве промежуточного реагента в син- ртезе производных бензофуразана,ЮП р и м е р 1. 5-Хлор,6-динитро-,бензофуразан используется в видеацетонитрильного раствора, Эффективность действия соединения как реагента для обчаружения (проявленияпятен) ароматических аминов методомТСХ проверена в лабораторных условиях на шестнадцати ароматическихаминах, из которых 10 первичных (анилин, 4-нитро-толуидин, 3-броманилин, ч-толуидин, м-.толуилендиамин,орто- и мета- фенилендиамины,6 - и3 16423вторичных (дифениламин, 4-,оксидифениламин, 2- и 4-нитродифениламины,Б-фенилнафтиламин); 1 третичныйамин (трифениламин).5Наряду с этим в тех же условияхопробованы известные проявители. Хроматографическое разделение ароматических аминов проводили в камерахдля восходящей хроматографии по опи Осанным в литературе методикам напластинках БИпо 1 цч(размер150 1 150 мм). Объем наносимого вещества составлял 0,2 мкл. Содержаниеароматических аминов в пробе 1-5 мкг. 15В качестве элюента использовали смесиэтилацетат-гексан (1:3) и (2:3),этанол, четыреххпористый углерод -этилацетат (3:2),Для сопоставления эффективности 20действия предлагаемого и традиционных реагентов испытаны также следующие растворы для опрыскивания пластинок ТСХ: пары иода пластинку помещают на 10 - 15 мин в сосуд, содержащий 25кристаллы иода и несколько миллилитров воды; 5%-ный раствор хлорногожелеза в метанол" .0,4".-ный растворнингидрина в бут. иоде 2 5%-н щраствор родамина 6 Ж в этаноле. 30При опрыскивании раствором 5-хлор 4,6-динитробензофуразана обнаружениепятен алифатических аминов не происходит.Окраска пятен ароматических аминов 35при обработке пластинок ТСХ растворомпредлагаемого соединения возникает вмомент опрыскивания и является устойчивой в течение нескольких недель, В тоже время проявлениепятен разделенных цароматических соединениИ парами иода,растворами хлорного железа, родаминаба и нингидрина наблюдается лишь через несколько минут, а некоторые изароматических аминов вовсе не проявляются данными реагентами (например,изомерные нафтнламины не проявляютсяродамином 6)К),Окраска пятен ароматических аминов при обработке пластинок ТСХ раствором нингидрина - розово-Фиолетовая,не зависящая от состава разделяемойсмеси, Пары иода проявляют амины вкоричневый цвет, плохо выраженный накоричневом фоне пластинки, Хлорноежелезо придает пятнам анализируемыхвеществ слабо-желтую окраску. Приэтом не все из приведенных ароматических аминов обнаруживаются этим 4проявителем. Раствор родамина 6 Жокрашивает пятна аминов в коричневый цвет. Таким образом, известные реагенты проявляют ароматические амины в виде одноцветных пятен.В то же время цвет пятен ароматических аминов при обработке пластинок ТСХ раствором 5-хлор,6-динитробензофуразана в ацетонитриле зависит от природы амина. Первичные ароматические амины дают интенсивно окрашенные оранжевые и красные пятна (анилин, 4"нитротолуидин и др.). Вторичные и третичные ароматические амины имеют окраску от темно-коричневой до темно-фиолетовой, устойчивую в течение нескольких недель. При этом наблюдается различие в окраске вто- . ричных аминов в зависимости от заместителя в бензольном кольце. Например и-окси-дифениламин проявляется в виде темно-коричневого пятна, в то время как дифениламин - в виде интенсивно окрашенного фиолетового пятна. Окраска пятен зависит также от положения заместителя в ароматическом ядре вторичного амина, Так, например, пятна 4-нитро- и 2-нитродифениламинов имеют соответственно темно-коричневую и оранжевую окраску,Отмеченные особенности действия предлагаемого соединения как реагента для обнаружения ароматических аминов методом ТСХ позволяют по окраске проявленных пятен проводить качественную идентификацию первичных ароматических аминов в присутствии вторичных и третичных, а также в ряде случаев - обнаружение изомерныхи замещенных соединений.Ароматические амины в количестве от 1 до 5 мкг надежно определяются раствором 5-хлор,6-динитробензофуразана концентрации 510 и/л. Обработка пластинок ТСХ раствором концентрации 10м/л позволяет обнаруживать ароматические амины в количествах до О, 1 мкг, но окраска обнаруживаемых пятен находится на пределе визуальной оценки, Диапазон оптимальных рабочих концентраций 5-хлор,6-динитробензофуразана в ацетонитриле как реагента для обнаружения ароматических аминов составляет 5 10- 5 10 моль/л. Дальнейшее увеличение концентрации реа-, гента нецелесообразно, поскольку не приводит к улучшению результатов5 164 анализа и вызывают повышенный расход, реагента. Уменьшение концентрации ниже 510м/л вызывает затруднения в анализе аминов изомерного строения. Рабочие растворы реагента в продажном ацетонитриле сохраняют эффективность в течение 3 - 4 недель,Предлагаемый реагент чспользуется не для разделения аминов, а для обнаружения пятен ароматических аминов после их разделения стандартными элюирующими смесями на пластинках ТСХ. Контрастность его как отмечалось выше, в отличие от известных реагентов, позволяет устанавливать присутствие 2372 первичных, вторичных и третичных ароматических аминов в неизвестных смесях даже без сопоставления экспериментальных величин Рс литературными В таблице приведены величины Н проанализированных ароматических и алифатических аминов.Преимуществом предлагаемого реагента для обнаружения пятен ТСХ является то, что 5-хлор,6-динитробензофуразан обеспечивает контрастность, зависящую от степени замещения определяемого амина (оранжевые, красные пятна - для первичных, коричневые, сине- Фиолетовые - для вторичных, сине-зеленые - для третичных ароматических аминов), Эта особенность реагента 20 30 Применение 5-хлор,6-дпнитробензофуразана в качестве реагента для проявлЕния пятен в тонкослойной хроматографии ароматических аминов. Элюент Соединение 0,340,750,480,250,800,380,930,220,280,650,28-НафтиламинФенилнафтиламин4-Нитро-толуидин3-Броманилин4-Толуидинм-Толуилендиамино-Фенилендиаминм-фенил ендиами нДи бутил амин позволяет проводить уверенную визуальную оценку присутствия в анализируемой смеси ароматических аминовразличной степени замещения дажебез использования величин Н, чтосущественно важно в тех случаях, ког"да анализируемая смесь .состоит извеществ различной химической природы(разные классы органических соединений) с близкими или равными значения"ми К в условиях конкретного разделения. Такая особенность предлагаемогореагента может быть использовала дляустановления степени замещения аминовв органическом синтезе при анализереакционных смесей неизвестного состава. Преимуществом предлагаемого реагента по сравнению с известными является и более высокая изоирательность его, так как он образует окрашенные пятна только с ароматическими аминами, не окрашивая пятен алифатических аминов, Фенолов. ф о р и у л а и з о б р е т е н и я Зтилацетат;гексан 1;3 11 Этилацетат:гексан 3:2